Accutase Hücre Ayrıştırma Çözeltisi - 100 ml
EDTA ve Fenol Kırmızısı İçeren Accutase Hücre Ayrıştırma Çözeltisi – 100 ml
Accutase, yapışkan memeli hücrelerini standart doku kültürü plastik kaplarından ve yapışma kaplı yüzeylerden ayırmak için tripsin/EDTA'ya nazik bir alternatif olarak tasarlanmış, kullanıma hazır, steril filtrelenmiş bir hücre ayırma çözeltisidir. Dengeli bir tuz çözeltisi içinde proteolitik ve kollajenolitik enzim aktivitesini birleştirerek etkili ancak kontrollü bir ayrışma sağlar, hücre yüzeyi proteinlerini korur ve yüksek pasaj sonrası canlılık ve hızlı yeniden yapışmayı destekler.
Accutase formülasyonu, görsel pH göstergesi olarak EDTA ve fenol kırmızısı içeren Dulbecco fosfat tamponlu salin (DPBS) bazlıdır. Enzimler memeli ve bakteriyel kökenli değildir, bu da Accutase'i kök hücre araştırmaları, aşı iş akışları ve hayvan veya mikrobiyal kaynaklı kontaminantların en aza indirilmesi gereken tüm uygulamalar için özellikle uygun hale getirir. Çözelti 37 °C'de kendiliğinden inhibe olur, bu nedenle ayrılma işleminden sonra nötralize edici reaktif veya serum içeren ortam gerekmez – hücreler doğrudan taze ortama aktarılabilir.
Temel Özellikler
- Kullanıma hazır 1x steril filtrelenmiş sıvı – seyreltme veya sulandırma gerekmez
- Nazik ayrışma için birleşik proteolitik ve kollajenolitik enzim aktivitesi
- Partiler arası tutarlılık için her parti, tanımlanmış bir ayrışma aktivitesine göre standartlaştırılmıştır
- Memeli ve bakteri kaynaklı olmayan enzim
- 37 °C'de kendiliğinden inhibe olur – nötralize edici çözeltiye gerek yoktur
- EDTA içeren Dulbecco’s PBS içinde formüle edilmiştir
- Görsel pH göstergesi olarak fenol kırmızısı içerir
- pH 6,8 – 7,8
Tipik Uygulamalar
Accutase, insan embriyonik kök hücreleri (hESC'ler), insan indüklenmiş pluripotent kök hücreleri (iPSC'ler), nöral kök hücreler, birincil nöronlar ve HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ve A549 gibi rutin olarak kültürlenen yapışkan hücre hatları dahil olmak üzere çok çeşitli yapışkan ve hassas hücre tiplerini nazikçe ayrıştırır. Tipik kullanım örnekleri şunlardır:
- Yapışkan memeli hücrelerinin rutin alt kültürü ve pasajlanması
- hESC'lerin, iPSC'lerin ve diğer hassas hatların nazik tek hücre ayrıştırması
- Akış sitometrisi ve FACS analizi için numune hazırlığı
- Epitop bütünlüğünün önemli olduğu hücre yüzeyi belirteçlerinin analizi
- Hücre göçü, proliferasyon ve apoptoz testleri
- Serum açlığı ve onkogen transfeksiyon çalışmaları ile durgunluk testleri
- Tümör hücresi ve nöral kret hücresi göç testleri
- Biyoreaktör iş akışlarında üretim ölçeğinin büyütülmesi
Rutin çalışmalar için, 75 cm2 kültür yüzeyi başına yaklaşık 10 ml Accutase uygulayın ve oda sıcaklığında 5–10 dakika inkübe edin. Optimum inkübasyon süresi her hücre hattı için ayrı ayrı belirlenmelidir ve bir saati geçmemelidir. İlave etmeden önce, kalıntı serum ve iki değerlikli katyonları gidermek için hücre tabakasını kalsiyum ve magnezyum içermeyen DPBS gibi Ca2+/Mg2+ içermeyen bir tuz çözeltisiyle durulayın.
Kullanım ve Saklama
Açılmamış şişeyi -15 °C veya altında dondurulmuş olarak saklayın. Oda sıcaklığında veya +2 °C ile +8 °C arasında bir gece boyunca çözdürün. Yüksek sıcaklıklar enzim aktivitesini azalttığından, Accutase'i 37 °C'lik su banyosunda çözdürmeyin. Çözdürme işleminden sonra, çözelti +2 °C ile +8 °C arasında 2 aya kadar saklanabilir; oda sıcaklığında saklamayın. Uygulamadan önce reaktifi 37 °C'ye önceden ısıtmayın – oda sıcaklığında yıkanmış hücrelere doğrudan ekleyin. Uzun süreli raf ömrü için, tekrarlanan çözme döngülerinden kaçınmak amacıyla tek kullanımlık alıkoyma önerilir. Her zaman aseptik koşullar altında çalışın.
Kalite
Sıkı kalite standartları altında üretilmiştir. Accutase'in her partisi, partiden partiye tutarlı ve tekrarlanabilir performans sağlamak için steril filtreden geçirilir ve sterilite, pH, görünüm ve ayrışma aktivitesi açısından test edilir.
Ürün Özellikleri
| Özellik | Ayrıntı |
|---|---|
| Ürün türü | Hücre ayrıştırma / disosiyasyon reaktifi |
| Biçim | Steril filtrelenmiş sıvı, kullanıma hazır |
| Hacim | 100 ml |
| Çalışma konsantrasyonu | 1x (kullanıma hazır) |
| Enzim aktivitesi | Kombine proteolitik ve kollajenolitik |
| Enzim kaynağı | Memeli ve bakteri kaynaklı olmayan |
| Tampon sistemi | EDTA içeren Dulbecco’s PBS |
| pH göstergesi | Fenol kırmızısı |
| pH aralığı | 6,8 – 7,8 |
| Görünüm | Berrak, soluk kırmızı ila turuncu renkli çözelti |
| Saklama sıcaklığı | -15 °C veya altında |
| Çözüldükten sonra stabilite | +2 °C ila +8 °C arasında 2 aya kadar |
| Önerilen kullanım hacmi | 75 cm2 kültür yüzeyi başına ~10 ml |
| Tipik inkübasyon süresi | Oda sıcaklığında 5 – 10 dakika |
| Nakliye koşulları | Kuru buzda dondurulmuş |
| Kullanım amacı | Yalnızca araştırma amaçlı ve ileri üretim için |
Formülasyon (Litre Başına Bileşim)
| Bileşen | Konsantrasyon (mg/L) |
|---|---|
| İnorganik Tuzlar | |
| Sodyum klorür (NaCl) | 8000,00 |
| Disodyum hidrojen fosfat (Na2HPO4) | 1150,00 |
| Potasyum klorür (KCl) | 200,00 |
| Potasyum dihidrojen fosfat (KH2PO4) | 200,00 |
| Diğer Bileşenler | |
| EDTA · 4Na (tetrasodyum EDTA) | 220,00 |
| Fenol kırmızısı | 3,00 |
| Özel enzim karışımı (proteolitik ve kollajenolitik aktivite) | 1x |
Accutase, Innovative Cell Technologies, Inc. şirketinin tescilli ticari markasıdır.