Células P19: investigación sobre el carcinoma embrionario con células P19
P19 es una línea celular de carcinoma embrionario murino. Se utiliza ampliamente en la investigación biomédica, principalmente para estudiar la biología del desarrollo, la biología de las células madre, la diferenciación celular y el cribado de fármacos. Dado que las células P19 tienen capacidad de diferenciación, pueden ser útiles para investigar procesos biológicos complejos, como la formación de tejidos y el desarrollo embrionario temprano. En este artículo, analizaremos los aspectos fundamentales de las células P19 derivadas de ratón.
- Medio de cultivo
- Medio DMEM/Ham's F12 que contiene 5 % de suero fetal bovino, 3,1 g/L de glucosa, 1,6 mM de L-glutamina, 1,0 mM de piruvato de sodio, 15 mM de HEPES y 1,2 g/L de NaHCO₃.
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación reportado para la línea celular P19 es de aproximadamente 2 a 3 días.
- Tipo de crecimiento
- La línea celular de carcinoma embrionario P19 es adherente.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Solicitar P19
- Características generales y origen de las células P19
- Información sobre el cultivo de las células P19
- Línea celular P19: ventajas y desventajas
- Aplicaciones de investigación de las células P19
- Compre hoy mismo su línea celular P19
- Células P19: publicaciones de investigación
- Recursos para la línea celular P19: protocolos, videos y más
- Explorando la línea celular P19: preguntas frecuentes
- Referencias
- Preguntas frecuentes
Características generales y origen de las células P19
Es fundamental conocer las características generales y el origen de una línea celular antes de comenzar a trabajar con ella. En esta sección se abordarán los siguientes temas: ¿Qué es la línea celular P19? ¿Cuál es el tamaño de la célula P19? ¿Cuál es el origen de las células P19?
- P19 es un tipo de células de carcinoma embrionario pluripotentes obtenidas originalmente de un teratocarcinoma desarrollado en un ratón C3H/He. La línea celular fue establecida por primera vez en 1982 por McBurney y Rogers.
- Las células P19 pueden crecer de manera continua en un medio de cultivo suplementado con suero. Pueden diferenciarse en otros tipos celulares cuando se exponen a fármacos no tóxicos, como el ácido retinoico y el dimetilsulfóxido (DMSO) [1].
- Estas células de carcinoma de ratón presentan una morfología de tipo epitelial.
- La línea celular P19 tiene un cariotipo masculino euploide (n = 40; XY).
Información sobre el cultivo de células P19
La línea celular P19 se cultiva ampliamente en laboratorios de investigación debido a sus características únicas. Su cultivo es sencillo y manejable. En esta sección se ha mencionado toda la información clave que necesitas para mantener y hacer crecer un cultivo de células P19. Aprenderemos: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células P19? ¿Cómo se cultiva la línea celular P19? ¿Es la P19 una línea celular adherente?
Puntos clave para el cultivo de células P19
Tiempo de duplicación:
El tiempo de duplicación reportado para la línea celular P19 es de aproximadamente 2 a 3 días.
Adherente o en suspensión:
La línea celular de carcinoma embrionario P19 es adherente.
Relación de subcultivo:
Las células P19 deben subcultivarse cada 48 horas, y debe mantenerse una proporción de división de 1:10 para estas células. Las células adherentes se lavan con solución salina tamponada con fosfato 1X y se incuban con Accutase hasta que las células se disocien. Se agregan las células al medio de cultivo y se recogen mediante centrifugación. Las células recolectadas se resuspenden cuidadosamente y se distribuyen en nuevos frascos.
Medio de crecimiento:
Medio DMEM/Ham’s F12 que contenga 5 % de suero fetal bovino, 3,1 g/L de glucosa, 1,6 mM de L-glutamina, 1,0 mM de piruvato de sodio, 15 mM de HEPES y 1,2 g/L de NaHCO₃ para cultivar las células P19.
Condiciones de crecimiento:
Para el crecimiento y cultivo de la línea celular de carcinoma embrionario P19 es esencial una incubadora humidificada ajustada a 37 °C con un suministro de 5 % de CO₂.
Almacenamiento:
Los viales de células P19 congeladas deben almacenarse a una temperatura inferior a -150 °C en un congelador o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para mantener la viabilidad de las células a largo plazo.
Proceso de congelación y medio:
Se pueden utilizar los medios CM-1 o CM-ACF para congelar las células P19 mediante un método de congelación lenta que proteja a las células de cualquier impacto y preserve su viabilidad.
Proceso de descongelación:
Las células P19 congeladas pueden descongelarse en un baño de agua a 37 °C agitando rápidamente el frasco durante 40 a 60 segundos. Se agregan medios frescos a las células y se centrifugan para eliminar los elementos del medio de congelación. El sedimento celular se resuspende nuevamente y las células se vierten en un nuevo frasco para su crecimiento.
Nivel de bioseguridad:
Para la línea celular P19 se requieren instalaciones de laboratorio con nivel de bioseguridad 1.
Línea celular P19: ventajas y desventajas
En esta sección se analizarán las ventajas y desventajas de la línea celular P19.
Ventajas
- Potencial de diferenciación: Las células P19 pueden diferenciarse en diversos tipos celulares, incluyendo cardiomiocitos, neuronas y células microgliales. Para su diferenciación requieren fármacos no tóxicos, como el ácido retinoico y el dimetilsulfóxido (DMSO). El ácido retinoico induce el desarrollo de neuronas, microglía y astroglía, mientras que el DMSO inicia el desarrollo de cardiomiocitos que laten y células del músculo liso. Por lo tanto, las células P19 son útiles para estudiar la diferenciación celular y los procesos de desarrollo.
- Sistema modelo: La línea celular pluripotente de carcinoma embrionario P19 es un modelo valioso para estudiar el desarrollo embrionario temprano. Los investigadores utilizan las células P19 para dilucidar las vías de señalización celular y los mecanismos celulares y moleculares involucrados en estos procesos.
Desventajas
- Origen murino: P19 es una línea celular de carcinoma embrionario murino. En consecuencia, es posible que los hallazgos de los estudios que utilizan estas células no se puedan extrapolar por completo a la biología y los procesos humanos.
Aplicaciones de investigación de las células P19
Las células P19 tienen diversas aplicaciones de investigación debido a su capacidad de diferenciación y a su relevancia para la biología del desarrollo y la investigación con células madre. Algunas de las aplicaciones de investigación más importantes de las células de carcinoma embrionario P19 incluyen:
- Estudios de diferenciación celular: Como sabemos, las células P19 pueden diferenciarse en neuronas, microglías, células de músculo liso y cardiomiocitos; por lo tanto, se utilizan ampliamente para estudiar los procesos de diferenciación celular. Además, ayudan a investigar el desarrollo neural y cardíaco, así como los mecanismos subyacentes. Un estudio realizado en 2018 descubrió que las especies reactivas de oxígeno (ROS) dirigen la diferenciación de las células P19 hacia tipos celulares específicos e impiden la inducción de otros [3]. Otro estudio exploró el proceso de diferenciación neural mediado por el ácido retinoico y descubrió la participación de la vía de señalización PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Biología del desarrollo: Las células P19 constituyen un modelo invaluable para estudiar el desarrollo embrionario temprano. Ayudan a los investigadores a comprender procesos biológicos complejos, como la formación de tejidos durante el desarrollo embrionario. La investigación utilizó células P19 y estudió los factores moleculares que contribuyen a la formación de la comunicación interventricular (CIV). Los hallazgos revelaron que un ARN no codificante largo, el SNHG6, contribuye a la VSD al regular negativamente el miARN-101 y activar la vía Wnt/β-catenina [5].
- Pruebas de fármacos: La línea celular de carcinoma embrionario de ratón P19 también se utiliza para evaluar posibles candidatos a fármacos. En un estudio se utilizaron neuronas diferenciadas a partir de células P19 y se investigaron los efectos neuroprotectores inhibidores de la acetilcolinesterasa de la L-Dopa sintética y del extracto acuoso de semillas de Mucuna pruriens. Los resultados mostraron que el extracto vegetal presentó resultados prometedores en comparación con la L-Dopa [6].
Compra hoy mismo tu línea celular P19
Células P19: Publicaciones de investigación
En esta sección del artículo se presentarán algunas publicaciones de investigación interesantes sobre las células P19.
Este artículo se publicó en Oncology Reports en 2017. El estudio propuso que las hormonas sexuales hipofisarias impulsan la adhesión, la proliferación y la migración de las líneas celulares de teratocarcinoma, incluidas las células P19.
Esta publicación en la revista Experimental & Molecular Medicine (2018) utilizó células P19 y estudió la función del ARN no codificante largo uc.4. Los hallazgos revelaron que el uc.4 afecta la diferenciación celular mediante la modulación de la vía de señalización del TGF-beta.
Este artículo de investigación se publicó en 2018 en la revista *Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine*. El estudio descubrió que el extracto de tejido cerebral natural y el cultivo celular tridimensional pueden acelerar la diferenciación de las células de carcinoma embrionario P19 en células neuronales.
Este estudio se publicó en la revista Journal of Ethnopharmacology en 2020. El estudio propuso que el extracto de hoja de Cichorium intybus L. puede inducir la diferenciación de las células de carcinoma embrionario P19 en células β pancreáticas productoras de insulina.
Esta investigación se publicó en la revista *Molecules* (2022). Este estudio exploró los efectos neuroprotectores e inhibidores de la acetilcolinesterasa del extracto de semillas de *Mucuna pruriens* en las neuronas de la línea celular P19.
Recursos sobre la línea celular P19: protocolos, videos y más
A continuación se presentan algunos recursos sobre las células P19.
- Protocolo de diferenciación neuronal de las células P19: Este artículo contiene el protocolo de diferenciación neuronal de las células P19 y otra información útil sobre la diferenciación de estas células.
- Transfección de células P19: Este enlace te ayudará a conocer el protocolo de transfección de las células P19.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo de las células P19.
- Células P19: Este sitio web contiene toda la información útil sobre la línea celular P19, incluyendo sus condiciones de cultivo, los medios de cultivo para las células P19, la división celular y mucho más.
La diferenciación cardíaca en las células P19 se refiere a su capacidad para convertirse en células similares a los cardiomiocitos bajo condiciones específicas, como la presencia de dimetilsulfóxido (DMSO). Esta propiedad las hace útiles para estudiar la diferenciación de los cardiomiocitos y el desarrollo de las células del músculo cardíaco.
Las células P19 indiferenciadas pueden inducirse a diferenciarse en diversos tipos celulares, entre ellos las células neuronales y las células cardíacas. Esta transición depende de las condiciones de cultivo y de la aplicación de agentes diferenciantes, como el ácido retinoico para las neuronas y el DMSO para las células del músculo cardíaco.
Los marcadores de diferenciación neuronal en las células P19 incluyen genes asociados con la neurogénesis, como los que codifican neurotransmisores y los genes marcadores neuronales específicos. Estos marcadores ayudan a identificar y caracterizar el fenotipo neuronal.
La expresión de los canales iónicos en las células P19 puede estudiarse analizando la expresión del ARNm de los genes de los canales iónicos y mediante ensayos funcionales para evaluar la actividad de dichos canales. Esto es fundamental para comprender cómo contribuyen los canales iónicos a las funciones celulares y a la neurogénesis.
Las células P19 expresan genes del reloj biológico, los cuales regulan los ritmos circadianos que influyen en diversas funciones celulares. La investigación de estos genes ayuda a comprender la interacción entre el reloj circadiano y los procesos celulares, como la regulación del ciclo celular y el metabolismo.
Sí, bajo ciertas condiciones, las células P19 pueden diferenciarse en células gliales, lo que amplía su uso en estudios sobre la neurogénesis y el papel de las células gliales en el sistema nervioso central.
La caracterización del fenotipo neurotransmisor en las células P19 implica identificar los neurotransmisores específicos que producen, lo cual es esencial para los estudios sobre la neurotransmisión y la función neural.
Los agregados de células P19 se utilizan para modelar estructuras tridimensionales más complejas que imitan con mayor precisión a los tejidos, lo que mejora los estudios sobre las interacciones celulares y el desarrollo tisular.
Las células multipotentes P19cl6 son un subclon de las células P19 capaces de diferenciarse en múltiples tipos celulares, entre ellos, células neuronales y cardíacas. Su multipotencia las convierte en un recurso valioso para diversas aplicaciones de investigación.
El efecto de los factores externos sobre las células P19 puede estudiarse mediante diversos ensayos, entre ellos los ensayos de colonias para caracterizar el crecimiento y la diferenciación, así como evaluaciones electrofisiológicas para comprender los cambios en la función celular.
Referencias
- McBurney, M.W., Células de carcinoma embrionario P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): p. 135-40.
- Bressler, J., et al., Línea celular de carcinoma embrionario P19: un modelo para estudiar las interacciones gen-ambiente. Cell Culture Techniques, 2011: p. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey y G. Rödel, «Las especies reactivas de oxígeno (ROS) mitocondriales dirigen la diferenciación de las células P19 pluripotentes murinas». Stem Cell Research, 2018. 30: p. 180-191.
- Fu, F., et al., El ácido retinoico todo-trans induce la diferenciación de las células P19 en neuronas a través de la vía de señalización PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): p. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al., El ARN no codificante largo SNHG6 contribuye a la formación de la comunicación interventricular mediante la regulación negativa de miR-101 y la activación de la vía Wnt/β-catenina. Die Pharmazie: Revista Internacional de Ciencias Farmacéuticas, 2019. 74(1): p. 23-28.
- Kamkaen, N., et al., El extracto acuoso de semillas de Mucuna pruriens mejoró los efectos neuroprotectores e inhibidores de la acetilcolinesterasa en comparación con la L-dopa sintética. Molecules, 2022. 27(10): p. 3131.