Wilms8 Hücreleri

€800,00*

Ürünler, kuru buzla donmuş halde kriyotüplerde gönderilir. Her kriyotüp, tipik olarak yapışkan hatlar için 3 × 10 ⁶ hücre veya süspansiyon hatları için 5 × 10⁶ hücre içerir (ayrıntılar için parti CoA'sına bakın).

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 300416

Güvenlik bilgi formu

Ürün sayfası

Malzeme Transfer Sözleşmesi

Açıklama	Wilms8 hücre hattı, germline WT1 mutasyonu olan bir pediatrik hastadaki primer Wilms tümöründen türetilmiştir. Bu hücre hattı, WT1 geninde homozigot saçma mutasyon (c.1168 C>T, p.R390X) ile karakterize edilir ve WT1 fonksiyonunun tamamen kaybına yol açar. WT1 normal böbrek gelişimi için çok önemlidir ve inaktivasyonu Wilms tümörünün bazı agresif alt tiplerinde, özellikle de mezenkimal farklılaşma gösterenlerde ortak bir özelliktir. Bu nedenle Wilms8, özellikle belirgin bir stromal bileşenle ortaya çıkan Wilms tümörleri bağlamında, WT1 kaybının tümörigenez üzerindeki etkilerini incelemek için değerli bir model sağlar. WT1 mutasyonuna ek olarak, Wilms8 hücreleri, Wnt sinyal yolunun önemli bir düzenleyicisi olan β-Katenin'i kodlayan CTNNB1 geninde (p.S45A) bir mutasyon barındırır. Serin 45'teki mutasyon, β-Catenin degradasyonuna yol açan normal fosforilasyon sürecini bozarak stabilizasyonuna ve çekirdekte birikmesine neden olur. Bu, hücre çoğalmasını sağlayan ve Wilms8 hücre hattının onkojenik özelliklerine katkıda bulunan Wnt sinyalinin yapısal aktivasyonu ile sonuçlanır. Wilms8'de WT1 kaybı ve anormal Wnt sinyali arasındaki etkileşim, Wilms tümör biyolojisinde bu yolakların altında yatan moleküler mekanizmaları anlamak için çok önemli bir model haline getirmektedir. Wilms8 hücreleri, vimentin ekspresyonu ve sitokeratin gibi epitelyal belirteçlerin yokluğu ile karakterize mezenkimal bir fenotip sergilemektedir. Bu, orijinal tümörde gözlenen stromal farklılaşma ile uyumludur. Hücreler, belirli koşullar altında kas benzeri hücreler oluşturmak gibi daha fazla mezenkimal farklılaşma geçirme konusunda sınırlı bir yetenek gösterir. Wilms8'in proteomik analizleri, PDGFRβ ve AXL dahil olmak üzere, hücre sağkalımı, göçü ve çoğalması gibi kilit süreçlerde rol oynayan çoklu reseptör tirozin kinazların (RTK'lar) aktivasyonunu ortaya çıkarmıştır. Özellikle MAPK ve PI3K/AKT yolakları olmak üzere aşağı akış sinyal yolaklarının aktivasyonu, Wilms8 hücrelerinin agresif özelliklerine daha fazla katkıda bulunur. Genel olarak, Wilms8 hücre hattı, WT1 kaybı ve anormal Wnt sinyali tarafından yönlendirilen Wilms tümörünün moleküler temelini araştırmak için önemli bir araç görevi görmektedir. Genetik ve fenotipik özellikleri onu, bu kritik yolaklar arasındaki etkileşimi incelemek ve stromal bileşenli Wilms tümörlerinde potansiyel terapötik hedefleri belirlemek için sağlam bir platform haline getirmektedir.
Organizma	İnsan
Doku	Böbrek
Hastalık	Wilms tümörü
Uygulamalar	In vitro hücre kültürü modeli. Biyokimyasal çalışmalar

Yaş	8 ay
Cinsiyet	Erkek
Etnik köken	Kafkas
Morfoloji	İğ şeklinde
Hücre tipi	Wilms hücreleri
Büyüme özellikleri	Yapışık

Atıf	Wilms8 (Cytion katalog numarası 300416)
Biyogüvenlik seviyesi	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SJ

Mutasyonel profil	WT1 mutasyon durumu: homozigot c.1168C>T, p.390x, LOH: , CTNNB1 mutasyon durumu: heterozigot TCT>GCT, p.S45A

Kültür Ortamı	MSCGM kiti (Lonza'dan)
Ayrıştırma Reaktifi	Accutase
Alt kültürleme	Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ortamı dondurun	Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Hücrelerin Çözdürülmesi ve Kültürlenmesi	Hücreler taşıma sırasında optimum sıcaklıkları korumak için kuru buz üzerinde gönderildiğinden, flakonun teslimat sırasında derin dondurulmuş halde kaldığını teyit edin. Teslim aldıktan sonra, hücresel bütünlüğün korunmasını sağlamak için kriyoviali hemen -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda saklayın veya hemen kültürleme gerekiyorsa 3. adıma geçin. Derhal kültürleme için flakonu temiz su ve antimikrobiyal bir madde içeren 37°C'lik bir su banyosuna daldırıp küçük bir buz kümesi kalana kadar 40-60 saniye boyunca hafifçe çalkalayarak hızlıca çözün. Sonraki tüm adımları steril koşullar altında bir akış başlığı içinde gerçekleştirin ve açmadan önce kriyoviyalleri %70 etanol ile dezenfekte edin. Dezenfekte edilmiş flakonu dikkatlice açın ve hücre süspansiyonunu 8 ml oda sıcaklığında kültür ortamı içeren 15 ml'lik bir santrifüj tüpüne aktarın ve hafifçe karıştırın. Hücreleri ayırmak için karışımı 300 x g'de 3 dakika santrifüjleyin ve artık dondurma ortamı içeren süpernatantı dikkatlice atın. Hücre peletini 10 ml taze kültür ortamında yavaşça yeniden süspanse edin. Yapışık hücreler için, süspansiyonu iki T25 kültür şişesi arasında bölün; süspansiyon kültürleri için, etkili hücre etkileşimini ve büyümesini teşvik etmek üzere tüm ortamı tek bir T25 şişesine aktarın. Hücre hattının sürekli büyümesi ve bakımı için belirlenmiş alt kültür protokollerine uyun ve güvenilir deneysel sonuçlar elde edin.
Kuluçka Atmosferi	37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
Şişe Kaplaması	Yok
Dondurma Prosedürü	Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
Nakliye Koşulları	Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
Depolama Koşulları	Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Sterilite	Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır. Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
HLA alelleri	A: '02:01:01, '03:01:01 B: '15:01:01, '37:01:01 C: '04:01:01, '06:02:01 DRB1: '08:01:01G, '11:01:01 DQA1: '04:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '04:02:01 DPB1*: '03:01:01, '06:01:01 E: '01:03:02

Cytion hücre hatlarını yalnızca tek bir araştırma merkezinde iç araştırma amaçlı kullanmayı planlıyorsanız, Malzeme Transfer Anlaşması'nı (MTA) doldurup imzaladıktan sonra siparişinizle birlikte gönderin.

Hizmet bedeli, kalite kontrol testleri, ürün piyasaya sürülmesi, teşhis amaçlı kullanım veya düzenleyici çalışmalar dahil ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere tüm ticari uygulamalar için, projenize uygun bir anlaşma hazırlayabilmemiz için Lütfen Kullanım Amacı Formunu doldurun.

Lütfen dikkat: MTA yalnızca belirli hücre hatları için geçerlidir. Bu bildirim ve MTA belgesi bir ürün sayfasında görünüyorsa, sözleşme geçerlidir. MTA kapsamına girmeyen hücre hatları için sözleşmeye atıfta bulunulmayacaktır. MTA, Amerika, Çin veya Tayvan'daki müşteriler için geçerli değildir. Uygun sözleşmeyi almak için lütfen ABD kuruluşumuzla iletişime geçin.

Wilms8 Hücreleri

Genel bilgi

Özellikler

Düzenleyici Veriler

Biyomoleküler Veriler

Elleçleme

Kalite kontrol / Genetik profil / HLA

Malzeme Transfer Sözleşmesi