HT55-celler

430,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 305018

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Avtale om materialoverføring

Beskrivelse	HT55 er en human adenokarsinomcellelinje fra endetarmen, etablert fra en primær svulst i endetarmen hos en 54 år gammel kaukasisk kvinne. Cellelinjen vokser som et vedheftende monolag med epitelignende morfologi og er registrert i Cellosaurus som CVCL_1294. HT55 bærer flere heterozygote og homozygote funksjonstapmutasjoner i tumorsuppressorgenet APC (adenomatøs polypose coli), inkludert p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr og p.Lys241Ter (alle heterozygote), samt en homozygot p.Arg213Leu-substitusjon. Dette mutasjonsprofilen gjør HT55 til en biologisk relevant modell for APC-drevet kolorektal karsinogenese, som gjenspeiler dysreguleringen av den kanoniske WNT-signalveien som driver de fleste tilfeller av kolorektalkreft hos mennesker. HT55 brukes mye i forskning på kolorektal kreft til studier av WNT/β-katenin-signalering, APCs tumorsuppressorfunksjon, medikamentfølsomhet og -resistens, samt preklinisk evaluering av målrettede midler mot komponenter i WNT-signalveien. Linjen er egnet for farmakologiske in vitro-analyser og xenotransplantasjonsstudier i immunsvekkede musemodeller, og gir en vedheftende, håndterbar in vitro-plattform for mekanistisk og translasjonell forskning på kolorektal kreft. Tilstedeværelsen av flere APC-trunkeringsmutasjoner gjør HT55 representativ for den mikrosatellittstabile, kromosomalt ustabile kolorektalkreftsubtypen som ofte er drevet av funksjonstap av APC. HT55 opprettholdes i EMEM (MEM Eagle, w: 2 mM L-glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO₃, w: EBSS; Cytion-artikkelnummer 820100a) tilsatt 10 % FBS ved 37 °C i en fuktet atmosfære med 5 % CO₂. Cellene subkultiveres ved hjelp av Accutase når de er ca. 80–90 % konfluente, med et anbefalt delingsforhold på 1:3 til 1:5 og en utsåingstetthet på 1–3 × 10⁴ celler/cm². Mediet skiftes ut hver 2.–3. dag. Doblingstiden er ca. 28 timer.
Organisme	Menneskelig
Vev	Rektum
Sykdom	Adenokarsinom
Bruksområder	Forskning på tykktarmskreft; studier av WNT/APC-signalveien; testing av legemiddelfølsomhet og -resistens; preklinisk onkologi; xenotransplantasjonsmodeller; evaluering av målrettet behandling
Synonymer	HT55

Alder	54 år
Kjønn	Kvinne
Etnisitet	Kaukasisk
Morfologi	Epitel-lignende
Celletype	Epitelceller
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	HT55 (Cytion-katalognummer 305018)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1294

Mutasjonsprofil	Mutasjon: p.Gln1131Ter, heterozygot; Mutasjon: p.Gln1303Ter, heterozygot; Mutasjon: p.Arg1463Ser, heterozygot; Mutasjon: p.Asn581Tyr, heterozygot; Mutasjon: p.Lys241Ter, heterozygot; Mutasjon: p.Arg213Leu, homozygot

Kulturmedium	EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Kosttilskudd	Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Doblingstid	28 timer
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de vedheftede cellene og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3–5 ml PBS til T25-kolber og 5–10 ml til T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, ved å bruke 1–2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere ved romtemperatur i 8–10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjonen blander du cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifugerer deretter ved 300×g i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspendér cellene i ferskt medium, og overfør dem til nye flasker som allerede inneholder ferskt medium.
Delingsforhold	1 til 5
Såtetthet	1 til 3 x 10⁴ celler/cm²
Fornyelse av væske	Hver 2. til 3. dag
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.

For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.

Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.

HT55-celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll og molekylær analyse

Avtale om materialoverføring