SW-620-celler – Betydning for forskning og eksperimenter på tykktarmskreft
SW-620-celler utgjør den humane tykktarmskreftcellelinjen i Dukes stadium C. De har høyt tumorigenisk og metastatisk potensial. Derfor brukes de mye i kreft- og toksikologiske studier. Denne artikkelen vil utforske de grunnleggende aspektene ved tykktarmskreftcellelinjen SW-620.
- Vekstmedium
- DMEM-medium tilsatt 10 % føtalt bovint serum, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 og 1,0 mM natriumpyruvat brukes for optimal vekst av SW-620-celler. Mediet bør skiftes ut to ganger per uke.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for SW-620 varierer fra 20 til 26 timer.
- Veksttype
- SW-620-cellelinjen er vedheftende. Cellene danner monolag på overflaten av dyrkningsbeholderen.
- Biosikkerhetsnivå
- BSL-1
- Tilgjengelig fra
- Cytion — Bestill SW-620
Opprinnelse og generelle egenskaper ved SW-620-cellene
Opprinnelse og generelle egenskaper er den viktigste informasjonen om en cellelinje. Forhåndskunnskap om dette er avgjørende for forskere som vurderer å bruke den i sin forskning. Denne delen av artikkelen vil forklare de viktigste egenskapene og opprinnelsen til SW-620-cellelinjen. Hovedsakelig vil du lære: Hva er SW620-cellelinjen? Hva er egenskapene til SW-620-cellelinjen? Hva er opprinnelsen til SW-620? Hva er cellestørrelsen til SW-640? Og hva er forskjellen mellom SW-620 og SW-480?
- SW-620, en cellelinje for kolorektal karsinom, stammer fra en mediatisert lymfeknute-lesjon hos en 51 år gammel kaukasisk mann med adenokarsinom i tykktarmen [1]. Denne cellelinjen ble deponert av A. Leibovitz og kolleger.
- SW-620-cellene har en epitelial morfologi. De består også av små, runde og bipolare celler som ligner mikrovilli.
- SW-620-cellene har en diameter på 14,4 ± 0,3 μm.
- Disse tykktarmskreftcellene har en hyperdiploid karyotype. Det modale kromosomtall for SW-620-celler er 50, noe som kan variere fra 45 til 53.
SW-480 vs. SW-620
SW480 og SW620 er kolorektale kreftcellelinjer. SW-480 stammer fra en primærtumor, mens SW-620 ble etablert fra en metastasert lymfeknute. Videre skiller xenotransplantater utviklet fra disse cellelinjene seg fra hverandre. SW620-xenotransplantater danner lag av tumorceller, mens SW480-xenotransplantater danner kjertellignende strukturer [2]. Begge cellelinjene har identiske mutasjonsprofiler.
SW-620-celler: Informasjon om dyrking
Det er avgjørende å forstå de grunnleggende prinsippene for dyrking av en cellelinje, da dette kan føre til riktig håndtering og vedlikehold. I dette avsnittet nevnes noen viktige punkter for dyrking av SW-620 som kan hjelpe deg med å forstå: Hva er SW-620-mediet? Hva er doblingstiden for SW-620? Hvordan dyrker man SW-620-celler?
Viktige punkter for dyrking av SW-620-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for SW-620 varierer mellom 20 og 26 timer.
Adherent eller i suspensjon:
SW-620-cellelinjen er vedheftende. Cellene danner monolag på overflaten av dyrkningsbeholderen.
Subkultiveringsforhold:
SW-620-celler subkultiveres med et delingsforhold på 1:3. Adhærente celler skylles med fosfat-saltvannsbuffer (1X) uten magnesium og kalsium. Deretter tilsettes passasjeløsningen Accutase, og cellene inkuberes ved romtemperatur i 8 til 10 minutter. Ferskt medium tilsettes, og cellene sentrifugeres. Deretter resuspenderes de høstede cellene forsiktig i et vekstmedium og fordeles i nye kolber for vekst.
Vekstmedium:
DMEM-medium tilsatt 10 % føtalt bovint serum, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO₃ og 1,0 mM natriumpyruvat brukes for optimal vekst av SW-620-celler. Mediet bør skiftes ut to ganger per uke.
Vekstbetingelser:
SW-620-kolonkarsinomceller dyrkes i en fuktet inkubator ved 37 °C og med 5 % CO₂.
Oppbevaring:
Etter frysing oppbevares SW-620-cellene ved temperaturer under -150 °C i ultralavtemperaturfrysere eller i dampfasen av flytende nitrogen.
Fryseprosess og medium:
CM-1 eller CM-ACF er et ideelt frysemedium for SW-620-celler. Det benyttes en langsom fryseprosess for å fryse ned SW-620-celler. Denne prosessen tillater kun en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt, noe som dermed beskytter cellenes levedyktighet.
Tineprosess:
Frosne SW-620-celler tines i et vannbad som er forhåndsinnstilt til 37 °C i 40 til 60 sekunder. Etter tining tilsettes dyrkningsmedium, og cellene sentrifugeres for å fjerne elementer fra frysemediet. Deretter resuspenderes den oppnådde cellepelleten i et vekstmedium, og cellene helles over i en ny kolbe for vekst.
Biosikkerhetsnivå:
Det kreves et laboratorium med biosikkerhetsnivå 1 (BSL-1) for håndtering av SW-620-kulturer.
Fordeler ved SW-620-celler
Fordeler
- Modellering av tykktarmskreft: SW-620-celler fungerer som en viktig modell for tykktarmskreft, noe som muliggjør en grundig undersøkelse av svulst- og metastasemekanismer, særlig i xenotransplantasjonsmodeller.
- Kreftforskning og terapi: Disse cellene muliggjør utforskning av kreftbiologi, effekt av kjemoterapi og mekanismer for celledød, inkludert anoikis.
- CD133-ekspresjon: Ekspresjonen av CD133 i SW-620-celler gir innsikt i kreftstamcellebiologi og dens implikasjoner for tumorigenese og terapiresistens.
- Anvendelser innen strømningscytometri: Strømningscytometrianalyse av disse cellene muliggjør vurdering av cellepopulasjoner, apoptosenivåer og proliferasjon.
Forskningsanvendelser av SW-620-cellelinjen
Forskningsområdene der SW-620-celler har lovende anvendelsesmuligheter, er omtalt nedenfor:
- Kreftforskning: SW-620 er en uvurderlig cellemodell for å studere biologien bak tykktarmskreft. Forskere bruker denne in vitro-modellen til å utforske molekylære mekanismer som driver kreftcellers vekst, invasjon og migrasjon. Dessuten kan den brukes til å studere mutasjoner i SW620-cellelinjen, f.eks. p53, APC og KRAS. Forskning utført i 2021 undersøkte effekten av KRAS-mutasjonen i SW620-cellelinjen på følsomheten overfor et nytt legemiddel, FL118. De observerte at overekspresjon av KRAS øker den FL118-induserte apoptosen i kolorektale celler, mens inaktivering av genet reduserer den. Disse resultatene kan bidra til å forutsi bruken av FL118 hos pasienter med tykktarmskreft som har en KRAS-mutasjon [3].
- Legemiddelscreening og -utvikling: SW-620-cellelinjen brukes mye til å screene og teste potensielle legemiddelkandidater mot tykktarmskreft. Forskere bruker disse cellene til å evaluere cytotoksisiteten og effekten av legemidler, noe som kan føre til utvikling av målrettede behandlingsmetoder. For eksempel undersøkte en studie den kolorektale krefthemmende virkningen av enkelte essensielle oljekomponenter fra kanel og nellik ved hjelp av SW-620-cellelinjen [4].
- Metastasestudier: På grunn av det høye metastasepotensialet kan SW-620-celler brukes til å undersøke molekylære veier som ligger til grunn for kreftcellemetastaser. For eksempel fant Zhou Yang og hans kolleger at Grainy-head-like 2 (GRHL2)-genet spiller en rolle i utviklingen og metastaseringen av tykktarmskreft. De foreslo at GRHL2-genuttrykk hemmer utviklingen og metastaseringen av tykktarmskreft gjennom undertrykkelse av epitel-til-mesenkym-overgang (EMT) [5].
Sikre SW620-cellelinjen din
SW-620-celler: Publikasjoner
I denne delen vil vi se nærmere på noen interessante og ofte siterte forskningspublikasjoner om SW-620-cellene.
Denne studien, publisert i Molecular Carcinogenesis (2017), foreslo at behandlingen med polyfenolet urolithin A induserer autofagi i tykktarmskreftcellelinjen SW620. Den hemmet også kreftcellers metastasering.
Denne artikkelen i Oncology Letters (2018) undersøkte det antimetastatiske potensialet til tetrandrin, et bis-benzylisokinolinalkaloid, ved bruk av SW-620-celler.
CDCA3 fremmer celleproliferasjon ved å aktivere NF-κB/cyclin D1-signalveien i tykktarmskreft
Denne artikkelen er publisert i Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). Den foreslår at CDCA3-genet (Cell division cycle associated 3) er oppregulert i kolorektale kreftceller og fremmer deres proliferasjon ved å aktivere NF-κB-signalering.
En studie publisert i International Journal of Molecular Sciences (2021) undersøkte den synergistiske effekten av et bispesifikt antistoff (ABL001) og kjemoterapeutiske legemidler på tumorprogresjon i SW620-xenotransplantat.
Denne artikkelen er publisert i tidsskriftet Cells (2018). Her ble Bacopa monnieri-ekstraktet, Bacopaside II, undersøkt med hensyn til antitumoraktivitet i SW-620-celler og andre kolorektale kreftceller.
Ressurser for SW-620-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
Følgende er noen nettressurser som omhandler SW-620-tykktarmskreftcellene.
- SW-620-transfeksjon: Denne artikkelen beskriver kort protokollen for stabil transfeksjon av SW-620-cellelinjen.
Følgende lenke inneholder protokollen for SW620-cellekultur.
- SW-620-cellekulturprotokoll: Denne lenken gir grunnleggende informasjon om SW-620-cellelinjen. Den vil også hjelpe deg med å lære protokollen for subkultivering av SW-620-celler og håndtering av kryokonserverte og prolifererende SW620-kulturer.
- Protokoller for cellekultur: Denne videoen er en utmerket kilde for å lære seg protokoller for passering, frysing og tining av adherente celler.
Ofte stilte spørsmål om SW620-celler
SW620-celler er humane kolorektale adenokarsinomceller fra lymfeknutemetastaser fra en pasient med tykktarmskreft, noe som gjør dem viktige for kreftforskningen.
SW620-celler har vanligvis en diameter på mellom 15 og 30 mikrometer, selv om dette kan variere avhengig av dyrkingsforholdene.
SW620-celler har flere mutasjoner, blant annet i TP53-genet. Disse mutasjonene kan påvirke cellenes morfologi, noe som fører til ulike former og størrelser i populasjonen.
SW620- og SW480-celler stammer begge fra adenokarsinomer i tykktarmen, men SW620-celler kommer fra et metastatisk område, mens SW480-celler stammer fra primærsvulsten. Denne forskjellen kan påvirke cellenes genetiske sammensetning, oppførsel i kultur og respons på behandling.
SW620-celler er viktige i studier av tumorigenese, særlig på grunn av deres evne til å danne svulster i xenotransplanterte musemodeller og deres uttrykk for kreftstamcellemarkører som CD133.
Ja, SW620-celler brukes til å studere celledødsveier, inkludert apoptose og anoikis, og hvordan de reagerer på ulike kreftbehandlinger og miljøforhold.
SW620-cellenes høye metastatiske potensial og deres opprinnelse fra en metastatisk lymfeknute gjør dem til en relevant modell for å studere spredning av tykktarmskreft.
Ved hjelp av flowcytometri kan forskerne analysere egenskapene til SW620-celler, blant annet CD133-ekspresjonsmønstre og graden av apoptose eller følsomhet for anoikis.
SW620-celler har et høyt tumorgenetisk potensial når de introduseres i immundefekte xenograftmusmodeller, noe som gjør dem verdifulle for in vivo-studier av kreftutvikling.
Referanser
- Siekmann, W., et al., Effekt av lidokain og ropivakain på primære (SW480) og metastatiske (SW620) tykktarmskreftcellelinjer. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395-401.
- Hewitt, R.E., et al., Validering av en modell for utvikling av tykktarmskreft. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446–54.
- Thangaiyan, R., et al., Kras-mutasjonssubtyper påvirker tydelig følsomheten til kolorektalcellekreft overfor FL118, en ny hemmer av survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 og MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
- Petrocelli, G., et al., Molekyler som finnes i essensielle oljer fra planter for forebygging og behandling av tykktarmskreft (CRC). Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
- Yang, Z., et al., GRHL2 hemmer progresjon og metastasering av tykktarmskreft ved å undertrykke epitel-mesenkymal overgang. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195–1205.