RBL-2H3-celler – Betydningen av RBL-2H3 i allergiske reaksjoner og immunologiske studier
RBL-2H3-cellelinjen er en basofil leukemi-cellelinje avledet fra rotte som brukes i immunologisk forskning. Den fungerer som et modellsystem for å studere mastcellers fysiologi, atferd og funksjoner. Disse cellene brukes også til å studere allergiske reaksjoner, immunologiske prosesser samt legemiddeltesting og -utvikling.
- Vekstmedium
- EMEM-medium som inneholder 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ og EBSS-salt brukes til å dyrke RBL-2H3-cellene. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for RBL-2H3-mastcellene er omtrent 50–60 timer.
- Veksttype
- RBL-2H3 er en vedheftende cellelinje.
- Biosikkerhetsnivå
- BSL-2
- Tilgjengelig fra
- Cytion — Bestill RBL-2H3
- RBL-2H3-celler: Opprinnelse og generelle egenskaper
- RBL-2H3-celler: Informasjon om dyrking
- Fordeler og begrensninger ved RBL-2H3-basofilcellelinjen
- RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnestein i immunologisk forskning
- RBL-2H3-cellelinjen: Viktige spørsmål og svar for forskere
- Referanser
- RBL-2H3-cellelinjen for avansert immunologisk forskning
- RBL-2H3-celler: Forskningspublikasjoner
- Ressurser for RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
- Ofte stilte spørsmål
RBL-2H3-celler: Opprinnelse og generelle egenskaper
Før du bruker en basofilcellelinje i forskningen din, bør du kjenne til dens opprinnelse og generelle egenskaper. Denne delen av artikkelen gir deg grunnleggende informasjon om RBL-2H3-celler. For eksempel: Hva er RBL-2H3-mastceller? Hvorfor bruke RBL-2H3-celler? Hva er RBL-2H3-celler i basofil leukemi hos rotter? Hva er RBL-2H3-morfologien? Er RBL-2H3-celler udødelige?
- RBL-2H3 er basofile leukemiceller som ble isolert fra basofile celler fra Wistar-rotter i 1978 ved National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- RBL-2H3-celler har c-kit-reseptortyrosinkinase og mastcelleprotease II (RMCP-II)-reseptorer, noe som gjør dem til en potensiell mastcellemodell. Derfor kalles de ofte mastceller til tross for at de stammer fra basofiler fra rotter [1].
- De frigjør histamin og andre mediatorer ved aktivering og uttrykker IgE-reseptorer med høy affinitet.
- RBL-2H3-celler har en fibroblastlignende morfologi.
RBL-2H3-celler: Informasjon om dyrking
Denne delen vil hjelpe deg med å lære noen viktige aspekter ved dyrking av RBL-2H3-cellelinjen. Du vil få vite: Hva er doblingstiden for RBL-2H3-celler? Hva er utsåingstettheten for RBL-2H3-celler? Hva er dyrkingsprotokollen for RBL-2H3-celler? Hva er frysemediet for RBL-2H3-cellelinjen?
Viktige punkter for dyrking av RBL-2H3-celler
Doblingstid for populasjonen:
Fordoblingstiden for RBL-2H3-mastceller er omtrent 50–60 timer.
Adhærent eller i suspensjon:
RBL-2H3 er en vedheftende cellelinje.
Subkultiveringsforhold:
For RBL-2H3-celler holdes subkultiveringsforholdet mellom 1:2 og 1:4. Adhærente celler vaskes med magnesium- og kalsiumfri 1 x PBS-løsning. Passasjeløsning Accutase tilsettes, og cellene holdes ved romtemperatur i 10 minutter for å løsne fra bunnen av dyrkningsbeholderen. Ferskt medium tilsettes, og cellene sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes forsiktig i ferskt medium og helles over i nye kolber som inneholder vekstmedium.
Vekstmedium:
EMEM-medium som inneholder 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ og EBSS-salt brukes til å dyrke RBL-2H3-cellene. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke.
Vekstbetingelser:
RBL-2H3-celler dyrkes i en fuktet inkubator innstilt på 37 °C og koblet til en 5 % CO₂-kilde.
Oppbevaring:
Cellene oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk fryser for å sikre cellenes levedyktighet på lang sikt.
Fryseprosess og medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysemedier brukes til å fryse RBL-2H3-celler ved hjelp av en langsom fryseprosess. Kort fortalt tillater denne metoden en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt og beskytter cellene mot sjokk.
Tineprosess:
RBL-2H3-cellene tines i et forhåndsinnstilt vannbad (37 °C) i omtrent 60 sekunder. Deretter tilsettes cellene til ferskt dyrkningsmedium og sentrifugeres. Dette trinnet er avgjørende for å fjerne komponenter fra frysemediet. Deretter resuspenderes cellepelleten i et vekstmedium, og cellene overføres til en kolbe for dyrking.
Biosikkerhetsnivå:
RBL-2H3-cellene skal oppbevares i laboratorier med biosikkerhetsnivå 1.
Publisert: 2023 | Sist oppdatert: mai 2026
Fordeler og begrensninger ved RBL-2H3-basofilcellelinjen
RBL-2H3-celler brukes ofte i immunologisk forskning. Dette avsnittet beskriver de viktigste fordelene og begrensningene ved disse cellene.
Fordeler
- Enkel å dyrke: RBL-2H3-celler kan enkelt dyrkes og opprettholdes i laboratoriemiljøet. Dette muliggjør kostnadseffektive og reproduserbare eksperimenter, noe som gjør dem til et populært valg for innledende studier innen immunologi.
Begrensninger
- Ikke-menneskelig opprinnelse: Siden RBL-2H3-cellene stammer fra basofiler fra rotter, etterligner de kanskje ikke menneskelige biologiske prosesser nøyaktig, noe som kan begrense deres anvendelighet i menneskespesifikke forskningsstudier. Dette krever en forsiktig tolkning av dataene når resultatene skal ekstrapoleres til menneskelige systemer.
- Forenklet mastcellemodell: Selv om disse cellene utgjør en grunnleggende modell for å studere mastcellefunksjoner, gjenspeiler de ikke fullt ut den komplekse naturen til mastcelleinteraksjoner i det menneskelige immunsystemet. Følgelig kan de kanskje ikke på en tilstrekkelig måte modellere mastcellers mangesidige roller i immunresponser eller sykdomstilstander in vivo.
RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnestein i immunologisk forskning
Forskning på basofiler og mastceller ved bruk av RBL-2H3-cellelinjen
RBL-2H3-cellelinjen, avledet fra Rattus norvegicus, fungerer som en sentral modell for å studere biologien til basofiler og mastceller. Disse mastcellene fra rotter gir viktig innsikt i frigjøring av mastcellemediatorer, noe som er avgjørende for å forstå allergiske tilstander som allergisk rhinitt. Gjennom disse cellene utforsker forskere dynamikken i cellereceptorer og etableringen av immunologiske synapser, som er sentrale for immunsystemets respons på allergener. En interessant studie publisert i 2019 benyttet RBL-2H3-cellelinjen og undersøkte mekanismene bak pseudoallergiske reaksjoner fremkalt av Qingkailing-injeksjon. Studien fant at PI3K-RAC1-signalkaskaden delvis utløser denne allergiske responsen i cellene [2].
Dynamikken i immunologiske synapser i allergiforskning
RBL-2H3-celler brukes i stor utstrekning i immunologisk forskning og er spesielt effektive for å undersøke dynamikken i immunologiske synapser. Dette bidrar til å belyse kommunikasjonsprosessene i immunsystemet, med anvendelser i studier av både mastceller i perifert blod og peritoneale mastceller. Slik forskning er avgjørende for en helhetlig forståelse av immunresponsen både i systemiske og lokaliserte sammenhenger.
Legemiddelscreening og toksisitetsprøving
Ved legemiddelscreening og -testing utnyttes RBL-cellenes respons på ulike stimuli, blant annet for å studere hvordan H₂O₂ hemmer IgE-medierte responser. Disse cellene spiller en avgjørende rolle i utviklingen av behandlinger for sykdommer som streptokokkinfeksjoner, der streptokokker av mitis-gruppen hemmer mastcelleaktivering. I tillegg vurderer forskere de toksiske effektene av ulike stoffer, inkludert kjemikalier, legemidler og nanopartikler, ved hjelp av denne RBL 2H3-mc-modellen. For eksempel vurderte en nylig studie (2022) cytotoksisiteten til polystyrenmikroplast på RBL-2H3-celler. De fant at mikroplast skader organellene i RBL-2H3-cellene og fremmer celledød [3]. En annen studie fra 2021 vurderte det antiallergiske og antiinflammatoriske potensialet til et naturprodukt, neferin, ved hjelp av RBL-2H3 mc-modellen. Studien avdekket forbindelsens gode antiallergiske og antiinflammatoriske egenskaper [4].
Avanserte metoder for immunologisk måling
Den konsistente og målbare frigjøringen av mediatorer fra RBL-2H3-celler gjør dem ideelle for praktisk fluorometri, noe som muliggjør presise og nøyaktige målinger som er avgjørende for sykdomsforskning og vurdering av terapeutiske midler.
RBL-2H3-cellelinjen, som stammer fra Rattus norvegicus, er en uvurderlig ressurs både i grunnleggende og anvendt forskning innen immunologi. Den gir store muligheter for å fremme vår kunnskap om og behandling av immunologiske sykdommer.
RBL-2H3-cellelinje for avansert immunologisk forskning
RBL-2H3-celler: Forskningspublikasjoner
Her følger noen spennende forskningspublikasjoner som omhandler RBL-2H3-mastcellene:
Narirutins hemmende virkning på degranulering av RBL-2H3-celler
Denne forskningsartikkelen ble publisert i tidsskriftet Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Studien antydet at narirutin, et naturlig stoff, har en hemmende effekt på degranulering av RBL-2H3-celler ved å regulere NF-κB, MAPK og tyrosinkinase-signalveien.
Denne studien, publisert i International Journal of Molecular Sciences (2020), antydet at apigenin i betydelig grad demper allergiske og inflammatoriske responser hos RBL-2H3- og RAW264.7-celler. Derfor kan det fungere som et potensielt middel for å bekjempe immunrelaterte sykdommer.
Denne forskningsartikkelen i International Journal of Molecular Sciences (2021) vurderte de antiallergiske og antiinflammatoriske effektene av et naturprodukt, saponarin, ved bruk av ulike cellelinjer, inkludert RBL-2H3.
Denne studien, publisert i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014), fant at ekstrakter av Benchalokawichian og enkelte aktive bestanddeler utøver potensielle hemmende effekter på frigjøring av β-heksosaminidase fra RBL-2H3-celler.
Denne artikkelen ble publisert i 2018 i tidsskriftet *International Journal of Biological Macromolecules*. Studien konkluderte med at spirulina maxima, et naturprodukt, hemmer degranulering av RBL 2H3 ved å forhindre fosforylering av MAPKs og AKT.
Ressurser for RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
RBL-2H3 er en mye brukt mastcellelinje. Her nevnes tilgjengelige ressurser som omhandler protokoller for dyrking og transfeksjon av RBL-2H3:
- RBL-2H3 MC-modell: Denne forskningsartikkelen inneholder protokoller for vedlikehold av RBL-2H3-kulturer og for transfeksjon av RBL-2H3.
Her er noen ressurser som forklarer protokollen for RBL-2H3-cellekultur:
- RBL-2H3-celler: Dette nettstedet er nyttig for å lære seg cellekulturprotokoller for RBL-2H3-cellelinjen. I tillegg inneholder det informasjon om RBL-2H3-cellemedier og dyrkingsbetingelser.
RBL-2H3-cellelinje: Viktige spørsmål og svar for forskere
Referanser
- Passante, E. og N. Frankish, RBL-2H3-cellelinjen: dens opprinnelse og egnethet som modell for mastceller. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudoallergisk reaksjon forårsaket av Qingkailing-injeksjon, delvis via PI3K-Rac1-signalveien i RBL-2H3-celler. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353–360.
- Liu, L., et al., Mikro- (nano-)plast av polystyren skader organellene i RBL-2H3-celler og fremmer MOAP-1 for å indusere apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Antiallergiske og antiinflammatoriske effekter av neferin på RBL-2H3-celler. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.