BC-3C Cells

McCoy's 5A Medium, birincil hücre kültürlerinde virüslerin büyümesini ve çoğalmasını kolaylaştırmak için tasarlanmış, şiddetle tavsiye edilen ve özel bir besiyeridir. Çeşitli biyolojik araştırma uygulamalarında olağanüstü performansı ile önemli bir tanınırlık kazanmıştır. McCoy's 5A Medium'un öne çıkan uygulamalarından biri, insan kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde kullanılmasıdır. Özellikle, lösin bakımından zengin tekrar içeren G-protein-bağlı reseptör (LGR5) ve kolon kanserinin metastazındaki rolü üzerine yapılan çalışmalarda kullanılmıştır. Bu besiyeri, HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ve TENN dahil olmak üzere çeşitli kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde etkili bir şekilde kullanılmıştır ve araştırmacıların kolon kanseri metastazının altında yatan mekanizmaları daha derinlemesine incelemelerini sağlamıştır. Kanser araştırmalarındaki uygulamasına ek olarak, McCoy's 5A Ortamı osteoblastların incelenmesinde de vazgeçilmez olduğu kanıtlanmıştır. Standart hücre kültürü ortamlarında kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatitin iyon reaktivitesini araştıran araştırmacılar, osteoblastları kültürlemek için bu ortamı kullanmıştır. Bu uygulama, osteoblastlar ve kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatit arasındaki etkileşimlerin daha iyi anlaşılmasını kolaylaştırarak kemik araştırmaları alanındaki ilerlemelere katkıda bulunmuştur. McCoy's 5A Ortamı, karaciğer tümör hücrelerine optimal destek sağlamak için Basal Medium Eagle'da bulunan amino asitleri modifiye ederek titizlikle formüle edilmiştir. Bu zenginleştirilmiş formülasyon, çeşitli yerleşik hücre hatlarının yanı sıra birincil hücreler için de uygun olmasını sağlayarak, çeşitli araştırma ortamlarında çok yönlülüğünü ve uygulanabilirliğini daha da artırmaktadır. McCoy's 5A Medium, biyokimyasal ve fizyolojik etkilerini karaciğer tümör hücrelerinin ötesine genişletir. Kemik iliği, deri, diş eti, böbrek, omentum, adrenal, akciğer, dalak, sıçan embriyosu ve diğer hücre tiplerinin birincil kültürlerinde büyümeyi desteklemek için başarıyla kullanılmıştır. Bu geniş uygulama yelpazesi, kapsamlı biyolojik araştırmalar için çeşitli hücre tiplerinin büyümesini ve bakımını desteklemede McCoy's 5A Medium'un geniş kullanım alanını kanıtlamaktadır. Formülasyon Bu McCoy's 5A ortamı (modifiye), 3,0 g/L glikoz, stabil glutamin, 2,0 mM sodyum piruvat ve 2,2 g/L NaHCO3 içerir. Kalite kontrol pH = 7,2 +/
- 0,02, 20-25 °C'de.  Her parti sterillik ve mikoplazma ve bakteri bulunmadığı konusunda test edilmiştir. Saklama Karanlıkta +2°C ila +8°C arasında buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma, ürünün kalitesini en aza indirir.  Ortamı 37°C'nin üzerine ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga fırınlar) kullanmayın.  Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın. Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü, açılma tarihinden itibaren 6 ila 8 haftadır. Bileşim Bileşenler mg/L İnorganik TuzlarKalsiyum klorür x 2H2O132,00 Magnezyum sülfat97,67 Potasyum klorür400 Sodyum klorür6.460 Disodyum hidrojen fosfat (susuz)504,00 Diğer BileşenlerD(+)-Glikoz (susuz)3.000 Glutatyon (indirgenmiş)0 Et Peptonu600 Fenol kırmızısı sodyum tuzu11 Amino AsitlerL-Alanin13 L-Arginin x HCl42,1 L-Asparagin x H2O45,03 L-Aspartik asit19,97 L-Sistein x HCl x H2O31,75 L-Glutamin (kararlı)21 L-Glutamik asit22 Glisin7,51 L-Histidin x HCl x H2O20,96 L-Hidroksiprolin19,67 L-İzolösin39,3 L-Lösin39,36 L-Lizin x HCl36,54 L-Metiyonin14,92 L-Fenilalanin16,52 L-Prolin17,27 L-Serin26,28 L-Treonin17,87 L-Triptofan3,06 L-Tirozin disodyum tuzu26,10 L-Valin17,57 Vitaminlerp-Aminobenzoik asit1 Askorbik asit0,56 D(+)-Biotin0 D-Kalsiyum pantotenat0,2 Kolin klorür5 Folik asit10 Miyo-inositol36 Nikotinamid0,5 Nikotinik asit0 Piridoksal HCl0,5 Piridoksin HCl0,5 Riboflavin0 Tiamin HCl0 B12 vitamini2

Ürüne Genel Bakış
Hacim: 100 ml Depolama: ≤-15°C Sterilite: Steril filtrelenmiş
Antibiyotik/Antimikotik Solüsyon (100x), hücre kültürü ve ilgili laboratuvar uygulamalarında mikrobiyal kontaminasyon risklerini azaltmak için tasarlanmış steril, kullanıma hazır bir konsantredir. Bu 100x çözelti, Gram-pozitif ve Gram-negatif bakterilere, mayalara ve filamentli mantarlara karşı geniş spektrumlu antimikrobiyal aktivite sağlayan iyi bilinen bir penisilin, streptomisin ve amfoterisin B kombinasyonu içerir. Formülasyon, ökaryotik hücre kültürlerinde, bakteriyel besiyerlerinde ve kontaminasyona duyarlı diğer sistemlerde kullanıma uygundur ve temiz ve tutarlı laboratuvar işlemlerini destekler.
Uygulama ve Faydaları Rutin araştırma protokolleri için optimize edilen bu çözüm, hücre kültürü iş akışlarında aseptik koşulları korumak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Kontaminasyona duyarlı ortamlarda güvenilir performans sunarak araştırmacıların hücre sağlığından veya deneysel tekrarlanabilirlikten ödün vermeden mikrobiyal aşırı büyüme riskini azaltmalarına yardımcı olur. Steril filtreli formülasyon, ek çözündürme adımlarına olan ihtiyacı ortadan kaldırarak kolaylaştırılmış besiyeri hazırlığını destekler ve günlük laboratuvar prosedürlerindeki değişkenliği azaltır.
Kullanım ve Uyumluluk Standart çalışma konsantrasyonları elde etmek için çözeltiyi 1:100 oranında tam kültür ortamınızda seyreltin. Ürün çok çeşitli memeli hücre hatları ve bazal besiyerleri ile uyumludur. Tutarlı stok mevcudiyeti sayesinde araştırmacılar güvenilir tedarik sürekliliğinden ve basitleştirilmiş lojistik planlamasından faydalanır. Çözelti ≤ -15 °C'de saklanmalı ve stabiliteyi korumak için tekrarlanan dondurma-çözme döngülerinden korunmalıdır. Yalnızca araştırma amaçlı kullanım içindir. Tanısal veya terapötik prosedürlerde kullanım için değildir. İnsanlarda veya hayvanlarda kullanım için değildir.

EDTA ve Fenol Kırmızısı İçeren Accutase Hücre Ayrıştırma Çözeltisi – 100 ml

Accutase, yapışkan memeli hücrelerini standart doku kültürü plastik kaplarından ve yapışma kaplı yüzeylerden ayırmak için tripsin/EDTA'ya nazik bir alternatif olarak tasarlanmış, kullanıma hazır, steril filtrelenmiş bir hücre ayırma çözeltisidir. Dengeli bir tuz çözeltisi içinde proteolitik ve kollajenolitik enzim aktivitesini birleştirerek etkili ancak kontrollü bir ayrışma sağlar, hücre yüzeyi proteinlerini korur ve yüksek pasaj sonrası canlılık ve hızlı yeniden yapışmayı destekler.

Accutase formülasyonu, görsel pH göstergesi olarak EDTA ve fenol kırmızısı içeren Dulbecco fosfat tamponlu salin (DPBS) bazlıdır. Enzimler memeli ve bakteriyel kökenli değildir, bu da Accutase'i kök hücre araştırmaları, aşı iş akışları ve hayvan veya mikrobiyal kaynaklı kontaminantların en aza indirilmesi gereken tüm uygulamalar için özellikle uygun hale getirir. Çözelti 37 °C'de kendiliğinden inhibe olur, bu nedenle ayrılma işleminden sonra nötralize edici reaktif veya serum içeren ortam gerekmez – hücreler doğrudan taze ortama aktarılabilir.

Temel Özellikler

Kullanıma hazır 1x steril filtrelenmiş sıvı – seyreltme veya sulandırma gerekmez
Nazik ayrışma için birleşik proteolitik ve kollajenolitik enzim aktivitesi
Partiler arası tutarlılık için her parti, tanımlanmış bir ayrışma aktivitesine göre standartlaştırılmıştır
Memeli ve bakteri kaynaklı olmayan enzim
37 °C'de kendiliğinden inhibe olur – nötralize edici çözeltiye gerek yoktur
EDTA içeren Dulbecco’s PBS içinde formüle edilmiştir
Görsel pH göstergesi olarak fenol kırmızısı içerir
pH 6,8 – 7,8


Tipik Uygulamalar
Accutase, insan embriyonik kök hücreleri (hESC'ler), insan indüklenmiş pluripotent kök hücreleri (iPSC'ler), nöral kök hücreler, birincil nöronlar ve HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ve A549 gibi rutin olarak kültürlenen yapışkan hücre hatları dahil olmak üzere çok çeşitli yapışkan ve hassas hücre tiplerini nazikçe ayrıştırır. Tipik kullanım örnekleri şunlardır:

Yapışkan memeli hücrelerinin rutin alt kültürü ve pasajlanması
hESC'lerin, iPSC'lerin ve diğer hassas hatların nazik tek hücre ayrıştırması
Akış sitometrisi ve FACS analizi için numune hazırlığı
Epitop bütünlüğünün önemli olduğu hücre yüzeyi belirteçlerinin analizi
Hücre göçü, proliferasyon ve apoptoz testleri
Serum açlığı ve onkogen transfeksiyon çalışmaları ile durgunluk testleri
Tümör hücresi ve nöral kret hücresi göç testleri
Biyoreaktör iş akışlarında üretim ölçeğinin büyütülmesi

Rutin çalışmalar için, 75 cm2 kültür yüzeyi başına yaklaşık 10 ml Accutase uygulayın ve oda sıcaklığında 5–10 dakika inkübe edin. Optimum inkübasyon süresi her hücre hattı için ayrı ayrı belirlenmelidir ve bir saati geçmemelidir. İlave etmeden önce, kalıntı serum ve iki değerlikli katyonları gidermek için hücre tabakasını kalsiyum ve magnezyum içermeyen DPBS gibi Ca2+/Mg2+ içermeyen bir tuz çözeltisiyle durulayın.

Kullanım ve Saklama
Açılmamış şişeyi -15 °C veya altında dondurulmuş olarak saklayın. Oda sıcaklığında veya +2 °C ile +8 °C arasında bir gece boyunca çözdürün. Yüksek sıcaklıklar enzim aktivitesini azalttığından, Accutase'i 37 °C'lik su banyosunda çözdürmeyin. Çözdürme işleminden sonra, çözelti +2 °C ile +8 °C arasında 2 aya kadar saklanabilir; oda sıcaklığında saklamayın. Uygulamadan önce reaktifi 37 °C'ye önceden ısıtmayın – oda sıcaklığında yıkanmış hücrelere doğrudan ekleyin. Uzun süreli raf ömrü için, tekrarlanan çözme döngülerinden kaçınmak amacıyla tek kullanımlık alıkoyma önerilir. Her zaman aseptik koşullar altında çalışın.

Kalite
Sıkı kalite standartları altında üretilmiştir. Accutase'in her partisi, partiden partiye tutarlı ve tekrarlanabilir performans sağlamak için steril filtreden geçirilir ve sterilite, pH, görünüm ve ayrışma aktivitesi açısından test edilir.

Ürün Özellikleri



Özellik
Ayrıntı



Ürün türüHücre ayrıştırma / disosiyasyon reaktifi
BiçimSteril filtrelenmiş sıvı, kullanıma hazır
Hacim100 ml
Çalışma konsantrasyonu1x (kullanıma hazır)
Enzim aktivitesiKombine proteolitik ve kollajenolitik
Enzim kaynağıMemeli ve bakteri kaynaklı olmayan
Tampon sistemiEDTA içeren Dulbecco’s PBS
pH göstergesiFenol kırmızısı
pH aralığı6,8 – 7,8
GörünümBerrak, soluk kırmızı ila turuncu renkli çözelti
Saklama sıcaklığı-15 °C veya altında
Çözüldükten sonra stabilite+2 °C ila +8 °C arasında 2 aya kadar
Önerilen kullanım hacmi75 cm2 kültür yüzeyi başına ~10 ml
Tipik inkübasyon süresiOda sıcaklığında 5 – 10 dakika
Nakliye koşullarıKuru buzda dondurulmuş
Kullanım amacıYalnızca araştırma amaçlı ve ileri üretim için



Formülasyon (Litre Başına Bileşim)



Bileşen
Konsantrasyon (mg/L)




İnorganik Tuzlar

Sodyum klorür (NaCl)8000,00
Disodyum hidrojen fosfat (Na2HPO4)1150,00
Potasyum klorür (KCl)200,00
Potasyum dihidrojen fosfat (KH2PO4)200,00

Diğer Bileşenler

EDTA · 4Na (tetrasodyum EDTA)220,00
Fenol kırmızısı3,00
Özel enzim karışımı (proteolitik ve kollajenolitik aktivite)1x



Accutase, Innovative Cell Technologies, Inc. şirketinin tescilli ticari markasıdır.

EDTA ve Fenol Kırmızısı İçeren Accutase Hücre Ayrıştırma Çözeltisi – 100 ml

Accutase, yapışkan memeli hücrelerini standart doku kültürü plastik kaplarından ve yapışma kaplı yüzeylerden ayırmak için tripsin/EDTA'ya nazik bir alternatif olarak tasarlanmış, kullanıma hazır, steril filtrelenmiş bir hücre ayırma çözeltisidir. Dengeli bir tuz çözeltisi içinde proteolitik ve kollajenolitik enzim aktivitesini birleştirerek etkili ancak kontrollü bir ayrışma sağlar, hücre yüzeyi proteinlerini korur ve yüksek pasaj sonrası canlılık ve hızlı yeniden yapışmayı destekler.

Accutase formülasyonu, görsel pH göstergesi olarak EDTA ve fenol kırmızısı içeren Dulbecco fosfat tamponlu salin (DPBS) bazlıdır. Enzimler memeli ve bakteriyel kökenli değildir, bu da Accutase'i kök hücre araştırmaları, aşı iş akışları ve hayvan veya mikrobiyal kaynaklı kontaminantların en aza indirilmesi gereken tüm uygulamalar için özellikle uygun hale getirir. Çözelti 37 °C'de kendiliğinden inhibe olur, bu nedenle ayrılma işleminden sonra nötralize edici reaktif veya serum içeren ortam gerekmez – hücreler doğrudan taze ortama aktarılabilir.

Temel Özellikler

Kullanıma hazır 1x steril filtrelenmiş sıvı – seyreltme veya sulandırma gerekmez
Nazik ayrışma için birleşik proteolitik ve kollajenolitik enzim aktivitesi
Partiler arası tutarlılık için her parti, tanımlanmış bir ayrışma aktivitesine göre standartlaştırılmıştır
Memeli ve bakteri kaynaklı olmayan enzim
37 °C'de kendiliğinden inhibe olur – nötralize edici çözeltiye gerek yoktur
EDTA içeren Dulbecco’s PBS içinde formüle edilmiştir
Görsel pH göstergesi olarak fenol kırmızısı içerir
pH 6,8 – 7,8


Tipik Uygulamalar
Accutase, insan embriyonik kök hücreleri (hESC'ler), insan indüklenmiş pluripotent kök hücreleri (iPSC'ler), nöral kök hücreler, birincil nöronlar ve HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ve A549 gibi rutin olarak kültürlenen yapışkan hücre hatları dahil olmak üzere çok çeşitli yapışkan ve hassas hücre tiplerini nazikçe ayrıştırır. Tipik kullanım örnekleri şunlardır:

Yapışkan memeli hücrelerinin rutin alt kültürü ve pasajlanması
hESC'lerin, iPSC'lerin ve diğer hassas hatların nazik tek hücre ayrıştırması
Akış sitometrisi ve FACS analizi için numune hazırlığı
Epitop bütünlüğünün önemli olduğu hücre yüzeyi belirteçlerinin analizi
Hücre göçü, proliferasyon ve apoptoz testleri
Serum açlığı ve onkogen transfeksiyon çalışmaları ile durgunluk testleri
Tümör hücresi ve nöral kret hücresi göç testleri
Biyoreaktör iş akışlarında üretim ölçeğinin büyütülmesi

Rutin çalışmalar için, 75 cm2 kültür yüzeyi başına yaklaşık 10 ml Accutase uygulayın ve oda sıcaklığında 5–10 dakika inkübe edin. Optimum inkübasyon süresi her hücre hattı için ayrı ayrı belirlenmelidir ve bir saati geçmemelidir. İlave etmeden önce, kalıntı serum ve iki değerlikli katyonları gidermek için hücre tabakasını kalsiyum ve magnezyum içermeyen DPBS gibi Ca2+/Mg2+ içermeyen bir tuz çözeltisiyle durulayın.

Kullanım ve Saklama
Açılmamış şişeyi -15 °C veya altında dondurulmuş olarak saklayın. Oda sıcaklığında veya +2 °C ile +8 °C arasında bir gece boyunca çözdürün. Yüksek sıcaklıklar enzim aktivitesini azalttığından, Accutase'i 37 °C'lik su banyosunda çözdürmeyin. Çözdürme işleminden sonra, çözelti +2 °C ile +8 °C arasında 2 aya kadar saklanabilir; oda sıcaklığında saklamayın. Uygulamadan önce reaktifi 37 °C'ye önceden ısıtmayın – oda sıcaklığında yıkanmış hücrelere doğrudan ekleyin. Uzun süreli raf ömrü için, tekrarlanan çözme döngülerinden kaçınmak amacıyla tek kullanımlık alıkoyma önerilir. Her zaman aseptik koşullar altında çalışın.

Kalite
Sıkı kalite standartları altında üretilmiştir. Accutase'in her partisi, partiden partiye tutarlı ve tekrarlanabilir performans sağlamak için steril filtreden geçirilir ve sterilite, pH, görünüm ve ayrışma aktivitesi açısından test edilir.

Ürün Özellikleri



Özellik
Ayrıntı



Ürün türüHücre ayrıştırma / disosiyasyon reaktifi
BiçimSteril filtrelenmiş sıvı, kullanıma hazır
Hacim100 ml
Çalışma konsantrasyonu1x (kullanıma hazır)
Enzim aktivitesiKombine proteolitik ve kollajenolitik
Enzim kaynağıMemeli ve bakteri kaynaklı olmayan
Tampon sistemiEDTA içeren Dulbecco’s PBS
pH göstergesiFenol kırmızısı
pH aralığı6,8 – 7,8
GörünümBerrak, soluk kırmızı ila turuncu renkli çözelti
Saklama sıcaklığı-15 °C veya altında
Çözüldükten sonra stabilite+2 °C ila +8 °C arasında 2 aya kadar
Önerilen kullanım hacmi75 cm2 kültür yüzeyi başına ~10 ml
Tipik inkübasyon süresiOda sıcaklığında 5 – 10 dakika
Nakliye koşullarıKuru buzda dondurulmuş
Kullanım amacıYalnızca araştırma amaçlı ve ileri üretim için



Formülasyon (Litre Başına Bileşim)



Bileşen
Konsantrasyon (mg/L)




İnorganik Tuzlar

Sodyum klorür (NaCl)8000,00
Disodyum hidrojen fosfat (Na2HPO4)1150,00
Potasyum klorür (KCl)200,00
Potasyum dihidrojen fosfat (KH2PO4)200,00

Diğer Bileşenler

EDTA · 4Na (tetrasodyum EDTA)220,00
Fenol kırmızısı3,00
Özel enzim karışımı (proteolitik ve kollajenolitik aktivite)1x



Accutase, Innovative Cell Technologies, Inc. şirketinin tescilli ticari markasıdır.