Wilms1 Cellen

€ 800,00*

De producten worden bevroren verzonden in cryobuisjes met droogijs. Elk cryobuisje bevat doorgaans 3 × 10 ⁶ cellen voor hechtende lijnen of 5 × 10⁶ cellen voor suspensielijnen (zie het batch-CoA voor meer informatie).

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 300411

Veiligheidsinformatieblad

Productblad

Certificaat van Analyse (CoA)

Overeenkomst materiaaloverdracht

Beschrijving	De Wilms1-cellijn is afgeleid van een primair Wilms-tumormonster van een patiënt met grote bilaterale niertumoren, wat wijst op Wilms tumor, een pediatrisch nefroblastoom. Deze cellijn bevat een homozygote nonsensmutatie in het WT1-gen (c.149 C>A, p.S50X), die resulteert in een afgekapt en niet-functioneel WT1-eiwit. Het WT1-gen, dat cruciaal is voor de ontwikkeling en functie van de nier, is vaak gemuteerd in Wilms tumoren, vooral in die met een stromaal subtype dat ectopische mesenchymale differentiatie vertoont. Wilms1-cellen vormen daarom een uniek in vitro model voor het bestuderen van de gevolgen van functieverlies van WT1 in de tumorbiologie. De Wilms1-cellijn heeft een stabiel karyotype zonder significante chromosoomafwijkingen, waardoor een betrouwbare kweek op lange termijn mogelijk is. Deze cellen vertonen een mesenchymaal fenotype, gekenmerkt door de expressie van vimentine en de afwezigheid van epitheliale markers zoals cytokeratine, wat consistent is met hun stromale oorsprong. Daarnaast laat de cellijn een beperkte maar opmerkelijke mesenchymale differentiatiecapaciteit zien, waaronder het vermogen om onder de juiste omstandigheden te differentiëren in spierachtige cellen. Dit maakt Wilms1 van onschatbare waarde voor het onderzoeken van de moleculaire mechanismen van mesenchymale differentiatie en de ontregeling ervan in de pathogenese van Wilms-tumoren. Wilms1 is ook gebruikt om de activeringsstatus te bestuderen van belangrijke signaalwegen die betrokken zijn bij tumorgroei. Proteomische analyses hebben aangetoond dat Wilms1-cellen fosforylering en activering van verschillende receptor tyrosinekinasen vertonen, waaronder EGFR en PDGFRβ, evenals downstream MAPK-signaalroutes. Deze bevindingen benadrukken het belang van de Wilms1 cellijn voor het onderzoeken van gerichte therapeutische benaderingen voor Wilms tumor door het ontleden van de rol van deze pathways in overleving, proliferatie en differentiatie van kankercellen.
Organisme	Mens
Weefsel	Nieren
Toepassingen	In vitro celkweekmodel. Biochemische onderzoeken
Synoniemen	Wilms1-2l

Leeftijd	2 jaar
Geslacht	Vrouw
Etniciteit	Kaukasisch
Morfologie	Spilvormig
Celtype	Wilms cellen
Groei eigenschappen	Aanhangend

Citeren	Wilms1 (Cytion catalogusnummer 300411)
Bioveiligheidsniveau	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccessie	CVCL_A5SC
Deposant	B. Royer-Pokora

Uitgedrukte receptoren	Tyrosinekinasen van receptoren EGFR, EphA7, PDGFRalfa, FGFR1, PDGFRbeta, AxL
Tumorigeen	Ja, in naakte muizen. Vormt tumor met kleine cellen die overeenkomen met Wilms' tumor (xenograften vertegenwoordigen Wilms tumoren mogelijk niet volledig, zie E. Kunce Stroup 2017)
Virussen	HIV-1: negatief, HBV: negatief, HCV: negatief
Mutatieprofiel	WT1 mutatiestatus: homozygoot c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 mutatiestatus: heterozygoot TCT>TTT, p.S45F
Karyotype	46, normaal

Kweekmedium	MSCGM-kit (van Lonza)
Scheidingsreagens	Accutase
Verdubbelingstijd	24 uur
Subcultuur	Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Dichtheid zaaien	1 x 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofvernieuwing	1 tot 2 keer per week
Herstel na de dooi	Snel
Middel invriezen	Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Cellen ontdooien en kweken	Controleer of de flacon bij levering diepgevroren blijft, aangezien de cellen op droog ijs worden verzonden om optimale temperaturen tijdens het transport te behouden. Bewaar het cryoflesje na ontvangst onmiddellijk bij temperaturen lager dan -150 °C om de integriteit van de cellen te behouden, of ga verder met stap 3 als onmiddellijke kweek vereist is. Voor onmiddellijke kweek: ontdooi de flacon snel door deze onder te dompelen in een waterbad van 37 °C met schoon water en een antimicrobieel middel, waarbij u 40-60 seconden zachtjes schudt totdat er een klein ijsklontje overblijft. Voer alle volgende stappen uit onder steriele omstandigheden in een stromingskap en desinfecteer de cryoflacon met 70% ethanol voordat deze wordt geopend. Open voorzichtig de gedesinfecteerde flacon en breng de celsuspensie over in een centrifugebuis van 15 ml met 8 ml kweekmedium op kamertemperatuur en meng voorzichtig. Centrifugeer het mengsel gedurende 3 minuten bij 300 x g om de cellen te scheiden en gooi het supernatant met resterend vriesmedium voorzichtig weg. Resuspendeer de celpellet voorzichtig in 10 ml vers kweekmedium. Verdeel voor adherente cellen de suspensie over twee T25-kweekkolven; breng voor suspensiekweken al het medium over in één T25-kweekkolf om effectieve celinteractie en -groei te bevorderen. Houd u aan de vastgestelde subcultuurprotocollen voor continue groei en onderhoud van de cellijn, om betrouwbare experimentele resultaten te garanderen.
Incubatieatmosfeer	37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.
Kolfcoating	Geen
Invriesprocedure	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Verzendvoorwaarden	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Opslagomstandigheden	Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Steriliteit	Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
STR profiel	Amelogenine: x,x CSF1PO: 10,12 D13S317: 11,13 D16S539: 11,14 D5S818: 12,13,14 D7S820: 9,14 TH01: 9.3 TPOX: 8,9 vWA: 14,19 D3S1358: 14,17,18 D21S11: 30,31 D18S51: 15,18 Penta E: 5,14 Penta D: 13 D8S1179: 12,14 FGA: 22,25
HLA-allelen	A: '03:01:01, '24:02:01 B: '35:03:01, '38:01:01 C: '12:03:01 DRB1: '07:01:01, '14:54:01 DQA1: '01:04:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:03:01 DPB1*: '02:01:02G, '04:02:01G E: '01:03:01, '01:03:02

Kavelnummer	Type certificaat	Datum	Catalogusnummer
300411-221	Certificaat van Analyse	23. May. 2025	300411
300411-130524	Certificaat van Analyse	23. May. 2025	300411

Als u van plan bent Cytion-cellijnen uitsluitend te gebruiken voor intern onderzoek op één enkele onderzoekslocatie, vul dan onze materiaaloverdrachtsovereenkomst (MTA) in, onderteken deze en stuur deze samen met uw bestelling op.

Voor commerciële toepassingen, waaronder maar niet beperkt tot werk tegen betaling, kwaliteitscontroletests, productvrijgave, diagnostisch gebruik of regelgevende studies, vult u het formulier voor beoogd gebruik in, zodat wij een overeenkomst kunnen opstellen die is afgestemd op uw project.

Let op: de MTA is alleen van toepassing op bepaalde cellijnen. Als deze kennisgeving en het MTA-document op een productpagina worden weergegeven, is de overeenkomst van toepassing. Voor cellijnen die niet onder de MTA vallen, wordt geen verwijzing naar de overeenkomst weergegeven. De MTA is niet geldig voor klanten in Noord- en Zuid-Amerika, China of Taiwan. Neem contact op met onze Amerikaanse entiteit om de juiste overeenkomst te ontvangen.

Wilms1 Cellen

Algemene informatie

Kenmerken

Regelgevende gegevens

Biomoleculaire gegevens

Omgaan met

Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA

Certificaat van Analyse (CoA)

Overeenkomst materiaaloverdracht