Wilms3 Cellen
€ 800,00*
De producten worden bevroren verzonden in cryobuisjes met droogijs. Elk cryobuisje bevat doorgaans 3 × 10 6 cellen voor hechtende lijnen of 5 × 106 cellen voor suspensielijnen (zie het batch-CoA voor meer informatie).
Algemene informatie
| Beschrijving | De Wilms3-cellijn is ontstaan uit een primaire Wilms-tumor van een pediatrische patiënt, gekenmerkt door een somatische WT1-mutatie. In tegenstelling tot veel andere Wilms-tumorcellijnen heeft Wilms3 een heterozygote frameshiftmutatie in het WT1-gen (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), wat leidt tot de productie van een afgekapt WT1-eiwit. Dit gedeeltelijke verlies van de WT1-functie wordt geassocieerd met de ontwikkeling van tumoren met een stromaal of mesenchymaal fenotype. De WT1-mutatie in Wilms3 is echter niet homozygoot, wat het onderzoek complexer maakt, omdat het enige WT1-functie behoudt die de tumorbiologie anders kan beïnvloeden dan cellijnen met volledig WT1-verlies. Wilms3 draagt ook een mutatie in het CTNNB1-gen, specifiek van invloed op threonine 41 (p.T41A), dat een cruciale rol speelt in de Wnt-signaleringsroute. Deze mutatie stabiliseert β-Catenine, waardoor afbraak wordt voorkomen en de Wnt signaalroute constitutief wordt geactiveerd. De aanhoudende activering van Wnt-signalering stimuleert celproliferatie en draagt bij aan tumorigenese in Wilms3, waardoor het een belangrijk model is voor het bestuderen van de invloed van CTNNB1-mutaties in de context van een gedeeltelijk functionele WT1-achtergrond. Fenotypisch vertonen Wilms3-cellen een mesenchym-achtige morfologie, waarbij vimentine tot expressie komt en cytokeratine ontbreekt, wat consistent is met de stromale kenmerken die in de oorspronkelijke tumor zijn waargenomen. Deze cellen vertonen een beperkt differentiatiepotentieel, met de mogelijkheid om onder specifieke omstandigheden enige mesenchymale differentiatie te ondergaan. Proteomische analyses van Wilms3 hebben de activering van verschillende receptor tyrosine kinases (RTK's) aangetoond, waaronder PDGFRβ en AXL, die de overleving en proliferatie van de cellen ondersteunen. Daarnaast worden downstream signaalroutes zoals MAPK en PI3K/AKT geactiveerd, wat de kwaadaardige eigenschappen van Wilms3 cellen versterkt. Een uniek aspect van Wilms3 is de gedeeltelijke WT1-functionaliteit, wat een ander perspectief biedt op hoe WT1-mutaties bijdragen aan de biologie van Wilms-tumoren wanneer de mutatie niet volledig is. De wisselwerking tussen WT1 en Wnt signalering in Wilms3 biedt een waardevolle mogelijkheid om de genuanceerde rol van deze pathways in de ontwikkeling van tumoren te bestuderen. Over het geheel genomen dient Wilms3 als een belangrijk model voor het onderzoeken van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan Wilms tumor in aanwezigheid van gedeeltelijk WT1 verlies en constitutieve Wnt pathway activatie. |
|---|---|
| Organisme | Mens |
| Weefsel | Nieren |
| Ziekte | Wilms tumor |
| Toepassingen | In vitro celkweekmodel. Biochemische onderzoeken |
Kenmerken
| Leeftijd | 11-12 maanden |
|---|---|
| Geslacht | Mannelijk |
| Etniciteit | Kaukasisch |
| Morfologie | Spilvormig |
| Celtype | Wilms cellen |
| Groei eigenschappen | Aanhangend |
Regelgevende gegevens
| Citeren | Wilms3 (Cytion catalogusnummer 300414) |
|---|---|
| Bioveiligheidsniveau | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccessie | CVCL_A5SF |
| Deposant | B. Royer-Pokora |
Biomoleculaire gegevens
| Mutatieprofiel | WT1 mutatiestatus: homozygoot c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 mutatiestatus: wild type |
|---|
Omgaan met
| Kweekmedium | MSCGM-kit (van Lonza) |
|---|---|
| Scheidingsreagens | Accutase |
| Subcultuur | Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten. |
| Middel invriezen | Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen. |
| Cellen ontdooien en kweken |
|
| Incubatieatmosfeer | 37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer. |
| Kolfcoating | Geen |
| Invriesprocedure | Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats. |
| Verzendvoorwaarden | Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats. |
| Opslagomstandigheden | Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof. |
Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA
| Steriliteit | Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties. |
|---|---|
| STR profiel |
Amelogenine: x,y
CSF1PO: 11,12
D13S317: 12,13
D16S539: 9,11
D5S818: 9,9
D7S820: 10,11
TH01: 6,6
TPOX: 8,8
vWA: 16,17
D3S1358: 15,16
D21S11: 29,31
D18S51: 13,17
Penta E: 7,10
Penta D: 9,13
D8S1179: 10,11
FGA: 22,24
|
| HLA-allelen |
A*: '03:01:01
B*: '35:01:01, '35:03:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:03:01, '11:04:01
DQA1*: '03:01:01, '05:05:01
DQB1*: '03:01:01, '03:02:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:03:02, '01:06:01
|
Certificaat van Analyse (CoA)
| Kavelnummer | Type certificaat | Datum | Catalogusnummer |
|---|---|---|---|
| 300414-221 | Certificaat van Analyse | 23. May. 2025 | 300414 |
Overeenkomst materiaaloverdracht
Als u van plan bent Cytion-cellijnen uitsluitend te gebruiken voor intern onderzoek op één enkele onderzoekslocatie, vul dan onze materiaaloverdrachtsovereenkomst (MTA) in, onderteken deze en stuur deze samen met uw bestelling op.
Voor commerciële toepassingen, waaronder maar niet beperkt tot werk tegen betaling, kwaliteitscontroletests, productvrijgave, diagnostisch gebruik of regelgevende studies, vult u het formulier voor beoogd gebruik in, zodat wij een overeenkomst kunnen opstellen die is afgestemd op uw project.
Let op: de MTA is alleen van toepassing op bepaalde cellijnen. Als deze kennisgeving en het MTA-document op een productpagina worden weergegeven, is de overeenkomst van toepassing. Voor cellijnen die niet onder de MTA vallen, wordt geen verwijzing naar de overeenkomst weergegeven. De MTA is niet geldig voor klanten in Noord- en Zuid-Amerika, China of Taiwan. Neem contact op met onze Amerikaanse entiteit om de juiste overeenkomst te ontvangen.