B-LCL-HROG02-celler
777,00 €*
Produkterna levereras frysta på torris i kryorör. Varje kryorör innehåller vanligtvis 3 × 10 6 celler för adherenta cellinjer eller 5 × 106 celler för suspensionscellinjer (se batchens CoA för mer information).
Allmän information
| Beskrivning | B-LCL-HROG02 är en mänsklig B-lymfoblastoidcellinje som transformerats av Epstein-Barr-viruset (EBV) (B-LCL) som etablerats från perifert blod från en 68-årig kaukasisk manlig magcancerpatient inom HROG-biobankserien, motsvarigheten för magcancer till HROC-samlingen av B-LCL från kolorektalcancer. EBV-medierad in vitro-immortalisering av primära B-lymfocyter från perifert blod genererade en stabilt prolifererande suspensionscellinje med lymfoblastliknande morfologi. HROG02-celler uttrycker konstant EBV-latensantigener (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) samt höga nivåer av HLA-molekyler av klass I och II, kostimulerande molekyler CD80 och CD86, adhesionsmolekyler CD54 och CD58 samt B-cellsmarkörer CD19, CD20 och CD23. B-LCL-HROG02 används i funktionella analyser av T-celler och NK-celler, HLA-typning, blandade lymfocytreaktioner, studier av antigenpresentation samt protokoll för induktion av cytotoxiska T-celler (CTL). Inom den patientanpassade HROG-biobanken utgör den en definierad immunologisk referens för forskning om magcancer, vilket möjliggör autologa eller allogena studier av tumörassocierade immunreaktioner. Cellinjen stödjer undersökningar av magcancerspecifik T-cellsreaktivitet och patientanpassade immunanalyssystem som är relevanta för magtumörimmunologi. B-LCL-HROG02 odlas i suspension i RPMI 1640 kompletterat med 15–20 % FBS vid 37 °C i en fuktad atmosfär med 5 % CO₂. Cellerna passageras var 2–3 dagar genom utspädning till 2–5 × 10⁵ celler/ml. Ingen enzymatisk dissociation krävs. Allt arbete med denna EBV-positiva cellinje måste uppfylla biosäkerhetskraven för BSL-2 samt gällande institutionella och nationella bestämmelser som reglerar EBV-transformerat biologiskt material. |
|---|---|
| Organism | Människan |
| Vävnad | Perifert blod |
| Sjukdom | EBV-transformerad B-lymfoblastoidcellinje (B-LCL); donator med magcancer |
| Tillämpningar | Immunologisk forskning; T-cells- och NK-cellsanalyser; HLA-typning; studier av antigenpresentation; blandade lymfocytreaktioner; målceller för CTL-analys; immunologi vid magcancer |
Egenskaper
| Ålder | 68 år |
|---|---|
| Kön | Man |
| Etnisk tillhörighet | Kaukasisk |
| Morfologi | Lymfoblastliknande |
| Celltyp | B lymfoblast |
| Egenskaper för tillväxt | Avstängning |
Lagstadgade uppgifter
| Citationstecken | B-LCL-HROG02 (Cytion-katalognummer 302106) |
|---|---|
| Biosäkerhetsnivå | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| GMO-status | GMO-S2: Denna B-LCL innehåller ett stabilt bevarat EBV-episom som kodar för gener i virusets latenta fas (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV klassificeras som en patogen i riskgrupp 2. Hantering kräver BSL-2-säkerhetsnivå. Denna klassificering gäller inom Tyskland; bestämmelserna kan skilja sig åt i andra jurisdiktioner. |
Biomolekylära data
| Virus | Transformant: EBV |
|---|
Hantering
| Kulturmedium | RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a) |
|---|---|
| Kosttillskott | Tillsätt 15–20 % FBS till odlingsmediet |
| Tid för dubblering | 24 till 48 timmar |
| Subkulturering | Späd odlingen till 2–5 × 10⁵ celler/ml med färskt, förvärmt komplett odlingsmedium var 2–3:e dag. Räkna antalet livsdugliga celler före passering för att upprätthålla optimal celltäthet. Låt inte odlingarna överstiga 2 × 10⁶ celler/ml. Centrifugering (300 × g, 5 min) kan användas för att byta medium vid behov. Ingen enzymatisk dissociation krävs. |
| Splitförhållande | 1 till 4 |
| Såningstäthet | 2 till 5 × 10⁵ celler/ml |
| Förnyelse av vätska | Var 2:a till 3:e dag |
| Frys mediet | Som kryopreserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining. |
| Upptining och odling av celler |
|
| Inkubationsatmosfär | 37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär. |
| Leveransvillkor | Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring. |
| Förvaringsförhållanden | För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve. |
Kvalitetskontroll och molekylär analys
Avtal med tredje part
Observera att denna cellinje inte är tillgänglig enligt Cytions standard MTA, eftersom den kräver ett tredjepartsavtal och/eller är föremål för förhandling med den ursprungliga licensgivaren.-
Produkter som krävs
Produkter som krävs
Frysmedium CM-1 - 50 mlVarianter av kryopreserveringsmedier: 50 mlCytions Freeze Medium CM-1 är ett toppmodernt kryopreserveringsmedium som är utformat för att säkerställa högsta möjliga cellviabilitet och funktionalitet efter upptining. Detta mångsidiga medium är lämpligt för ett brett spektrum av celltyper, inklusive både mänskliga och animaliska celler, vilket gör det till ett viktigt verktyg för olika forskningsapplikationer. Freeze Medium CM-1 är formulerat med en noggrant balanserad kombination av kryoskyddsmedel och viktiga näringsämnen och minimerar bildandet av iskristaller och cellulär stress under frysningsprocessen, vilket bevarar cellens integritet.
Viktiga egenskaper hos Freeze Medium CM-1 inkluderar:
Bred kompatibilitet: Effektivt för ett stort antal olika celltyper, inklusive primära celler, stamceller och etablerade cellinjer.
Hög viabilitet: Optimerat för att maximera cellåtervinning och viabilitet efter upptining, vilket säkerställer tillförlitliga experimentella resultat.
Redo att använda: Bekvämt förberedd och steriliserad för omedelbar användning, vilket minskar förberedelsetiden och risken för kontaminering.
Förbättrad stabilitet: Upprätthåller konsekvent prestanda under standardförhållanden för kryokonservering, vilket säkerställer reproducerbara resultat.
Lång hållbarhetstid: CM-1 är ett serumhaltigt kryopreserveringsmedium som är färdigt att använda och kan förvaras i kylskåp i upp till ett år.
Användning av CM-1 för frysning av celler
Följ dessa steg för att använda CM-1 för frysning av både adherenta celler och suspenderade celler
För adherenta celler, tvätta och separera dem från odlingssubstratet. För suspenderade celler, fortsätt direkt till nästa steg.
Räkna cellerna för att säkerställa att de har rätt koncentration.
Centrifugera cellerna för att pelletera dem och resuspendera sedan i CM-1-frysmedium.
Överför de resuspenderade cellerna till kryovialer.
Använd en metod med långsam frysning innan cellerna överförs till långtidsförvaring
Metod
Beskrivning av metoden
Steg för steg
❄️
Manuell frysning
En steg-för-steg-metod som innebär gradvis temperatursänkning för att säkerställa cellernas livskraft
1️⃣ Placera cellerna i frysmedium i en 4°C frys i 40 minuter.
2️⃣ Överför till en frys på -80°C i 24 timmar.
3️⃣ Förvara cellerna i flytande kväve för långtidsförvaring
❄️
Användning av Mr Frosty
En praktisk anordning som möjliggör kontrollerade fryshastigheter utan elektrisk ström
1️⃣ Förbered celler i kryovialer med frysmedium.
2️⃣ Placera kryovialerna i Mr Frosty-behållaren.
3️⃣ Förvara vid -80°C i 24 timmar innan du överför till flytande kväve
❄️
Frys med kontrollerad hastighet
En högprecisionsfrys från Thermo Fisher eller andra tillverkare som är utformad för kontrollerad temperatursänkning
1️⃣ Programmera enheten för att gradvis sänka temperaturen.
2️⃣ Placera de förberedda cellerna i frysen.
3️⃣ Efter fryscykeln, överför cellerna till flytande kväve
Förvara kryovialerna vid temperaturer under -130°C eller i flytande kväve för långtidsförvaring.
Ingredienser
Innehåller FBS, DMSO, glukos, salter
Buffringskapacitet: pH = 7,2 till 7,6
Cytions Freeze Medium CM-1 erbjuder en tillförlitlig lösning för kryokonservering, vilket säkerställer hög cellviabilitet och funktionalitet efter upptining för ett brett spektrum av forskningsapplikationer.59,00 €*Accutase-lösning för cellavskiljning – 100 mlVarianter: 100 mlAccutase cellavskiljningslösning med EDTA och fenolrött – 100 ml
Accutase är en färdig att använda, sterilt filtrerad cellavskiljningslösning som är utformad som ett skonsamt alternativ till trypsin/EDTA för att separera vidhäftande däggdjursceller från standardplastutrustning för vävnadsodling och ytor med vidhäftningsbeläggning. Den kombinerar proteolytisk och kollagenolytisk enzymaktivitet i en balanserad saltlösning för att ge effektiv men kontrollerad separering, vilket bevarar proteiner på cellytan och främjar hög livskraft efter passage samt snabb återvidhäftning.
Accutase-formuleringen är baserad på Dulbeccos fosfatbuffrade saltlösning (DPBS) med EDTA och fenolrött som visuell pH-indikator. Enzymerna är av icke-däggdjurs
- och icke-bakteriellt ursprung, vilket gör Accutase särskilt väl lämpad för stamcellsforskning, vaccinarbetsflöden och alla tillämpningar där föroreningar av animaliskt eller mikrobiellt ursprung måste minimeras. Lösningen autoinhiberas vid 37 °C, så inget neutraliserande reagens eller serumhaltigt medium krävs efter avskiljningen – cellerna kan överföras direkt till färskt medium.
Viktiga egenskaper
Användningsfärdig 1x sterilfiltrerad vätska – ingen utspädning eller rekonstituering krävs
Kombinerad proteolytisk och kollagenolytisk enzymaktivitet för skonsam dissociation
Varje batch standardiserad till en definierad dissociationsaktivitet för konsistens mellan olika partier
Enzymer av icke-mammaliskt och icke-bakteriellt ursprung
Autoinhiberas vid 37 °C – ingen neutraliserande lösning behövs
Formulerad i Dulbeccos PBS med EDTA
Fenolrött ingår som visuell pH-indikator
pH 6,8–7,8
Typiska tillämpningar
Accutase dissocierar skonsamt en mängd olika vidhäftande och känsliga celltyper, inklusive humana embryonala stamceller (hESCs), humana inducerade pluripotenta stamceller (iPSCs), neurala stamceller, primära neuroner och rutinmässigt odlade vidhäftande cellinjer såsom HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 och A549. Typiska användningsområden inkluderar:
Rutinmässig subkultur och passering av vidhäftande däggdjursceller
Skonsam dissociation av enskilda celler från hESCs, iPSCs och andra känsliga cellinjer
Provberedning för flödescytometri och FACS-analys
Analys av cellytmarkörer där epitopintegriteten är viktig
Analyser av cellmigrering, proliferation och apoptos
Quiescensanalyser genom serumdeprivation och studier av onkogen-transfektion
Migrationsanalyser av tumörceller och neurala krestceller
Uppskalning av produktionen i bioreaktorarbetsflöden
För rutinarbete, applicera cirka 10 ml Accutase per 75 cm2 odlingsyta och inkubera i 5–10 minuter vid rumstemperatur. Den optimala inkubationstiden bör bestämmas för varje cellinje och bör inte överstiga en timme. Innan tillsats, skölj cellskiktet med en Ca2+/Mg2+-fri saltlösning, såsom DPBS utan kalcium och magnesium, för att avlägsna kvarvarande serum och tvåvärda katjoner.
Hantering och förvaring
Förvara den oöppnade flaskan fryst vid -15 °C eller lägre. Tina antingen vid rumstemperatur eller över natten vid +2 °C till +8 °C. Tina inte Accutase i ett 37 °C varmt vattenbad, eftersom förhöjda temperaturer minskar enzymaktiviteten. Efter upptining kan lösningen förvaras i upp till 2 månader vid +2 °C till +8 °C; förvara inte vid rumstemperatur. Förvärm inte reagenset till 37 °C före användning – tillsätt det direkt till tvättade celler vid rumstemperatur. För långvarig hållbarhet rekommenderas engångsaliquotering för att undvika upprepade upptiningscykler. Arbeta alltid under aseptiska förhållanden.
Kvalitet
Tillverkat enligt strikta kvalitetsstandarder. Varje batch av Accutase är sterilt filtrerad och testad med avseende på sterilitet, pH, utseende och dissociationsaktivitet för att säkerställa enhetlig, reproducerbar prestanda från batch till batch.
Produktspecifikationer
Specifikation
Detalj
ProdukttypReagens för cellavskiljning/dissociation
FormatSterilfiltrerad vätska, färdig att använda
Volym100 ml
Arbetskoncentration1x (färdig att använda)
EnzymaktivitetKombinerad proteolytisk och kollagenolytisk
Enzymets ursprungIcke-däggdjurs
- och icke-bakteriellt
BuffertsystemDulbeccos PBS med EDTA
pH-indikatorFenolrött
pH-intervall6,8 – 7,8
UtseendeKlar, ljusröd till orange lösning
Förvaringstemperatur-15 °C eller lägre
Hållbarhet efter upptiningUpp till 2 månader vid +2 °C till +8 °C
Rekommenderad användningsvolym~10 ml per 75 cm² odlingsyta
Typisk inkubationstid5–10 minuter vid rumstemperatur
TransportförhållandenFryst på torris
Avsedd användningEndast för forskningsändamål och vidare tillverkning
Formulering (sammansättning per liter)
Komponent
Koncentration (mg/l)
Oorganiska salter
Natriumklorid (NaCl)8000,00
Dinatriumvätefosfat (Na2HPO4)1150,00
Kaliumklorid (KCl)200,00
Kaliumdihydrogenfosfat (KH2PO4)200,00
Övriga komponenter
EDTA · 4Na (tetranatrium-EDTA)220,00
Fenolrött3,00
Patenterad enzymblandning (proteolytisk och kollagenolytisk aktivitet)1x
Accutase är ett registrerat varumärke som tillhör Innovative Cell Technologies, Inc.75,00 €*Antibiotikum/Antimykotikum lösning (100x)Produktöversikt
Volym: 100 ml Förvaring: ≤-15°C Sterilitet: Sterilt filtrerad
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) är ett sterilt, bruksfärdigt koncentrat som är utformat för att minska riskerna för mikrobiell kontaminering vid cellodling och relaterade laboratorieapplikationer. Denna 100x-lösning innehåller en väletablerad kombination av penicillin, streptomycin och amfotericin B, vilket ger en bredspektrig antimikrobiell aktivitet mot grampositiva och gramnegativa bakterier, jästsvampar och filamentösa svampar. Formuleringen är lämplig för användning i eukaryota cellkulturer, bakteriemedier och andra kontaminationskänsliga system, vilket stöder en ren och konsekvent laboratorieverksamhet.
Tillämpning och fördelar Denna lösning är optimerad för rutinmässiga forskningsprotokoll och används ofta för att upprätthålla aseptiska förhållanden i arbetsflöden för cellodling. Den ger tillförlitlig prestanda i kontamineringskänsliga miljöer och hjälper forskare att minska risken för mikrobiell överväxt utan att äventyra cellernas hälsa eller experimentens reproducerbarhet. Den sterilfiltrerade formuleringen eliminerar behovet av ytterligare solubiliseringssteg, vilket ger en strömlinjeformad medieberedning och minskar variabiliteten i de dagliga laboratorieprocedurerna.
Användning och kompatibilitet För att uppnå standardiserade arbetskoncentrationer, späd lösningen 1:100 i ditt kompletta odlingsmedium. Produkten är kompatibel med ett brett spektrum av mammaliecellinjer och basala medier. Med konsekvent lagertillgänglighet kan forskare dra nytta av pålitlig leveranskontinuitet och förenklad logistikplanering. Lösningen ska förvaras vid ≤ -15 °C och skyddas från upprepade frys
- och upptiningscykler för att bibehålla stabiliteten. Endast för forskningsändamål. Ej för användning i diagnostiska eller terapeutiska procedurer. Ej för användning på människor eller djur.45,00 €*