Celule Wilms3

800,00 EUR*

Produsele sunt expediate congelate în gheață carbonică în criotuburi. Fiecare criotub conține de obicei 3 × 10 ⁶ celule pentru linii aderente sau 5 × 10⁶ celule pentru linii în suspensie (consultați certificatul de analiză al lotului pentru detalii).

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 300414

Fișă cu date de securitate

Fișa produsului

Certificat de analiză (CoA)

Acord de transfer de materiale

Descriere	Linia celulară Wilms3 a fost stabilită dintr-o tumoră Wilms primară la un pacient pediatric, caracterizată printr-o mutație somatică WT1. Spre deosebire de multe alte linii celulare de tumori Wilms, Wilms3 prezintă o mutație heterozigotă de tip frameshift în gena WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), care duce la producerea unei proteine WT1 trunchiate. Această pierdere parțială a funcției WT1 este asociată cu dezvoltarea de tumori care prezintă un fenotip stromal sau mezenchimal. Cu toate acestea, mutația WT1 în Wilms3 nu este homozigotă, ceea ce sporește complexitatea studiului său, deoarece păstrează o anumită funcție WT1 care poate influența biologia tumorală în mod diferit în comparație cu liniile celulare cu pierdere completă a WT1. Wilms3 poartă, de asemenea, o mutație în gena CTNNB1, care afectează în mod specific treonina 41 (p.T41A), care joacă un rol critic în calea de semnalizare Wnt. Această mutație stabilizează β-Catenina, împiedicând degradarea sa și conducând la activarea constitutivă a căii Wnt. Activarea persistentă a semnalizării Wnt determină proliferarea celulară și contribuie la tumorogeneză în Wilms3, făcând din aceasta un model cheie pentru studierea impactului mutațiilor CTNNB1 în contextul unui fundal WT1 parțial funcțional. Din punct de vedere fenotipic, celulele Wilms3 prezintă o morfologie de tip mezenchimal, exprimând vimentină și lipsindu-le citokeratina, în concordanță cu caracteristicile stromale observate în tumoarea originală. Aceste celule prezintă un potențial de diferențiere limitat, cu capacitatea de a suferi o anumită diferențiere mezenchimală în condiții specifice. Analizele proteomice ale Wilms3 au evidențiat activarea mai multor receptoare tirosin kinaze (RTK), inclusiv PDGFRβ și AXL, care susțin supraviețuirea și proliferarea celulară. În plus, căile de semnalizare din aval, cum ar fi MAPK și PI3K/AKT, sunt activate, consolidând proprietățile maligne ale celulelor Wilms3. Un aspect unic al Wilms3 este funcționalitatea sa parțială WT1, care oferă o perspectivă distinctă asupra modului în care mutațiile WT1 contribuie la biologia tumorii Wilms atunci când mutația nu este completă. Interacțiunea dintre WT1 și semnalizarea Wnt în Wilms3 oferă o oportunitate valoroasă de a studia rolurile nuanțate pe care aceste căi le joacă în dezvoltarea tumorilor. În general, Wilms3 servește ca un model important pentru investigarea mecanismelor moleculare care stau la baza tumorii Wilms în prezența pierderii parțiale a WT1 și a activării constitutive a căii Wnt.
Organism	Om
Țesut	Rinichi
Boala	Tumora Wilms
Aplicații	Model de cultură celulară in vitro. Studii biochimice

Vârsta	11-12 luni
Gen	Masculin
Etnicitate	Caucazian
Morfologie	În formă de fus
Tip de celulă	Celule Wilms
Proprietăți de creștere	Aderent

Mențiune	Wilms3 (număr de catalog Cytion 300414)
Nivelul de biosecuritate	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccesiune	CVCL_A5SF

Profil mutațional	Statutul mutației WT1: homozigot c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, Statutul mutației CTNNB1: wild type

Mediu de cultură	Kit MSCGM (de la Lonza)
Reactiv de disociere	Accutase
Subcultură	Îndepărtați mediul vechi de pe celulele aderente și spălați-le cu PBS care nu conține calciu și magneziu. Pentru flacoanele T25, se utilizează 3-5 ml de PBS, iar pentru flacoanele T75, 5-10 ml. Apoi, se acoperă celulele complet cu Accutase, folosind 1-2 ml pentru flacoanele T25 și 2,5 ml pentru flacoanele T75. Lăsați celulele la incubare la temperatura camerei timp de 8-10 minute pentru a le detașa. După incubare, amestecați ușor celulele cu 10 ml de mediu pentru a le resuspenda, apoi centrifugați la 300xg timp de 3 minute. Aruncați supernatantul, resuspendați celulele în mediu proaspăt și transferați-le în flacoane noi care conțin deja mediu proaspăt.
Înghețați mediul	Ca mediu de crioconservare, folosim mediu de creștere complet (inclusiv FBS) + 10% DMSO pentru o viabilitate adecvată după dezghețare sau CM-1 (număr de catalog Cytion 800100), care include osmoprotectanți optimizați și stabilizatori metabolici pentru a spori recuperarea și a reduce stresul indus de criogenie.
Decongelarea și cultivarea celulelor	Confirmați că flaconul rămâne profund înghețat la livrare, deoarece celulele sunt expediate pe gheață carbonică pentru a menține temperaturi optime în timpul transportului. La primire, fie depozitați crioviola imediat la temperaturi sub -150 °C pentru a asigura păstrarea integrității celulare, fie treceți la etapa 3 dacă este necesară cultivarea imediată. Pentru cultivarea imediată, dezghețați rapid flaconul prin scufundarea acestuia într-o baie de apă la 37 °C cu apă curată și un agent antimicrobian, agitându-l ușor timp de 40-60 de secunde până când rămâne o mică aglomerare de gheață. Se efectuează toate etapele ulterioare în condiții sterile, într-o hotă cu flux, dezinfectând crioviola cu etanol 70% înainte de deschidere. Se deschide cu grijă flaconul dezinfectat și se transferă suspensia celulară într-un tub de centrifugare de 15 ml care conține 8 ml de mediu de cultură la temperatura camerei, amestecând ușor. Se centrifughează amestecul la 300 x g timp de 3 minute pentru a separa celulele și se aruncă cu grijă supernatantul care conține mediul de congelare rezidual. Se resuspendă ușor peletul celular în 10 ml de mediu de cultură proaspăt. Pentru celulele aderente, împărțiți suspensia între două flacoane de cultură T25; pentru culturile în suspensie, transferați tot mediul într-un flacon T25 pentru a promova interacțiunea și creșterea celulară eficientă. Respectați protocoalele de subcultură stabilite pentru creșterea și menținerea continuă a liniei celulare, asigurând rezultate experimentale fiabile.
Atmosfera de incubație	37°C, 5%_CO2, atmosferă umidificată.
Acoperirea flaconului	Niciuna
Procedura de congelare	Liniile celulare crioconservate sunt expediate pe gheață carbonică în ambalaje izolate, validate, cu suficient agent frigorific pentru a menține aproximativ -78 °C pe toată durata transportului. La primire, se inspectează imediat recipientul și se transferă fără întârziere fiolele în depozitul corespunzător.
Condiții de expediere	Liniile celulare crioconservate sunt expediate pe gheață carbonică în ambalaje izolate, validate, cu suficient agent frigorific pentru a menține aproximativ -78 °C pe toată durata transportului. La primire, se inspectează imediat recipientul și se transferă fără întârziere fiolele în depozitul corespunzător.
Condiții de depozitare	Pentru conservarea pe termen lung, flacoanele se plasează în azot lichid în fază de vapori la o temperatură cuprinsă între -150 și -196 °C. Păstrarea la -80 °C este acceptabilă doar ca o scurtă etapă intermediară înainte de transferul în azot lichid.

Sterilitate	Contaminarea cu micoplasmă este exclusă utilizând atât teste bazate pe PCR, cât și metode de detectare a micoplasmei bazate pe luminescență. Pentru a se asigura că nu există contaminare bacteriană, fungică sau de drojdie, culturile celulare sunt supuse unor inspecții vizuale zilnice.
Alele HLA	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Numărul lotului	Tip certificat	Data	Număr de catalog
300414-221	Certificat de analiză	23. May. 2025	300414

Dacă intenționați să utilizați liniile celulare Cytion exclusiv pentru cercetare internă într-un singur centru de cercetare, vă rugăm să completați și să semnați Acordul nostru de transfer de materiale (MTA) și să îl trimiteți împreună cu comanda dumneavoastră.

Pentru orice aplicații comerciale - inclusiv, dar fără a se limita la, lucrări contra cost, teste de control al calității, lansarea de produse, utilizare în scopuri diagnostice sau studii de reglementare - vă rugăm să completați Formularul de utilizare prevăzută, astfel încât să putem pregăti un acord adecvat, adaptat proiectului dumneavoastră.

Vă rugăm să rețineți: MTA se aplică numai anumitor linii celulare. Dacă această notificare și documentul MTA apar pe pagina unui produs, acordul este aplicabil. Pentru liniile celulare care nu sunt acoperite de MTA, nu va fi afișată nicio referință la acord. MTA nu este valabil pentru clienții din America, China sau Taiwan. Vă rugăm să contactați entitatea noastră din S.U.A. pentru a primi acordul corespunzător.

Celule Wilms3

Informații generale

Caracteristici

Date de reglementare

Date biomoleculare

Manipulare

Controlul calității / Profil genetic / HLA

Certificat de analiză (CoA)

Acord de transfer de materiale