HaCaT-celler
Väsentliga fakta om Hacat-celler
| Beskrivning | HaCaT-celler är en central modell inom dermatologisk forskning och ger insikter i de komplexa mekanismerna bakom hudens biologi och patologi. Den spontant odödliga HaCaT-cellinjen härstammar från vuxna mänskliga epidermala celler och har kvar förmågan att proliferera och genomgå differentiering, på samma sätt som basala keratinocyter in vivo. HaCaT-celler fungerar som en robust plattform för att undersöka den epidermala differentieringsprocessen och studera de epidermala differentieringsmarkörer som är viktiga för att upprätthålla hudens integritet. HaCaT-cellernas känslighet för apoptos och deras känslighet för apoptosframkallande medel studeras ingående, särskilt i samband med cytotoxiska medel som RIPL. Forskare bedömer dessa medels cytotoxicitet och omfattningen av cytotoxiciteten med hjälp av HaCaT-celler och använder tekniker som fluorescensmikroskopi för att visualisera cellförändringar. Forskare har använt HaCaT-celler för att undersöka effekterna av olika ämnen, inklusive antimikrobiella substrat och deras påverkan på cellviabiliteten. Dessa celler är ett utmärkt substrat för att testa antimikrobiella biomaterial och antimikrobiella atelokollagensubstrat, som är avgörande för hudreparation och medicinska tillämpningar. HaCaT-epidermalinjen spelar också en avgörande roll när det gäller att studera cellulär senescens, cytokiner och genuttrycksprofiler relaterade till åldrande och kroniska sjukdomar. HaCaT-cellernas transkriptionsprofiler, inklusive κB:s och mikroRNA:s roll, ger en inblick i regleringsmekanismerna på molekylär nivå. HaCaT-keratinocytlinjen, med sina egenskaper som epidermala keratinocyter, erbjuder ett lätthanterligt system för att dissekera det intrikata samspelet mellan epidermala celler och immunsystemet, särskilt keratinocyternas roll i sjukdomstillstånd. De möjliggör utforskning av epigenetiska modifieringar och deras påverkan på differentieringen av keratinocyter, inklusive bildandet av det kornifierade höljet, en nyckelfunktion i hudens barriärfunktion. Sammanfattningsvis är HaCaT-celler en oumbärlig modell inom dermatologisk forskning, som underlättar en djupare förståelse av hudens biologi och patologi genom sin likhet med basala keratinocyter och sin förmåga att genomgå celltillväxt och differentiering. Deras användning sträcker sig från studier av epidermal differentiering och antimikrobiella effekter till utforskning av cellulära reaktioner som apoptos, vilket gör dem till en hörnsten inom cellbiologi och biomedicinsk forskning. |
|---|---|
| Organism | Människan |
| Vävnad | Hud |
Detaljer
| Ålder | 62 år |
|---|---|
| Kön | Man |
| Etnisk tillhörighet | Kaukasisk |
| Celltyp | Keratinocyter med en diameter på 20-25 mikrometer. |
| Egenskaper för tillväxt | Följsam |
Dokumentation
| Citationstecken | HaCaT (Cytion katalognummer 300493) |
|---|---|
| Biosäkerhetsnivå | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0038 |
| Insättare | DKFZ, Heidelberg |
Genetik för HaCaT keratinocytcellinjen
| Tumörframkallande | Nej |
|---|---|
| Karyotyp | Aneuploid (hypotetraploid) |
Hantering av Hacat-cellinjen
| Kulturmedium | DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a) |
|---|---|
| Kosttillskott | Komplettera mediet med 10% FBS |
| Dissociationsreagens | Blandningen 1:1 av EDTA (lager: 0,05%) och trypsin (lager: 0,1%) måste beredas varje gång innan cellerna tas loss med hjälp av PBS utan Ca2+ och Mg2+ för att ge en fysiologisk osmolaritet. Färdiga blandningar av trypsin/EDTA rekommenderas inte, eftersom det kan leda till cellklumpar. Som ett alternativ kan TrypLE Express (Life Technologies) användas i stället för trypsin/EDTA. Tillverkarens protokoll bör följas. |
| Tid för dubblering | Fördubblingstiden för HaCaT-celler är 28 timmar. |
| Subkulturering |
|
| Splitförhållande | Ett förhållande på 1:5 till 1:10 rekommenderas |
| Såningstäthet | 1 x 104 celler/cm2 |
| Förnyelse av vätska | 2 gånger per vecka |
| Frys mediet | Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress. |
| Upptining och odling av celler |
|
| Inkubationsatmosfär | 37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär. |
| Ytbeläggning av flaska | För optimal vidhäftning och viabilitet efter upptining rekommenderar vi att kollagenbelagda kolvar eller plattor används. |
| Frysningsprocedur | Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring. |
| Leveransvillkor | Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring. |
| Förvaringsförhållanden | För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve. |
Kvalitetssäkring
| Sterilitet | Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik. För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner. |
|---|---|
| STR-profil |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 9.3
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
Penta E: 7,12
Penta D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| HLA-alleler |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: '03:04:01, '15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: '01:03:01, '01:03:02
|
Analyscertifikat (CoA)
| Lotnummer | Typ av certifikat | Datum | Katalognummer |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | Certifikat för analys | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | Certifikat för analys | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | Certifikat för analys | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | Certifikat för analys | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | Certifikat för analys | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | Certifikat för analys | 23. May. 2025 | 300493 |