Las células Hep2 y su papel en la investigación del cáncer de laringe

Las células Hep 2 constituyen un modelo in vitro fundamental que se utiliza ampliamente en diversos campos de la investigación biomédica, como la reumatología, la investigación del cáncer y la inmunología. Estas células humanas, que provienen de un carcinoma de laringe, han sido fundamentales para dilucidar el tejido de origen y las características específicas de las neoplasias laríngeas. Su importancia es ampliamente reconocida en la investigación traslacional del cáncer, donde han contribuido enormemente a nuestra comprensión de la naturaleza y el origen de los cánceres de laringe, lo que les ha otorgado una presencia significativa en las publicaciones sobre la investigación del cáncer de laringe [1].

📋 Línea celular Hep2 — Datos clave

Medio de cultivo: Para cultivar las células Hep 2 se utiliza EMEM o medio esencial mínimo de Eagle. Este medio se complementa con un 10 % de suero fetal bovino (FBS), 1,0 g/L de glucosa, 2,2 g/L de NaHCO₃, 2,0 mM de L-glutamina, un 1 % de aminoácidos no esenciales (NEAA) y 1 mM de piruvato de sodio para un crecimiento celular óptimo. El medio debe renovarse de 2 a 3 veces por semana.
Tiempo de duplicación: El tiempo de duplicación reportado para las células Hep 2 es de aproximadamente 40 horas.
Tipo de crecimiento: Las células Hep 2 son adherentes y crecen formando monocapas.
Nivel de bioseguridad: BSL-1
Disponible en: Cytion — Pedir Hep2

Origen y características generales de las células Hep 2

El origen y las características generales de una línea celular definen su aplicabilidad en la investigación. Esta sección te ayudará a conocer el origen y algunas características destacadas de las células Hep 2. Por ejemplo, descubrirás: ¿Qué es la línea celular HEp-2? ¿Cuál es el origen de las células Hep 2? ¿Y cuál es la morfología de las Hep 2?

Hep 2, una línea celular epitelial humana inmortal, fue descrita por primera vez por H.W. Toolan como células de carcinoma laríngeo en 1954. Sin embargo, recientemente se ha informado que la línea celular Hep 2 está compuesta por células de adenocarcinoma cervical y que se originó a partir de una contaminación de la línea celular HeLa [2].
Las células Hep 2 contienen cromosomas marcadores de Hela y dan positivo para queratina y secuencias de ADN del virus del papiloma humano, tal como se ha confirmado mediante tinción de inmunoperoxidasa y PCR, respectivamente.
La línea celular Hep 2, derivada de la línea celular HeLa, posee una morfología de tipo epitelial.
La línea celular Hep 2 presenta alteraciones cromosómicas tanto estructurales como numéricas, con un cariotipo casi triploide [3].

División de células HeLa de cáncer de cuello uterino bajo el microscopio.

Línea celular HEp-2: Información sobre el cultivo

Antes de trabajar con una línea celular, debemos conocer los siguientes puntos clave para su cultivo. Esta información puede ser útil para cultivar y mantener la línea celular de manera eficaz. Debes saber: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células HEp-2? ¿Las células Hep 2 son adherentes? ¿Cuál es la densidad de siembra de las células Hep 2?

Tiempo de duplicación de la población:: El tiempo de duplicación reportado para las células Hep 2 es de aproximadamente 40 horas.
Adherentes o en suspensión:: Las células Hep 2 son adherentes y crecen formando monocapas.
Densidad de siembra:: Una densidad de siembra de 1 x 10^⁴ células/cm² es ideal para el cultivo de células Hep 2. Para la siembra, las células Hep 2 adherentes se enjuagan con una solución de PBS 1x, seguida de una incubación con la solución de disociación Accutase. Tras una incubación de 8 a 10 minutos a temperatura ambiente, las células se resuspenden en medio y se centrifugan. A continuación, las células recolectadas se dispensan en medio fresco y se vierten en nuevos frascos para su cultivo.
Medio de crecimiento:: Para el cultivo de células Hep 2 se utiliza EMEM o el medio esencial mínimo de Eagle. Este medio se complementa con un 10 % de suero fetal bovino (FBS), 1,0 g/L de glucosa, 2,2 g/L de NaHCO₃, 2,0 mM de L-glutamina, un 1 % de aminoácidos no esenciales (NEAA) y 1 mM de piruvato de sodio para un crecimiento celular óptimo. El medio debe renovarse de 2 a 3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:: Al igual que otras líneas celulares de mamíferos, las Hep 2 también se cultivan en una incubadora humidificada a una temperatura de 37 °C y con un suministro continuo de 5 % de CO₂.
Almacenamiento:: Las células Hep 2 pueden almacenarse en congeladores eléctricos de temperatura ultrabaja (por debajo de -150 °C) o en fase de vapor de nitrógeno líquido para su almacenamiento a largo plazo.
Proceso de congelación y medio:: Los medios de congelación recomendados para las células Hep 2 son CM-1 o CM-ACF. Las células deben congelarse mediante un proceso de congelación lenta que permita un descenso gradual de la temperatura de 1 °C y proteja la viabilidad celular.
Proceso de descongelación:: El vial de células congeladas se descongela rápidamente mediante agitación en un baño de agua a 37 °C hasta que quede un pequeño trozo de hielo. A continuación, las células se agregan a un medio fresco y se centrifugan para eliminar los componentes del medio de congelación. Posteriormente, el sedimento celular se resuspende en medio y las células se dispensan en frascos de cultivo. Las células deben reposar durante casi 24 horas para adherirse.
Nivel de bioseguridad: Se recomienda un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para la manipulación y el mantenimiento de los cultivos de células Hep 2.

Hep2 cells

Células Hep 2 antes y después de alcanzar la confluencia.

Ventajas y limitaciones de las células Hep 2

Casi todas las líneas celulares presentan una combinación única de ventajas y limitaciones que influyen en su uso en el ámbito de la investigación. En esta sección se describirán algunas de las principales ventajas y desventajas asociadas a la línea celular Hep 2.

Ventajas

Las principales ventajas de la línea celular Hep 2 son:

Origen humano: La línea Hep 2 se deriva de células epiteliales humanas, lo que la convierte en un valioso modelo in vitro para el estudio de enfermedades humanas e infecciones virales.
Detección de ANA: La línea celular Hep 2 posee un conjunto de proteínas nativas que presentan numerosos antígenos, lo que la convierte en un excelente sustrato para la detección de anticuerpos antinucleares (ANA). Esta característica permite un cribado específico y altamente sensible de los ANA en el suero, lo que la convierte en una herramienta de diagnóstico crucial para identificar enfermedades del tejido conectivo.

Limitaciones

Anomalías cromosómicas: Las células Hep 2 presentan múltiples anomalías cromosómicas numéricas y estructurales. Estas anomalías pueden afectar el comportamiento celular y podrían limitar su aplicabilidad en ciertos experimentos de laboratorio.
Tumorigenicidad: La línea celular Hep 2, una línea celular epitelial humana derivada de un tumor, puede presentar anomalías genéticas que normalmente no se observan en las células epiteliales. En consecuencia, el uso de las células Hep 2 podría verse limitado en estudios específicos centrados en la fisiología celular normal.

Ampliación de las aplicaciones de la línea celular Hep 2 en la investigación biomédica

La línea celular Hep 2 se destaca como un modelo ejemplar para una gran variedad de aplicaciones dentro de la investigación biomédica. Reconocidas por su versatilidad, estas células desempeñan roles fundamentales en experimentos in vitro, que van desde el análisis de receptores hasta el estudio de enfermedades complejas.

Exploración de los mecanismos tumorigénicos y las dianas terapéuticas con las células Hep 2

Las células Hep 2, al ser tumorigénicas, son fundamentales para profundizar en las complejidades de la biología del cáncer. Proporcionan información sobre las vías de señalización del cáncer y los estudios de mecanismos, y son un pilar en la selección y evaluación de fármacos contra el cáncer. Por ejemplo, un estudio revelador utilizó las células Hep 2 para delinear la influencia del miARN-33a en la proliferación de las células cancerosas. Los hallazgos pusieron de manifiesto los efectos antiproliferativos del miARN-33a a través de su interacción con PIM1, un oncogén conocido, lo que sugiere una nueva diana terapéutica [4]. En otro caso, se empleó la línea Hep 2 para evaluar el potencial terapéutico de las nanopartículas de óxido de zinc de Marsdenia tenacissima, lo que puso de relieve su eficacia antiproliferativa y apoptótica [5].

Avanzando en la investigación virológica con los conocimientos sobre las células Hep 2

La susceptibilidad de las células Hep 2 a diversos virus humanos las convierte en un recurso invaluable para la investigación virológica. Se han utilizado de manera eficaz en la expresión de genes virales del SARS-CoV-2 para desentrañar la compleja interacción entre el virus y los mecanismos celulares del huésped [6]. Esta aplicación es particularmente crucial en la era actual, en la que comprender y combatir infecciones virales como la COVID-19 es una prioridad global.

Descifrando las funciones celulares: manipulación genética en las células Hep 2

La adaptabilidad de la línea celular Hep 2 a la manipulación genética resalta su utilidad en estudios de mecanismos. Los investigadores aprovechan esta característica para modular la expresión génica y dilucidar las funciones de genes específicos en los procesos celulares. Un estudio destacado consistió en la sobreexpresión de la proteína de unión al ARN RBM6 en células Hep 2, lo que facilitó la investigación de su potencial como supresor tumoral, proporcionando información valiosa sobre los fundamentos moleculares del cáncer [7].

Mejora del diagnóstico de enfermedades mediante aplicaciones de la línea celular Hep 2

Más allá de estos ámbitos de investigación, las células Hep 2 son reconocidas por sus capacidades diagnósticas, especialmente en la detección de anticuerpos antinucleares (ANA), que son fundamentales para el diagnóstico de enfermedades autoinmunes como el lupus eritematoso sistémico. La precisión con la que las células Hep 2 pueden detectar los ANA respalda el diagnóstico y el desarrollo de tratamientos dirigidos, lo que mejora nuestra comprensión de las patologías autoinmunes y la atención a los pacientes.

A través de estas diversas aplicaciones, las células Hep 2 han contribuido significativamente a los avances en la investigación traslacional del cáncer, el estudio de las infecciones virales y la exploración de los mecanismos celulares. Su contribución a la generación de datos clínicamente relevantes es inestimable, lo que confirma su papel indispensable tanto en el laboratorio como en la clínica. A medida que la investigación sigue evolucionando, la línea celular Hep 2 seguramente se mantendrá a la vanguardia, contribuyendo al descubrimiento de nuevos tratamientos y ampliando nuestro conocimiento sobre la salud y las enfermedades humanas.

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Células Hep 2: Publicaciones de investigación

A continuación se presentan algunas publicaciones de investigación interesantes y más citadas sobre las células Hep 2.

La síntesis de nanopartículas de óxido de zinc a partir de Marsdenia tenacissima inhibe la proliferación celular e induce la apoptosis en células de cáncer de laringe (Hep-2)
Este artículo, publicado en la revista *Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology* (2019), exploró el potencial anticancerígeno de las nanopartículas de óxido de zinc biosintetizadas a partir de *Marsdenia tenacissima* en la línea celular Hep-2.
Las nanopartículas de PLGA cargadas con hesperidina y bioformuladas contrarrestan la vía apoptótica intrínseca mediada por las mitocondrias en las células
cancerosas Este artículo se publicó en la revista Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials en 2021. Este estudio examinó las propiedades anticancerígenas de nanopartículas de ácido poliláctico-co-glicólico (PLGA) bioformuladas y cargadas con hesperidina en células Hep 2.
Actividad antiviral del extracto etanólico de Lophatherum gracile contra la infección
por el virus respiratorio sincitial. Esta publicación en la revista *Journal of Ethnopharmacology* en 2019 utilizó células Hep 2 para estudiar la infección por el virus respiratorio sincitial y evaluar fármacos antivirales contra este. El estudio informó sobre el prometedor potencial antiviral del extracto etanólico de una planta medicinal, Lophatherum gracile, contra la infección por el virus respiratorio sincitial.
Evaluación de extractos acuosos de cuatro plantas aromáticas para determinar su actividad contra la adhesión de Candida albicans a las células
epiteliales HEp-2 humanas. Esta investigación se publicó en la revista *Gene Reports* (2020). Este estudio exploró el potencial inhibidor de los extractos acuosos de cuatro plantas aromáticas contra la adhesión de Candida albicans a las células epiteliales Hep-2 humanas.
La proteína de señalización 1 inducible por Wnt1 regula la glucólisis y la quimiorresistencia del carcinoma de células escamosas de laringe a través de la vía
YAP1/TEAD1/GLUT1 Este estudio se publicó en la revista Journal of Cellular Physiology en 2019. El estudio informa que la proteína de señalización 1 inducible por Wnt1 (WISP1) interactúa con la vía YAP1/TEAD1/GLUT1 y regula el metabolismo de la glucosa y la quimiorresistencia en la línea celular Hep 2.

Recursos para la línea celular Hep 2: protocolos, videos y más

Hep 2 es una línea celular muy conocida. Existen varios recursos disponibles sobre la línea celular Hep 2.

Subcultivo de la línea celular Hep 2: Este video es una guía paso a paso para realizar el subcultivo de las células Hep 2.
Cribado de anticuerpos antinucleares (ANA) en células Hep 2: Este video explica el cribado de anticuerpos antinucleares (ANA) utilizando la línea celular Hep 2.
Cultivo de Hep 2: Este enlace contiene información básica sobre el cultivo de células Hep 2. Incluye la división celular, la congelación y la descongelación de las células.

Referencias

Fusi, M. y S. Dotti, «Adaptación de la línea celular HEp-2 a sistemas de cultivo totalmente libres de componentes de origen animal y análisis en tiempo real del crecimiento celular». Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
Gorphe, P., Una revisión exhaustiva de la línea celular Hep-2 en la investigación traslacional del cáncer de laringe. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
Wang, M., et al., Los fibroblastos asociados al cáncer en un tumor laríngeo xenoinjertado establecido a partir de la línea celular humana HEp-2 no se derivan de células cancerosas a través de la transición epitelial-mesenquimal; están activados fenotípicamente, pero son cariotípicamente normales. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
Karatas, O.F., Potencial antiproliferativo del miR-33a en células Hep-2 de cáncer de laringe al actuar sobre PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
Wang, Y., et al., La síntesis de nanopartículas de óxido de zinc a partir de Marsdenia tenacissima inhibe la proliferación celular e induce la apoptosis en células de cáncer de laringe (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
Zhang, J., et al., Un estudio sistémico y molecular de la localización subcelular de las proteínas del SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
Wang, Q., et al., La proteína de unión al ARN RBM6, como gen supresor de tumores, reprime el crecimiento y la progresión del carcinoma de laringe. Gene, 2019. 697: p. 26-34.