HaCaT Hücreleri
Hacat hücreleri hakkında temel bilgiler
| Açıklama | HaCaT hücreleri, cilt biyolojisi ve patolojisinin karmaşık mekanizmalarına dair içgörüler sunan dermatolojik araştırmalarda çok önemli bir modeldir. Kendiliğinden ölümsüzleşen HaCaT hücre hattı, yetişkin insan epidermal hücrelerinden türetilmiştir ve in vivo bazal keratinositlere benzer şekilde çoğalma ve farklılaşma kapasitesini korur. HaCaT hücreleri, epidermal farklılaşma sürecini araştırmak ve cilt bütünlüğünü korumak için gerekli epidermal farklılaşma belirteçlerini incelemek için sağlam bir platform görevi görür. HaCaT hücrelerinin apoptoza yatkınlığı ve apoptoza neden olan ajanlara karşı hassasiyeti, özellikle RIPL gibi sitotoksik ajanlar bağlamında kapsamlı bir şekilde incelenmektedir. Araştırmacılar, HaCaT hücrelerini kullanarak bu ajanların sitotoksisitelerini ve sitotoksisitenin kapsamını değerlendirmekte, hücresel değişiklikleri görselleştirmek için floresan mikroskobu gibi teknikler kullanmaktadır. Araştırmacılar, antimikrobiyal substratlar da dahil olmak üzere çeşitli ajanların etkilerini ve bunların hücre canlılığı üzerindeki etkilerini incelemek için HaCaT hücrelerinden yararlanmıştır. Bu hücreler, cilt onarımı ve tıbbi uygulamalar için çok önemli olan antimikrobiyal biyomalzemeleri ve antimikrobiyal atelokollajen substratları test etmek için mükemmel bir substrattır. HaCaT epidermal hattı ayrıca hücresel yaşlanma, sitokinler ve yaşlanma ve kronik hastalıklarla ilgili gen ekspresyon profillerinin incelenmesinde de önemli bir rol oynamaktadır. κB ve mikroRNA'ların rolü de dahil olmak üzere HaCaT hücrelerinin transkripsiyonel profilleri, moleküler düzeyde düzenleyici mekanizmalar hakkında fikir vermektedir. HaCaT keratinosit hattı, epidermal keratinosit özellikleri ile epidermal hücreler ve bağışıklık sistemi arasındaki karmaşık etkileşimi, özellikle de keratinositlerin hastalık durumlarındaki rolünü incelemek için uygun bir sistem sunmaktadır. Epigenetik modifikasyonların ve bunların cildin bariyer işlevinde önemli bir özellik olan kornifiye zarfın oluşumu da dahil olmak üzere keratinositlerin farklılaşması üzerindeki etkilerinin araştırılmasını sağlarlar. Özetle, HaCaT hücreleri, bazal keratinositlere benzerlikleri ve hücre büyümesi ve farklılaşmasına uğrama yetenekleri sayesinde cilt biyolojisi ve patolojisinin daha derinlemesine anlaşılmasını kolaylaştıran, dermatolojik araştırmalarda vazgeçilmez bir modeldir. Epidermal farklılaşma ve antimikrobiyal etkilerin incelenmesinden apoptoz gibi hücresel tepkilerin araştırılmasına kadar uzanan uygulamaları, onları hücre biyolojisi ve biyomedikal araştırmalarda bir köşe taşı haline getirmektedir. |
|---|---|
| Organizma | İnsan |
| Doku | Cilt |
Detaylar
| Yaş | 62 yıl |
|---|---|
| Cinsiyet | Erkek |
| Etnik köken | Kafkas |
| Hücre tipi | 20-25 mikrometre çapında keratinositler. |
| Büyüme özellikleri | Yapışık |
Dokümantasyon
| Atıf | HaCaT (Cytion katalog numarası 300493) |
|---|---|
| Biyogüvenlik seviyesi | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0038 |
HaCaT keratinosit hücre hattının genetiği
| Tümörijenik | Hayır |
|---|---|
| Karyotip | Anöploid (hipotetraploid) |
Hacat hücre hattının işlenmesi
| Kültür Ortamı | DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a) |
|---|---|
| Takviyeler | Ortamı %10 FBS ile takviye edin |
| Ayrıştırma Reaktifi | 1:1 EDTA (stok. %0,05) ve tripsin (stok: %0,1) karışımı, fizyolojik bir ozmolarite sağlamak için Ca2+ ve Mg2+ içermeyen PBS kullanılarak hücreler ayrılmadan önce her seferinde hazırlanmalıdır. Kullanıma hazır tripsin/EDTA karışımları önerilmez, çünkü bu hücre kümelenmelerine neden olabilir. Alternatif olarak tripsin/EDTA yerine TrypLE Express (Life Technologies) kullanılabilir. Üreticinin protokolü takip edilmelidir. |
| İki katına çıkma süresi | HaCaT hücrelerinin ikiye katlanma süresi 28 saattir. |
| Alt kültürleme |
|
| Bölünmüş oran | A ratio of 1:5 to 1:10 is recommended |
| Tohumlama yoğunluğu | 1 x 104 hücre/cm2 |
| Sıvı yenileme | haftada 2 kez |
| Ortamı dondurun | Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz. |
| Hücrelerin Çözdürülmesi ve Kültürlenmesi |
|
| Kuluçka Atmosferi | 37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer. |
| Şişe Kaplaması | Çözüldükten sonra optimum tutunma ve canlılık için Kolajen kaplı flasklar veya plakalar kullanmanızı öneririz. |
| Dondurma Prosedürü | Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın. |
| Nakliye Koşulları | Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın. |
| Depolama Koşulları | Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir. |
Kalite güvencesi
| Sterilite | Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır. Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur. |
|---|---|
| STR profili |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 09. Mrz
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
Penta E: 7,12
Penta D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| HLA alelleri |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: '03:04:01, '15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: '01:03:01, '01:03:02
|
Analiz Sertifikası (CoA)
| Lot Numarası | Sertifika Türü | Tarih | Katalog Numarası |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | Analiz Sertifikası | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | Analiz Sertifikası | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | Analiz Sertifikası | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | Analiz Sertifikası | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | Analiz Sertifikası | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | Analiz Sertifikası | 23. May. 2025 | 300493 |