RBL-2H3-celler – Betydningen av RBL-2H3 i allergiske reaksjoner og immunologiske studier
RBL-2H3-cellelinjen er en basofil leukemi-cellelinje avledet fra rotte som brukes i immunologisk forskning. Den fungerer som et modellsystem for å studere mastcellers fysiologi, atferd og funksjoner. Disse cellene brukes også til å studere allergiske reaksjoner, immunologiske prosesser samt legemiddeltesting og -utvikling.
- Vekstmedium
- EMEM-medium som inneholder 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ og EBSS-salt brukes til å dyrke RBL-2H3-cellene. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for RBL-2H3-mastcellene er omtrent 50–60 timer.
- Veksttype
- RBL-2H3 er en vedheftende cellelinje.
- Biosikkerhetsnivå
- BSL-2
- Tilgjengelig fra
- Cytion — Bestill RBL-2H3
- RBL-2H3-celler: Opprinnelse og generelle egenskaper
- RBL-2H3-celler: Informasjon om dyrking
- Fordeler og begrensninger ved RBL-2H3-basofilcellelinjen
- RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnestein i immunologisk forskning
- RBL-2H3-cellelinjen: Viktige spørsmål og svar for forskere
- Referanser
- RBL-2H3-cellelinjen for avansert immunologisk forskning
- RBL-2H3-celler: Forskningspublikasjoner
- Ressurser for RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
- Ofte stilte spørsmål
RBL-2H3-celler: Opprinnelse og generelle egenskaper
Før du bruker en basofilcellelinje i forskningen din, bør du kjenne til dens opprinnelse og generelle egenskaper. Denne delen av artikkelen gir deg grunnleggende informasjon om RBL-2H3-celler. For eksempel: Hva er RBL-2H3-mastceller? Hvorfor bruke RBL-2H3-celler? Hva er RBL-2H3-celler i basofil leukemi hos rotter? Hva er RBL-2H3-morfologien? Er RBL-2H3-celler udødelige?
- RBL-2H3 er basofile leukemiceller som ble isolert fra basofile celler fra Wistar-rotter i 1978 ved National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- RBL-2H3-celler har c-kit-reseptortyrosinkinase og mastcelleprotease II (RMCP-II)-reseptorer, noe som gjør dem til en potensiell mastcellemodell. Derfor kalles de ofte mastceller til tross for at de stammer fra basofiler fra rotter [1].
- De frigjør histamin og andre mediatorer ved aktivering og uttrykker IgE-reseptorer med høy affinitet.
- RBL-2H3-celler har en fibroblastlignende morfologi.
RBL-2H3-celler: Informasjon om dyrking
Denne delen vil hjelpe deg med å lære noen viktige aspekter ved dyrking av RBL-2H3-cellelinjen. Du vil få vite: Hva er doblingstiden for RBL-2H3-celler? Hva er utsåingstettheten for RBL-2H3-celler? Hva er dyrkingsprotokollen for RBL-2H3-celler? Hva er frysemediet for RBL-2H3-cellelinjen?
Viktige punkter for dyrking av RBL-2H3-celler
Doblingstid for populasjonen:
Fordoblingstiden for RBL-2H3-mastceller er omtrent 50–60 timer.
Adhærent eller i suspensjon:
RBL-2H3 er en vedheftende cellelinje.
Subkultiveringsforhold:
For RBL-2H3-celler holdes subkultiveringsforholdet mellom 1:2 og 1:4. Adhærente celler vaskes med magnesium- og kalsiumfri 1 x PBS-løsning. Passasjeløsning Accutase tilsettes, og cellene holdes ved romtemperatur i 10 minutter for å løsne fra bunnen av dyrkningsbeholderen. Ferskt medium tilsettes, og cellene sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes forsiktig i ferskt medium og helles over i nye kolber som inneholder vekstmedium.
Vekstmedium:
EMEM-medium som inneholder 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ og EBSS-salt brukes til å dyrke RBL-2H3-cellene. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke.
Vekstbetingelser:
RBL-2H3-celler dyrkes i en fuktet inkubator innstilt på 37 °C og koblet til en 5 % CO₂-kilde.
Oppbevaring:
Cellene oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk fryser for å sikre cellenes levedyktighet på lang sikt.
Fryseprosess og medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysemedier brukes til å fryse RBL-2H3-celler ved hjelp av en langsom fryseprosess. Kort fortalt tillater denne metoden en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt og beskytter cellene mot sjokk.
Tineprosess:
RBL-2H3-cellene tines i et forhåndsinnstilt vannbad (37 °C) i omtrent 60 sekunder. Deretter tilsettes cellene til ferskt dyrkningsmedium og sentrifugeres. Dette trinnet er avgjørende for å fjerne komponenter fra frysemediet. Deretter resuspenderes cellepelleten i et vekstmedium, og cellene overføres til en kolbe for dyrking.
Biosikkerhetsnivå:
RBL-2H3-cellene skal oppbevares i laboratorier med biosikkerhetsnivå 1.
Publisert: 2023 | Sist oppdatert: mai 2026
Fordeler og begrensninger ved RBL-2H3-basofilcellelinjen
RBL-2H3-celler brukes ofte i immunologisk forskning. Dette avsnittet beskriver de viktigste fordelene og begrensningene ved disse cellene.
Fordeler
- Enkel å dyrke: RBL-2H3-celler kan enkelt dyrkes og opprettholdes i laboratoriemiljøet. Dette muliggjør kostnadseffektive og reproduserbare eksperimenter, noe som gjør dem til et populært valg for innledende studier innen immunologi.
Begrensninger
- Ikke-menneskelig opprinnelse: Siden RBL-2H3-cellene stammer fra basofiler fra rotter, etterligner de kanskje ikke menneskelige biologiske prosesser nøyaktig, noe som kan begrense deres anvendelighet i menneskespesifikke forskningsstudier. Dette krever en forsiktig tolkning av dataene når resultatene skal ekstrapoleres til menneskelige systemer.
- Forenklet mastcellemodell: Selv om disse cellene utgjør en grunnleggende modell for å studere mastcellefunksjoner, gjenspeiler de ikke fullt ut den komplekse naturen til mastcelleinteraksjoner i det menneskelige immunsystemet. Følgelig kan de kanskje ikke på en tilstrekkelig måte modellere mastcellers mangesidige roller i immunresponser eller sykdomstilstander in vivo.
RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnestein i immunologisk forskning
Forskning på basofiler og mastceller ved bruk av RBL-2H3-cellelinjen
RBL-2H3-cellelinjen, avledet fra Rattus norvegicus, fungerer som en sentral modell for å studere biologien til basofiler og mastceller. Disse mastcellene fra rotter gir viktig innsikt i frigjøring av mastcellemediatorer, noe som er avgjørende for å forstå allergiske tilstander som allergisk rhinitt. Gjennom disse cellene utforsker forskere dynamikken i cellereceptorer og etableringen av immunologiske synapser, som er sentrale for immunsystemets respons på allergener. En interessant studie publisert i 2019 benyttet RBL-2H3-cellelinjen og undersøkte mekanismene bak pseudoallergiske reaksjoner fremkalt av Qingkailing-injeksjon. Studien fant at PI3K-RAC1-signalkaskaden delvis utløser denne allergiske responsen i cellene [2].
Dynamikken i immunologiske synapser i allergiforskning
RBL-2H3-celler brukes i stor utstrekning i immunologisk forskning og er spesielt effektive for å undersøke dynamikken i immunologiske synapser. Dette bidrar til å belyse kommunikasjonsprosessene i immunsystemet, med anvendelser i studier av både mastceller i perifert blod og peritoneale mastceller. Slik forskning er avgjørende for en helhetlig forståelse av immunresponsen både i systemiske og lokaliserte sammenhenger.
Legemiddelscreening og toksisitetsprøving
Ved legemiddelscreening og -testing utnyttes RBL-cellenes respons på ulike stimuli, blant annet for å studere hvordan H₂O₂ hemmer IgE-medierte responser. Disse cellene spiller en avgjørende rolle i utviklingen av behandlinger for sykdommer som streptokokkinfeksjoner, der streptokokker av mitis-gruppen hemmer mastcelleaktivering. I tillegg vurderer forskere de toksiske effektene av ulike stoffer, inkludert kjemikalier, legemidler og nanopartikler, ved hjelp av denne RBL 2H3-mc-modellen. For eksempel vurderte en nylig studie (2022) cytotoksisiteten til polystyrenmikroplast på RBL-2H3-celler. De fant at mikroplast skader organellene i RBL-2H3-cellene og fremmer celledød [3]. En annen studie fra 2021 vurderte det antiallergiske og antiinflammatoriske potensialet til et naturprodukt, neferin, ved hjelp av RBL-2H3 mc-modellen. Studien avdekket forbindelsens gode antiallergiske og antiinflammatoriske egenskaper [4].
Avanserte metoder for immunologisk måling
Den konsistente og målbare frigjøringen av mediatorer fra RBL-2H3-celler gjør dem ideelle for praktisk fluorometri, noe som muliggjør presise og nøyaktige målinger som er avgjørende for sykdomsforskning og vurdering av terapeutiske midler.
RBL-2H3-cellelinjen, som stammer fra Rattus norvegicus, er en uvurderlig ressurs både i grunnleggende og anvendt forskning innen immunologi. Den gir store muligheter for å fremme vår kunnskap om og behandling av immunologiske sykdommer.
RBL-2H3-cellelinje for avansert immunologisk forskning
RBL-2H3-celler: Forskningspublikasjoner
Her følger noen spennende forskningspublikasjoner som omhandler RBL-2H3-mastcellene:
Narirutins hemmende virkning på degranulering av RBL-2H3-celler
Denne forskningsartikkelen ble publisert i tidsskriftet Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Studien antydet at narirutin, et naturlig stoff, har en hemmende effekt på degranulering av RBL-2H3-celler ved å regulere NF-κB, MAPK og tyrosinkinase-signalveien.
Denne studien, publisert i International Journal of Molecular Sciences (2020), antydet at apigenin i betydelig grad demper allergiske og inflammatoriske responser hos RBL-2H3- og RAW264.7-celler. Derfor kan det fungere som et potensielt middel for å bekjempe immunrelaterte sykdommer.
Denne forskningsartikkelen i International Journal of Molecular Sciences (2021) vurderte de antiallergiske og antiinflammatoriske effektene av et naturprodukt, saponarin, ved bruk av ulike cellelinjer, inkludert RBL-2H3.
Denne studien, publisert i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014), fant at ekstrakter av Benchalokawichian og enkelte aktive bestanddeler utøver potensielle hemmende effekter på frigjøring av β-heksosaminidase fra RBL-2H3-celler.
Denne artikkelen ble publisert i 2018 i tidsskriftet *International Journal of Biological Macromolecules*. Studien konkluderte med at spirulina maxima, et naturprodukt, hemmer degranulering av RBL 2H3 ved å forhindre fosforylering av MAPKs og AKT.
Ressurser for RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
RBL-2H3 er en mye brukt mastcellelinje. Her nevnes tilgjengelige ressurser som omhandler protokoller for dyrking og transfeksjon av RBL-2H3:
- RBL-2H3 MC-modell: Denne forskningsartikkelen inneholder protokoller for vedlikehold av RBL-2H3-kulturer og for transfeksjon av RBL-2H3.
Her er noen ressurser som forklarer protokollen for RBL-2H3-cellekultur:
- RBL-2H3-celler: Dette nettstedet er nyttig for å lære seg cellekulturprotokoller for RBL-2H3-cellelinjen. I tillegg inneholder det informasjon om RBL-2H3-cellemedier og dyrkingsbetingelser.
RBL-2H3-cellelinje: Viktige spørsmål og svar for forskere
RBL-2H3-celler er en cellelinje som opprinnelig stammer fra basofil leukemi hos rotter, og som ofte brukes som modell for å studere mastcellenes biologi, særlig i forbindelse med allergiske reaksjoner og immunologisk forskning. Disse cellene er verdifulle for å analysere frigjøring av basofile og mastcellemediatorer, cellereseptordynamikk og dannelsen av immunologiske synapser.
Ja, ved aktivering er RBL-2H3-celler kjent for å frigjøre histamin og andre inflammatoriske mediatorer. Denne egenskapen gjør dem svært nyttige for studier knyttet til allergiske reaksjoner, ettersom histaminfrigjøring er et sentralt trekk ved allergiske reaksjoner og inflammatoriske prosesser.
Doblingstiden for RBL-2H3-celler varierer avhengig av dyrkingsforholdene, men ligger vanligvis på rundt 24 til 36 timer. Optimale vekstforhold som temperatur, pH og næringstilgang kan imidlertid påvirke fordoblingstiden.
Selv om RBL-2H3-celler stammer fra rotter, og det er iboende forskjeller mellom artene, er de fortsatt mye brukt som modell for å studere mekanismer som er relevante for allergiske reaksjoner hos mennesker. Resultater fra RBL-2H3-cellestudier bør imidlertid tolkes med forsiktighet når de ekstrapoleres til humane systemer.
H2O2, eller hydrogenperoksid, har vist seg å hemme IgE-mediert degranulering i RBL-2H3-celler. Denne effekten er viktig for forskere som studerer moduleringen av allergiske reaksjoner på cellenivå.
Ja, RBL-2H3-celler brukes i stor utstrekning til screening av legemidler, spesielt for stoffer som er rettet mot allergiske og inflammatoriske signalveier. De brukes til å evaluere effekten og sikkerheten til potensielle terapeutiske midler, samt deres antiallergiske og antiinflammatoriske egenskaper.
Referanser
- Passante, E. og N. Frankish, RBL-2H3-cellelinjen: dens opprinnelse og egnethet som modell for mastceller. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudoallergisk reaksjon forårsaket av Qingkailing-injeksjon, delvis via PI3K-Rac1-signalveien i RBL-2H3-celler. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353–360.
- Liu, L., et al., Mikro- (nano-)plast av polystyren skader organellene i RBL-2H3-celler og fremmer MOAP-1 for å indusere apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Antiallergiske og antiinflammatoriske effekter av neferin på RBL-2H3-celler. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.