Wilms3-celler

800,00 €*

Produkterna levereras frysta på torris i kryorör. Varje kryorör innehåller vanligtvis 3 × 10 ⁶ celler för adherenta cellinjer eller 5 × 10⁶ celler för suspensionscellinjer (se batchens CoA för mer information).

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300414

Säkerhetsdatablad

Produktblad

Analyscertifikat (CoA)

Avtal om materialöverföring

Beskrivning	Wilms3-cellinjen etablerades från en primär Wilms-tumör hos en pediatrisk patient, som kännetecknas av en somatisk WT1-mutation. Till skillnad från många andra cellinjer för Wilms-tumörer har Wilms3 en heterozygot frameshift-mutation i WT1-genen (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), vilket leder till produktion av ett trunkerat WT1-protein. Denna partiella förlust av WT1-funktionen är förknippad med utvecklingen av tumörer som uppvisar en stromal eller mesenkymal fenotyp. WT1-mutationen i Wilms3 är dock inte homozygot, vilket gör studien mer komplex, eftersom den bibehåller viss WT1-funktion som kan påverka tumörbiologin på ett annat sätt än cellinjer med fullständig WT1-förlust. Wilms3 bär också på en mutation i CTNNB1-genen, som specifikt påverkar treonin 41 (p.T41A), som spelar en kritisk roll i Wnt-signalvägen. Mutationen stabiliserar β-Catenin, vilket förhindrar dess nedbrytning och leder till en konstitutiv aktivering av Wnt-signalvägen. Den ihållande aktiveringen av Wnt-signalering driver cellproliferation och bidrar till tumörutveckling i Wilms3, vilket gör den till en viktig modell för att studera effekterna av CTNNB1-mutationer i samband med en delvis funktionell WT1-bakgrund. Fenotypiskt uppvisar Wilms3-celler en mesenkymaliknande morfologi, med uttryck av vimentin och avsaknad av cytokeratin, vilket överensstämmer med de stromala egenskaper som observerats i den ursprungliga tumören. Dessa celler uppvisar begränsad differentieringspotential, med förmåga att genomgå viss mesenkymal differentiering under specifika förhållanden. Proteomiska analyser av Wilms3 har visat att flera receptortyrosinkinaser (RTK) aktiveras, bland annat PDGFRβ och AXL, vilket bidrar till cellöverlevnad och cellproliferation. Dessutom aktiveras nedströms signalvägar som MAPK och PI3K/AKT, vilket förstärker de maligna egenskaperna hos Wilms3-cellerna. En unik aspekt av Wilms3 är dess partiella WT1-funktionalitet, vilket ger ett distinkt perspektiv på hur WT1-mutationer bidrar till Wilms tumörbiologi när mutationen inte är fullständig. Samspelet mellan WT1 och Wnt-signalering i Wilms3 erbjuder en värdefull möjlighet att studera de nyanserade roller som dessa signalvägar spelar i tumörutvecklingen. Sammantaget fungerar Wilms3 som en viktig modell för att undersöka de molekylära mekanismer som ligger till grund för Wilms tumör i närvaro av partiell WT1-förlust och konstitutiv Wnt-vägaktivering.
Organism	Människan
Vävnad	Njurar
Sjukdom	Wilms tumör
Tillämpningar	In vitro cellodlingsmodell. Biokemiska studier

Ålder	11-12 månader
Kön	Man
Etnisk tillhörighet	Kaukasisk
Morfologi	Spindelformad
Celltyp	Wilms-celler
Egenskaper för tillväxt	Följsam

Citationstecken	Wilms3 (Cytion katalognummer 300414)
Biosäkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SF
Insättare	B. Royer-Pokora

Mutationsprofil	WT1-mutationsstatus: homozygot c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1-mutationsstatus: vildtyp

Kulturmedium	MSCGM-kit (från Lonza)
Dissociationsreagens	Accutase
Subkulturering	Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Frys mediet	Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Upptining och odling av celler	Bekräfta att flaskan är djupfryst vid leverans, eftersom cellerna skickas på torris för att bibehålla optimala temperaturer under transporten. Vid mottagandet ska du antingen förvara kryovialen omedelbart vid temperaturer under -150 °C för att säkerställa att cellernas integritet bevaras, eller gå vidare till steg 3 om omedelbar odling krävs. Vid omedelbar odling ska injektionsflaskan snabbt tinas genom att den sänks ned i ett 37 °C vattenbad med rent vatten och ett antimikrobiellt medel och omrörs försiktigt i 40-60 sekunder tills en liten isklump återstår. Utför alla efterföljande steg under sterila förhållanden i en flödeshuv och desinficera kryovialerna med 70 % etanol innan de öppnas. Öppna försiktigt den desinficerade flaskan och överför cellsuspensionen till ett 15 ml centrifugrör som innehåller 8 ml rumstempererat odlingsmedium och blanda försiktigt. Centrifugera blandningen vid 300 x g i 3 minuter för att separera cellerna och kassera försiktigt supernatanten som innehåller resterande frysmedium. Resuspendera försiktigt cellpelleten i 10 ml färskt odlingsmedium. För adherenta celler, fördela suspensionen mellan två T25-kulturkolvar; för suspensionskulturer, överför allt medium till en T25-kolv för att främja effektiv cellinteraktion och tillväxt. Följ fastställda subkulturprotokoll för fortsatt tillväxt och underhåll av cellinjen, vilket säkerställer tillförlitliga experimentella resultat.
Inkubationsatmosfär	37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.
Ytbeläggning av flaska	Ingen
Frysningsprocedur	Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
Leveransvillkor	Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
Förvaringsförhållanden	För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Sterilitet	Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik. För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
STR-profil	Amelogenin: x,y CSF1PO: 11,12 D13S317: 12,13 D16S539: 9,11 D5S818: 9,9 D7S820: 10,11 TH01: 6,6 TPOX: 8,8 vWA: 16,17 D3S1358: 15,16 D21S11: 29,31 D18S51: 13,17 Penta E: 7,10 Penta D: 9,13 D8S1179: 10,11 FGA: 22,24
HLA-alleler	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Lotnummer	Typ av certifikat	Datum	Katalognummer
300414-221	Certifikat för analys	23. May. 2025	300414

Om du avser att använda Cytions cellinjer enbart för intern forskning på en enda forskningsplats, vänligen fyll i och underteckna vårt materialöverföringsavtal (MTA) och skicka in det tillsammans med din beställning.

För alla kommersiella tillämpningar – inklusive men inte begränsat till tjänster mot ersättning, kvalitetskontroll, produktlansering, diagnostisk användning eller regulatoriska studier – vänligen fyll i formuläret för avsedd användning så att vi kan utarbeta ett avtal som är anpassat till ditt projekt.

Observera: MTA gäller endast för vissa cellinjer. Om detta meddelande och MTA-dokumentet visas på en produktsida är avtalet tillämpligt. För cellinjer som inte omfattas av MTA visas ingen hänvisning till avtalet. MTA gäller inte för kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakta vårt amerikanska företag för att få det lämpliga avtalet.

Wilms3-celler

Allmän information

Egenskaper

Lagstadgade uppgifter

Biomolekylära data

Hantering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Analyscertifikat (CoA)

Avtal om materialöverföring