EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS
Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) er et av de mest brukte basismediene for dyrking av et bredt spekter av pattedyrceller, særlig vedheftende cellelinjer. Denne klassiske formuleringen, som opprinnelig ble utviklet av Harry Eagle, inneholder de essensielle aminosyrene, vitaminene og de uorganiske saltene som kreves for å støtte veksten av både primærceller og etablerte cellelinjer under standard dyrkingsforhold.
Denne bruksklare, sterilt filtrerte flytende formuleringen er tilsatt Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamin, D-glukose (1,0 g/l) og 2,2 g/l natriumbikarbonat (NaHCO3), noe som gjør den egnet for bruk i en CO2-kontrollert inkubatoratmosfære (typisk 5 % CO2). Det inkluderte fenolrød fungerer som en pH-indikator, noe som muliggjør praktisk visuell overvåking av mediumtilstanden under cellekulturen.
Viktige egenskaper
- Klassisk Eagles MEM-formulering med Earles balanserte saltløsning (EBSS)
- 2 mM L-glutamin inkludert – klar til umiddelbar bruk
- 2,2 g/L natriumbikarbonat – bufret for inkubasjon med 5 % CO2
- Med D-glukose (1,0 g/l) som primær karbonkilde
- Med fenolrødt som pH-indikator
- Uten HEPES og uten natriumpyruvat
- Sterilfiltrert flytende medium, klar til bruk
- pH 7,0 – 7,6
Typiske anvendelser
EMEM støtter dyrking av et bredt utvalg av pattedyrcellelinjer, inkludert HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 og mange primærceller. Vanlige bruksområder inkluderer:
- Rutinemessig vedlikehold og utvidelse av vedheftende cellelinjer
- Arbeidsflyter for virusformering og vaksineproduksjon
- Cytotoksisitet og bioassay-anvendelser
- Studier av transfeksjon og proteinekspresjon
- Grunnleggende forskning innen cellebiologi og molekylærbiologi
For optimal cellevekst tilsettes EMEM vanligvis 5–10 % føtal bovint serum (FBS) og, avhengig av cellelinjen, ikke-essensielle aminosyrer (NEAA) og antibiotika som penicillin/streptomycin.
Håndtering og oppbevaring
Oppbevar den uåpnede flasken ved +2 °C til +8 °C, beskyttet mot lys. Etter åpning skal produktet brukes under aseptiske forhold. L-glutamin i løsning er utsatt for gradvis nedbrytning – vi anbefaler å bruke mediet innen 4 uker etter åpning for best ytelse, eller å tilsette fersk L-glutamin før bruk hvis det oppbevares i lengre perioder. La mediet varme seg opp til 37 °C før det tilsettes cellene.
Kvalitet
Produsert i henhold til strenge kvalitetsstandarder. Hver batch testes for sterilitet, pH, osmolalitet og endotoksinnivåer for å sikre jevn ytelse i cellekulturapplikasjoner.
Produktspesifikasjoner
| Spesifikasjon | Detalj |
|---|---|
| Produkttype | MEM |
| Produktkategori | Cellekulturmedier |
| Format | Væske |
| Sterilt | Ja |
| Størrelse | 500 ml |
| L-glutamin | Med L-glutamin (2 mM) |
| Glukose | Med glukose (1,0 g/l) |
| Natriumbikarbonat | Med NaHCO3 (2,2 g/L) |
| HEPES | Uten HEPES |
| Natrium-pyruvat | Uten natriumpyruvat |
| Fenolrød | Med fenolrødt |
| Saltløsning | Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Endotoksininnhold | Ikke spesifisert |
| Oppbevaring | +2 °C til +8 °C |
Formulering (sammensetning per liter)
| Komponent | Konsentrasjon (mg/L) |
|---|---|
| Uorganiske salter | |
| Kalsiumklorid · 2H2O | 265,00 |
| Magnesiumsulfat | 97,72 |
| Kaliumklorid | 400,00 |
| Natriumklorid | 6 800,00 |
| Natriumdihydrogenfosfat, vannfritt | 122,00 |
| Natriumbikarbonat (NaHCO3) | 2 200,00 |
| Aminosyrer | |
| L-arginin · HCl | 126,00 |
| L-cystin · 2HCl | 31,30 |
| L-glutamin | 292,00 |
| L-histidin · HCl · H2O | 42,00 |
| L-isoleucin | 52,00 |
| L-leucin | 52,00 |
| L-lysin · HCl | 72,50 |
| L-metionin | 15,00 |
| L-fenylalanin | 32,00 |
| L-treonin | 48,00 |
| L-tryptofan | 10,00 |
| L-tyrosin · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valin | 46,00 |
| Vitaminer | |
| D-kalsiumpantotenat | 1,00 |
| Kolin klorid | 1,00 |
| Folsyre | 1,00 |
| myo-inositol | 2,00 |
| Nikotinamid | 1,00 |
| Pyridoksal · HCl | 1,00 |
| Riboflavin | 0,10 |
| Tiamin · HCl | 1,00 |
| Andre komponenter | |
| D(+)-glukose | 1 000,00 |
| Fenolrødt | 10,00 |