Gå til hjemmesiden

MG-63-cellelinjen: En detaljert veiledning om MG-63-celler i forskning på osteosarkom

MG-63-celler er fibroblastlignende humane osteosarkomceller som gir et bredt spekter av forskningsanvendelser innen det biomedisinske feltet. Dette kan omfatte studier av beinrelaterte prosesser som beinutvikling, differensiering osv. I tillegg fungerer MG-63-cellelinjen som en egnet in vitro-modell for å studere beincellers levedyktighet, proliferasjon og adhesjon.

Generelle egenskaper og opprinnelse til MG-63-cellelinjen

Denne delen av artikkelen vil omhandle opprinnelsen og de generelle egenskapene til MG-63-cellelinjen. Du vil lære: Hva er MG-63-cellelinjen? Hva er opprinnelsen til MG-63-cellelinjen? Hva er morfologien til MG-63-celler? Hva er størrelsen på MG-63-cellene?

  • MG-63 er en type osteoblastcellelinje som stammer fra beinet til en 14 år gammel mannlig osteosarkompasient (kaukasisk). A. Billiau og kolleger deponerte denne cellelinjen i 1977.
  • MG-63-cellelinjen har en morfologi som ligner på fibroblastceller.
  • Humane osteosarkomceller (MG-63) viser hypotriploidi. Det modale kromosomtall for disse cellene er 66, noe som forekommer hos omtrent 44 % av cellepopulasjonen. Høyere ploidier er også rapportert hos nesten 2 % av cellepopulasjonen. I tillegg forekommer 18–19 markørkromosomer i store mengder i alle cellene.

SEM-bilder av en sarkomcellekultur.

Informasjon om dyrking av MG-63-cellelinjen

Viktig informasjon om kravene til dyrking av cellelinjer kan gjøre jobben din enklere. Denne delen av artikkelen lister opp alle de viktigste punktene som er avgjørende for dyrking og vedlikehold av MG-63-celler. Her vil du lære: Hva er doblingstiden for MG-63-celler? Hvilket vekstmedium brukes til MG-63-celler? Hva er utsåingstettheten for MG-63-celler?

Viktige punkter for dyrking av MG-63-celler

Fordoblingstid

Fordoblingstiden for MG-63-celler varierer mellom 28 og 38 timer, avhengig av dyrkingsforholdene.

Vekstegenskaper

MG-63 er en vedheftende cellelinje.

Utsåingstetthet

En celletetthet på 1 x 104 celler/cm2 anbefales for MG-63-celler. Adhærente celler vaskes med 1 x fosfatbuffersaltvann (PBS) uten magnesium og kalsium. Deretter inkuberes cellene med dissosiasjonsløsning (Accutase), tilsettes ferskt medium og sentrifugeres. Den oppsamlede cellepelleten resuspenderes i ferskt medium og overføres til en ny kolbe for videre vekst.

Vekstmedium

DMEM- eller Ham's F12-medier brukes til å dyrke MG-63-celler. Disse mediene kan tilsettes 5 % føtalt bovint serum (FBS), 3,0 g/L glukose, 2,5 mM L-glutamin og 1,2 g/L NaHCO₃ for optimal cellevekst. Mediet bør skiftes ut 2–3 ganger per uke.

Vekstbetingelser

En fuktet inkubator ved 37 °C og en CO₂-tilførsel på 5 % er nødvendig for å dyrke MG-63-celler.

Oppbevaring

Disse osteoblastlignende cellene kan oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller ved temperaturer under –150 °C for å opprettholde cellenes levedyktighet.

Fryseprosess og medium

CM-1- eller CM-ACF-medier brukes til frysing av MG-63-celler. Det anbefales generelt en langsom fryseprosess for å forhindre at cellene utsettes for sjokk og for å beskytte deres levedyktighet.

Tineprosess

Frosne celler inkuberes i 40 til 60 sekunder i et forvarmet vannbad (37 grader Celsius). Cellene resuspenderes i ferskt vekstmedium og helles over i en ny kolbe. Etter 24 timers inkubasjon skiftes mediet ut for å fjerne komponenter fra frysemediet.  

Biosikkerhetsnivå

Laboratoriemiljø med biosikkerhetsnivå 1 er nødvendig for håndtering og vedlikehold av MG-63-kulturer.

MG 63 cells

MG-63-celler før og etter at de har nådd konfluens.

MG-63-cellelinjen: Fordeler og ulemper

MG-63 er en mye brukt osteoblastcellelinje. Den har flere fordeler og ulemper. Her vil vi nevne noen av de viktigste fordelene og ulempene ved MG-63-cellelinjen.

Fordeler

Fordelene med MG-63-cellene er:

  • Osteoblastlignende egenskaper

    MG-63-cellelinjen har osteoblastlignende egenskaper, noe som gjør den egnet til å studere beinrelaterte prosesser og sykdommer. Den kan også brukes til å undersøke celleadhesjon, proliferasjon og levedyktighet på titanoverflater [1].

  • Egnethet for transfeksjon

    MG-63-celler brukes i stor utstrekning i transfeksjonsstudier, noe som muliggjør forskning på genuttrykk, funksjon og cellulære prosesser.

  • Høy interferonproduksjon

    MG-63-celler er i stand til å produsere høye nivåer av interferon. De kan gi 3,7 ganger høyere interferonutbytte per cm² enn diploide fibroblaster når de induseres med cykloheksimid, polyinosinsyre-polycytidylsyre og aktinomycin [2].

Ulemper

Ulempene ved MG-63 B-celler er:

  • Heterogenitet

    MG-63-celler viser heterogenitet innenfor cellepopulasjonen, noe som kan påvirke reproduserbarheten.

  • Tumorcellelinje

    MG-63 er en kreftcellelinje og representerer kanskje ikke fullt ut normal celleatferd og fysiologi, noe som begrenser anvendelsen i visse laboratorieeksperimenter.

Bestill MG-63-cellene dine i dag

Anvendelser av MG-63-celler

MG-63-celler er et utmerket forskningsverktøy. De gir mange lovende anvendelsesmuligheter innen forskningsfeltet. Her er noen av de viktigste forskningsanvendelsene av MG-63-celler.

  • Studier av beinrelaterte prosesser/sykdommer: MG-63-celler er osteoblastlignende (beindannende) celler. Derfor brukes disse cellene i stor utstrekning til å studere beinsykdommer og cellulære prosesser, inkludert utvikling, differensiering og mineralisering. I tillegg brukes cellene i stor utstrekning til å screene legemidler som fremmer beinheling. I en studie ble MG-63-celler brukt til å undersøke det terapeutiske potensialet til grønn-syntetiserte sinkoksid-nanopartikler fra Scutellaria baicalensis på beincellers proliferasjon, mineralisering og differensiering [3].
  • Kreftforskning: MG-63-celler er mye brukt i kreftforskning. Flere studier har benyttet disse osteosarkomcellene for å forstå kreftsignalveier og evaluere legemidlers cytotoksiske og terapeutiske potensial. En studie gjennomført i 2019 undersøkte de antitumoriske egenskapene til et naturlig stoff, Tomentosin, ved bruk av MG-63-celler. Funnene viste at Tomentosin har krefthemmende effekter ved å utløse produksjon av reaktive oksygenarter (ROS) i cellene [4].

Forskningspublikasjoner om MG-63-celler

Nedenfor følger noen forskningspublikasjoner som omhandler MG-63, den osteoblastlignende cellelinjen.

miR-192 øker følsomheten for legemidlet metotreksat hos MG-63-osteosarkom-kreftceller

Denne artikkelen ble publisert i tidsskriftet «Pathology – Research and Practice» i 2020. I denne studien ble MG-63-celler brukt til å undersøke molekylære mekanismer knyttet til medikamentresistens i osteosarkom-kreftceller (MG-63). Resultatene viste at miRNA-192 kan være et nyttig mål for å overvinne metotreksat-resistens ved osteosarkom.

Grønnsyntetiserte sinkoksid-nanopartikler regulerer apoptoseuttrykket i MG-63-celler fra beinkreft

Denne forskningen er publisert i tidsskriftet «Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology» (2020). Studien rapporterte om kreftbekjempende potensialet til grønn-syntetiserte sinkoksid-nanopartikler (ZnONPs) fra Rehmanniae Radix mot beinkreftceller (MG-63).

Osteogen differensiering og mineraliseringspotensial hos sinkoksid-nanopartikler fra Scutellaria baicalensis på humane osteoblastlignende MG-63-celler

Denne forskningsartikkelen ble publisert i 2021 i tidsskriftet Materials Science and Engineering. Studien foreslo at biosyntetiserte sinkoksid-nanopartikler fra planten Scutellaria baicalensis har beinhelende egenskaper, basert på undersøkelser med MG-63-cellelinjen.

Kurkumin hemmer proliferasjonen og invasjonen av MG-63-celler gjennom inaktivering av p-JAK2/p-STAT3-signalveien

Denne studien ble publisert i tidsskriftet *Onco Targets and Therapy* i 2021. Forskningen påviste at kurkuminforbindelsen har antitumoregenskaper mot osteosarkomceller. Forbindelsen utøvde disse terapeutiske effektene ved å inaktivere p-JAK2/p-STAT3-kreftsignalveien.

Effekten av biofeltbehandlet vitamin D3 på proliferasjon, differensiering og modning av beinrelaterte parametere i MG-63-cellelinjen

Denne forskningen ble publisert i 2018 i tidsskriftet *International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science*. Studien fant at biofeltbehandlet vitamin D3 har en positiv innvirkning på beincellenes proliferasjon, modning og differensiering og forbedrer parametrene for beinhelse.

Ressurser for MG-63-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer

Det finnes flere ressurser om MG-63-cellelinjen som belyser protokollene for cellekultivering og transfeksjon.

  • Transfeksjon av MG-63-celler: Denne videoen gir en omfattende forklaring på transfeksjonsprotokollen for MG-63-celler.
  • Passering av vedheftende celler: Denne videoen veileder i subkultivering eller passering av vedheftende cellelinjer. Den vil hjelpe deg med å lære grunnleggende protokoller for cellekultur.

Følgende lenke gir deg dyrkingsprotokollen for MG-63-celler.

  • Cellekultur av MG-63: Denne nettsiden gir en enkel og detaljert protokoll for subkultivering eller deling av MG-63-cellelinjen.

Ofte stilte spørsmål om MG-63-celler

MG-63-celler er en human osteosarkomcellelinje som ofte brukes i forskning for å studere beinbiologi, kreftbiologi og legemiddeltesting. De stammer fra osteosarkom fra en 14 år gammel mann og har egenskaper som er typiske for osteoblastiske celler.

MG-63-celler stammer fra humant osteosarkom, en type benkreft. Nærmere bestemt stammer de fra ondartet benvev fra en menneskelig pasient.

Doblingstiden for MG-63-celler varierer vanligvis mellom 24 og 36 timer, avhengig av dyrkingsforholdene og mediet som brukes.

MG-63-celler har en unormal karyotype med flere kromosomavvik. Dette omfatter både numeriske og strukturelle avvik som er karakteristiske for kreftceller.

Mens MG-63-celler er osteosarkomceller, stammer humane fibroblaster fra bindevev og er involvert i sårheling og dannelse av ekstracellulær matriks. Begge celletypene brukes i studier av celleinteraksjoner, særlig i forbindelse med bein- og vevsteknologi.

MG-63-celler har robuste cellefesteegenskaper, noe som gjør dem egnet for studier som involverer celleadhesjon, spredning og interaksjon med ulike biomaterialer. Disse egenskapene er avgjørende for å forstå osteoblastenes funksjoner og optimalisere benimplantater.

MG-63-celler brukes i forskning for å undersøke adenosinets rolle i benmetabolismen. Adenosinreseptorene på disse cellene medierer ulike funksjoner, blant annet beindannelse og -resorpsjon, noe som gjør dem verdifulle for studier av de molekylære mekanismene i beinmetabolismen.

Amelogenin, et protein som er essensielt for emaljedannelse i tenner, kan også studeres ved hjelp av MG-63-celler for å undersøke dets effekter på beinceller og dets potensielle rolle i beinvevsutvikling og -regenerering.

MG-63-celler er avgjørende for å studere optimalisering av osseointegrasjon, som er prosessen der benvev integreres med implantater. Forskerne bruker disse cellene til å teste nye materialer og overflatemodifikasjoner som kan forbedre integreringen og stabiliteten til implantater.

Fenotypisk stabilitet refererer til konsistensen av cellulære egenskaper over tid og gjennom flere passasjer. For MG-63-celler er det avgjørende å opprettholde fenotypisk stabilitet for å sikre pålitelige og reproduserbare resultater i eksperimenter.

MG-63-celler fungerer som en modell for å studere osteoblastfunksjoner, inkludert beindannelse og mineralisering, samt patofysiologien ved osteosarkom, noe som gir innsikt i kreftutvikling og potensielle terapeutiske mål.

Ja, MG-63-celler kan brukes til å undersøke effekten av humane interferoner på benkreftceller, inkludert deres antivirale, antiproliferative og immunmodulerende egenskaper, noe som bidrar til forståelsen av immunterapi mot kreft.

Referanser

  1. Wandiyanto, J.V., et al., The Fate of Osteoblast-Like MG-63 Cells on Pre-Infected Bactericidal Nanostructured Titanium Surfaces. Materials (Basel), 2019. 12(10).
  2. Billiau, A., et al., Humant interferon: masseproduksjon i en nyetablert cellelinje, MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): s. 11–5.
  3. Tang, Y., m.fl., Osteogen differensiering og mineraliseringspotensial hos sinkoksid-nanopartikler fra Scutellaria baicalensis på humane osteoblastlignende MG-63-celler. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: s. 111656.
  4. Lee, C.M., et al., Tomentosin viser antikarsinogen effekt i humane osteosarkom-MG-63-celler gjennom induksjon av intracellulære reaktive oksygenarter. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): s. 1508.