MC3T3-E1-cellen — Het toonaangevende pre-osteoblastmodel voor onderzoek naar botbiologie

Inleiding

MC3T3-E1-cellen, ook bekend onder de synoniemen Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1 en MC 3T3-E1 (Cellosaurus-toegangsnummer CVCL_0409), behoren tot de meest gebruikte pre-osteoblastische cellijnen in de moderne botbiologie. Deze spontaan onsterfelijk gemaakte cellen, die in 1981 door Kodama en collega’s werden geïsoleerd uit de schedel van pasgeboren muizen en in 1983 verder werden gekarakteriseerd door Sudo et al., werden geselecteerd vanwege hun hoge alkalische fosfatase (ALP)-activiteit in de confluente toestand. [1] Hun vermogen om duidelijk afgebakende proliferatie- en differentiatiefasen te doorlopen — waarbij ze uiteindelijk in vitro een gemineraliseerde botmatrix vormen — heeft deze cellen tot een onmisbaar hulpmiddel gemaakt voor het bestuderen van osteogenese, botremodellering en de effecten van farmacologische middelen, biomaterialen en genetische verstoringen op de functie van osteoblasten. Tegenwoordig spelen MC3T3-E1-cellen een prominente rol in onderzoek op het gebied van osteoporose, implantaatwetenschap, weefselengineering en ruimtebiologie.

Belangrijkste punten

• MC3T3-E1 is een spontaan onsterfelijk gemaakte pre-osteoblastcellijn van muizen, afkomstig uit de schedel van pasgeboren muizen.
• De cellen doorlopen verschillende proliferatie- en differentiatiefasen, die in vitro uitmonden in de vorming van een gemineraliseerde matrix.
• De hoge ALP-activiteit en de expressie van osteoblastmarkers (RUNX2, OCN, OPN, Col1A1) maken ze tot een betrouwbaar model voor osteogenese.
• Uit de ouderlijn zijn meerdere afgeleide subklonen met een verschillend differentiatie- en mineralisatiepotentieel gekweekt.
• MC3T3-E1-cellen worden op grote schaal gebruikt bij het testen van biomaterialen, bij de ontwikkeling van geneesmiddelen, bij onderzoek naar osteoporose en bij botweefselengineering.
• De identiteit van een cellijn moet stelselmatig worden gecontroleerd door middel van STR- of SNP-profilering om verkeerde identificatie en kruisbesmetting te voorkomen. [2]

Wat is MC3T3-E1?

MC3T3-E1 is een klonale, spontaan onsterfelijk gemaakte pre-osteoblastcellijn van muizen, geregistreerd onder het Cellosaurus-toegangsnummer CVCL_0409. Deze is afgeleid van het schedelbotweefsel van een pasgeboren muis (minder dan één dag oud) waarvan het geslacht niet is gespecificeerd. Er was geen ziekte vastgesteld bij het donordier. De cellijn werd geselecteerd op basis van een hoge ALP-activiteit in de confluente toestand, een eigenschap die duidde op een robuust vermogen tot in-vitro-osteogenese. In de groeifase vertonen MC3T3-E1-cellen een fibroblastische morfologie en vormen ze meerlaagse culturen. Na inductie differentiëren ze tot osteoblasten, produceren ze een collageenhoudende extracellulaire matrix en geven ze uiteindelijk aanleiding tot gemineraliseerde knobbeltjes die osteocytachtige cellen bevatten, ingebed in botmatrix. [1] De verdubbelingstijd varieert onder standaardkweekomstandigheden van 24 tot 48 uur.

Aan de hand van SNP-array-profilering werd bevestigd dat de MC3T3-E1-cellen afkomstig zijn van de C57BL/6-stam; deze methode is gebruikt om karyotypische veranderingen te identificeren die verband houden met langdurige passage. [3] De lijn brengt belangrijke osteoblastmarkers tot expressie, waaronder RUNX2, bot-sialoproteïne, osteocalcine en osteopontine, met name in mineraliserende subklonen. [4] Een reeks afgeleide subklonen — waaronder MC3T3-E1-subkloon 14 cellen en subkloon 4 — zijn geïsoleerd uit de oorspronkelijke lijn en vertonen in vitro en in vivo verschillende mate van differentiatie- en mineralisatiepotentieel.

Informatie over celculturen

MC3T3-E1 – hoge confluentie

Voordelen van MC3T3-E1-cellen

MC3T3-E1-cellen bieden een duidelijk omschreven, reproduceerbaar model van het gehele ontwikkelingsproces van osteoblasten. In tegenstelling tot primaire osteoblasten uit de schedel, die heterogeen zijn en moeilijk te kweken, zijn MC3T3-E1-cellen klonaal afgeleid en kunnen ze in verschillende laboratoria op consistente wijze worden gekweekt. Hun vermogen om zich te ontwikkelen van prolifererende pre-osteoblasten tot matrixafzettende osteoblasten en uiteindelijk tot in osteocyten ingebedde gemineraliseerde knobbeltjes maakt ze bij uitstek geschikt voor tijdsverloopstudies van de osteogenese. Baanbrekend werk van Yohay et al. definieerde de verschillende proliferatieve en gedifferentieerde stadia van MC3T3-E1-cellen in kweek, waardoor deze cellen werden gevestigd als een kwantitatief in-vitro-model van de ontwikkeling van osteoblasten. [5] Uit dat onderzoek bleek dat MC3T3-E1-cellen een voorspelbare reeks van groeistilstand, matrixrijping en mineralisatie doorlopen — stadia die nauw aansluiten bij de ontogenie van osteoblasten in vivo.

Een bijkomend voordeel is de beschikbaarheid van goed gekarakteriseerde subklonen die experimentele flexibiliteit bieden. Wang et al. hebben een reeks subklonen geïsoleerd uit de oorspronkelijke MC3T3-E1-lijn en daarmee aangetoond dat mineraliserende subklonen selectief bot-sialoproteïne, osteocalcine, en PTH/PTHrP-receptor-mRNA’s tot expressie brengen, terwijl de expressie van alkalische fosfatase zowel in mineraliserende als in niet-mineraliserende subklonen voorkwam. [4] Met deze bron kunnen onderzoekers subklonen selecteren met welbepaalde fenotypes die aansluiten bij hun experimentele behoeften. Bovendien reageren de cellen krachtig op een breed scala aan osteogene stimuli — waaronder ascorbinezuur, bèta-glycerofosfaat, BMP-2, dexamethason en talrijke kleine moleculen — waardoor ze ideaal zijn voor farmacologische en mechanistische studies.

MC3T3-E1-cellen lenen zich bovendien uitstekend voor moleculaire manipulatie. Ze zijn geschikt voor transfectie, virale transductie en CRISPR-gebaseerde genbewerking, en ze brengen endogene signaalroutes tot expressie (Wnt/β-catenine, BMP/SMAD, PI3K/AKT) die direct relevant zijn voor de pathofysiologie van botten. Omdat ze afkomstig zijn van muizen, kunnen ze gemakkelijk worden geïntegreerd in in vivo muismodellen voor osteoporose en fractuurgenezing, wat de translationele waarde van de in vitro verkregen bevindingen versterkt.

Beperkingen van MC3T3-E1-cellen

Ondanks hun wijdverbreide gebruik zijn er belangrijke kanttekeningen bij MC3T3-E1-cellen. Omdat het een spontaan onsterfelijk gemaakte lijn betreft, kunnen er bij langdurige passage karyotypische afwijkingen ontstaan. Uit SNP-array-profilering bleek dat er wijdverspreide aneuploïdie voorkomt in MC3T3-E1-culturen, en genoombrede veranderingen kunnen de reproduceerbaarheid van differentiatieassays bij hoge passagenummers beïnvloeden. [3] De oorspronkelijke ouderlijn kan ook spontaan het vermogen tot mineralisatie verliezen, zoals aangetoond door Baba, die een niet-mineraliserende subkloon (MC3T3-NM4) isoleerde uit de ouderpopulatie MC3T3-E1 — een bevinding die onderstreept dat het differentiatievermogen tijdens de verschillende passages zorgvuldig moet worden gecontroleerd. [6]

De variabele osteogene prestaties van in de handel verkrijgbare MC3T3-E1-subklonen vormen een extra bron van experimentele variabiliteit. Onderzoek heeft aangetoond dat verschillende subklonen (bijv. subkloon 4 versus subkloon 14) opvallend verschillende mineralisatiekinetiek en expressieprofielen van markergenen vertonen, zodat een directe vergelijking van resultaten tussen laboratoria die verschillende subklonen gebruiken, met de nodige voorzichtigheid moet worden gemaakt. Ook de samenstelling van het kweekmedium heeft een aanzienlijke invloed op de osteogene resultaten: studies waarin MC3T3-E1-cellen in verschillende kweekmedia werden geëvalueerd, rapporteerden aanzienlijke verschillen in ALP-activiteit, collageenafzetting en verkalking — wat het belang van mediumstandaardisatie in de experimentele opzet onderstreept.

Ten slotte zijn MC3T3-E1-cellen van muizenafkomst, wat hun directe translationele relevantie voor het voorspellen van reacties van menselijke osteoblasten beperkt. Soortspecifieke verschillen in receptorfarmacologie, cytokinesignalering en genregulatie betekenen dat bevindingen in systemen met menselijke osteoblasten moeten worden gevalideerd alvorens ze naar de klinische praktijk kunnen worden geëxtrapoleerd. Routinematige authenticatie van cellijnen door middel van STR-profilering of op next-generation sequencing gebaseerde methoden wordt sterk aanbevolen om kruisbesmetting uit te sluiten voordat experimenten worden gestart. [2]

Toepassingen

Modellering van osteoblastdifferentiatie en osteogenese

De belangrijkste toepassing van MC3T3-E1-cellen is als kwantitatief model voor de differentiatie van osteoblasten. In het baanbrekende onderzoek van Yohay et al. werden de verschillende proliferatieve en gedifferentieerde stadia van MC3T3-E1-cellen van muizen in kweek gekarakteriseerd, waardoor een tijdsraamwerk werd geboden om te begrijpen hoe deze pre-osteoblasten de overgang maken door de groeifase, de fase van matrixrijping en de mineralisatiefase. [5] Dat onderzoek heeft de cellijn aangewezen als een geschikt in-vitro-model voor osteogenese en heeft experimentele maatstaven vastgesteld — zoals ALP-activiteit, afzetting van collageenmatrix en mineralisatie van knobbeltjes — die tot op de dag van vandaag standaard worden gebruikt. Dankzij de duidelijkheid van deze ontwikkelingsstadia is MC3T3-E1 de referentiestandaard geworden waaraan nieuwe osteogene protocollen en differentiatiemedia worden getoetst.

In onderzoek naar signaalroutes zijn MC3T3-E1-cellen gebruikt om de moleculaire mechanismen van de botvorming te ontrafelen. Wang et al. hebben aangetoond dat apelin-13 via zijn receptor APJ de BMP4/SMAD1/5/8-route activeert, waardoor de osteogene markers ALP, osteocalcine, osteopontine en Col1A1 worden opgereguleerd en de RUNX2-expressie zowel op mRNA- als op eiwitniveau in MC3T3-E1-cellen toeneemt. [7] Ook de regulering van differentiatie door microRNA is onderzocht: Zhai et al. toonden aan dat de miR-211-5p/FOXO3-as de osteogene differentiatie van MC3T3-E1-cellen en BMSC’s bevordert door de Wnt/β-catenine-route te activeren, wat gevolgen heeft voor de genezing van osteoporotische fracturen. [8] Uit onderzoek naar vloeistofschuifspanning met behulp van MC3T3-E1-cellen is verder gebleken dat door AnnexinA6 gemedieerde autofagie de mechanisch geïnduceerde osteogene differentiatie reguleert; een bevinding die van belang is voor het begrip van de fysiologie van belastbaar bot. [9]

MC3T3-E1-cellen zijn gebruikt om driedimensionale sferoïden te vormen die de micro-omgeving van osteoblasten in vivo beter nabootsen. Wen et al. genereerden spontane MC3T3-E1-sferoïden met behulp van een kweeksysteem met lage adhesie en toonden aan dat de ALP-activiteit en de expressie van osteogene genen aanzienlijk hoger waren in vergelijking met monolaagculturen. [10] Deze sferoïden bevorderden de regeneratie van het alveolaire bot en remden ontstekingen in een autotransplantatiemodel met muizentanden, waarmee het belang van driedimensionale MC3T3-E1-kweeksystemen voor toepassingen op het gebied van weefselengineering werd onderstreept.

Onderzoek naar osteoporose en de ontwikkeling van geneesmiddelen

MC3T3-E1-cellen fungeren als een primair in-vitroplatform voor het evalueren van kandidaat-geneesmiddelen tegen osteoporose. Van quercetine, een natuurlijk voorkomende flavonoïde, is aangetoond dat het de disfunctie van osteoblasten bij ratten met osteoporose vermindert door ferroptose te reguleren via de Nrf2/SLC7A11/GPX4-signaalroute; in-vitrovalidatie met behulp van MC3T3-E1-cellen bevestigde de rol van deze route in de overleving en functie van osteoblasten. [11] Evenzo bevorderde het proteïne-extract uit pilose antler (PAE) de levensvatbaarheid, proliferatie en osteogene differentiatie van MC3T3-E1-cellen, terwijl het de Wnt/β-catenine-signaalroute activeerde, wat overeenkomt met de gunstige effecten ervan op de trabeculaire microarchitectuur bij ratten bij wie de eierstokken waren verwijderd. [12]

Polysacchariden uit traditionele geneeskrachtige planten zijn eveneens onderzocht met behulp van MC3T3-E1-cellen als het in-vitro-onderdeel van een breder onderzoek naar de bestrijding van osteoporose. Yang et al. hebben twee polysacchariden uit Psoralea corylifolia gekarakteriseerd en aangetoond dat deze de botvormende activiteit in MC3T3-E1-cellen kunnen stimuleren, wat de in vivo bevindingen van een verbeterde botmineraaldichtheid bij muizen met door glucocorticoïden geïnduceerde osteoporose aanvult. [13] Er is aangetoond dat curcumine-nanodeeltjes in combinatie met narlumosbart de differentiatie van osteoblasten in MC3T3-E1-cellen via de Wnt/β-catenine-route synergetisch bevorderen, wat een combinatorische nanodeeltjesstrategie biedt voor het herstel van bottrauma’s. [14]

Osteomyelitis, een ernstige botinfectie, is onderzocht met behulp van MC3T3-E1-cellen die waren behandeld met stafylokokkenproteïne A (SPA) als in-vitro-infectiemodel. Chen et al. gebruikten Mendeliaanse randomisatie in combinatie met deze in-vitro-experimenten om aan te tonen dat de circulerende metaboliet p-kresolsulfaat de proliferatie en osteogene differentiatie van MC3T3-E1-cellen belemmert, wat nieuwe mechanistische inzichten oplevert in de metabole factoren die de pathogenese van osteomyelitis aansturen. [15] Ook in MC3T3-E1-cellen is de remming van ferroptose met ferrostatin-1 onderzocht; de resultaten wijzen erop dat het onderdrukken van ferroptotische celdood de levensvatbaarheid van osteoblasten en de botvormende activiteit verbetert.

Biomaterialen, implantaatwetenschap en botweefselengineering

MC3T3-E1-cellen vormen de referentiestandaard voor het beoordelen van de biocompatibiliteit en het osteo-inductieve potentieel van nieuwe biomaterialen. Liu et al. ontwikkelden een met terbium gedoteerd, 3D-geprint carbonaathydroxyapatiet (Tb-CHA) en toonden met behulp van MC3T3-E1-cellen aan dat het materiaal de celproliferatie en -differentiatie in vitro aanzienlijk bevorderde; daaropvolgende in vivo validatie in een model met een schedeldefect bij ratten bevestigde de osteogene en angiogene eigenschappen ervan. [16] Het vermogen om de in-vitro-reacties van MC3T3-E1 te koppelen aan de resultaten van botregeneratie in vivo maakt deze cellijn bijzonder waardevol bij het iteratieve ontwerp van botvervangende materialen.

Bij de ontwikkeling van titaniumimplantaatoppervlakken is tot nu toe sterk geleund op MC3T3-E1-cellen om het osseointegratiepotentieel te kwantificeren. Liao en Li hebben een samengestelde coating van epigallocatechine-3-gallaat (EGCG), hydroxyapatiet (HAP) en zilvernanodeeltjes (AgNP's) op titaniumoppervlakken en toonden aan dat deze EGCG/HAP/AgNP-coating zowel de antibacteriële werking verbeterde als de hechting, proliferatie en osteogene differentiatie van MC3T3-E1-cellen bevorderde. [17] Deze bevindingen laten zien hoe MC3T3-E1-cellen bijdragen aan het optimaliseren van implantaatcoatings, waarbij een evenwicht moet worden gevonden tussen antimicrobiële werkzaamheid en compatibiliteit met de gastheercel.

Zinkoxide-nanodeeltjes (ZnO-NP’s) vormen een andere klasse van biomedische materialen die in MC3T3-E1-cellen zijn onderzocht. Ryu et al. hebben de concentratieafhankelijke effecten van ZnO-NP-extracten op de cytocompatibiliteit en de osteogene activiteit systematisch onderzocht en vastgesteld dat lage concentraties de reacties van osteoblasten bevorderden, terwijl hogere concentraties cytotoxisch waren. [18] Deze dosisafhankelijke karakterisering onderstreept het belang van het gebruik van gestandaardiseerde MC3T3-E1-testen bij het vaststellen van de veiligheids- en werkzaamheidsmarges van op nanomaterialen gebaseerde strategieën voor botregeneratie. Koud atmosferisch plasma (CAP)-technologie is eveneens beoordeeld op haar vermogen om de osteogene differentiatie van MC3T3-E1 op een tijdsafhankelijke manier te stimuleren, wat potentiële toepassingen opent voor de regeneratie van alveolair bot. [19]

Microzwaartekracht en mechanobiologie

MC3T3-E1-cellen hebben fundamentele inzichten opgeleverd in de manier waarop mechanische en zwaartekrachtontlasting de biologie van osteoblasten beïnvloedt. Hughes-Fulford en Lewis lanceerden MC3T3-E1-osteoblasten aan boord van de Space Shuttle-missie STS-56 en toonden aan dat cellen die in microzwaartekracht werden geactiveerd, ondanks normale serumstimulatie een verminderde groei vertoonden, met een veranderde cytoskeletorganisatie en verminderde prostaglandinesynthese in vergelijking met de controlegroep op aarde. [20] Deze bevindingen leverden een cellulaire mechanistische basis op voor het goed gedocumenteerde verlies aan botmineraaldichtheid dat astronauten tijdens langdurige ruimtevluchten ondervinden.

In later onderzoek heeft Hughes-Fulford deze waarnemingen uitgebreid naar genexpressie en signaaltransductie, waarbij werd aangetoond dat microzwaartekracht het transcriptieprogramma van MC3T3-E1-osteoblasten zodanig verandert dat dit een verklaring biedt voor de verminderde botvorming bij afwezigheid van zwaartekrachtbelasting. [21] Samen hebben deze onderzoeken op het gebied van ruimtebiologie ervoor gezorgd dat MC3T3-E1-cellen nu worden beschouwd als het belangrijkste in-vitro-model voor het bestuderen van de cellulaire gevolgen van microzwaartekracht voor het skelet, wat van direct belang is voor de ontwikkeling van maatregelen tegen botverlies in de ruimtegeneeskunde.

In mechanobiologisch onderzoek op aarde is gebruikgemaakt van het MC3T3-E1-systeem om te begrijpen hoe vloeistofschuifspanning — een indicator voor interstitiële stroming in de lacuno-canaliculaire netwerken van bot — de differentiatie van osteoblasten reguleert. Onderzoek heeft aangetoond dat door AnnexinA6 gemedieerde autofagie een verband legt tussen mechanische stimulatie en de expressie van osteogene genen in MC3T3-E1-cellen, waardoor moleculaire details zijn verkregen over hoe botcellen fysieke belasting waarnemen en daarop reageren. [9] Door deze toepassingen op het gebied van mechanobiologie bevinden MC3T3-E1-cellen zich op het snijvlak van biofysica en regeneratieve geneeskunde.

Regeneratie van het parodontale en alveolaire bot

Botverlies als gevolg van parodontitis vormt een grote klinische uitdaging, en MC3T3-E1-cellen zijn uitgegroeid tot een essentieel in-vitro-instrument voor het testen van strategieën voor parodontale regeneratie. Kong et al. ontwikkelden een multifunctioneel koolstofdot-nanomateriaal (ASA-ALN-CD's), afgeleid van aspirine en natriumalendronaat, dat een krachtige antibiofilmwerking tegen parodontale pathogenen vertoonde en de osteogene differentiatie van MC3T3-E1-cellen onder inflammatoire omstandigheden bevorderde. [22] In een model voor parodontitis bij ratten zorgde het materiaal voor een vermindering van het alveolair botverlies en de ontsteking door de HIF-1α-signaalroute te remmen, waarbij de in vitro-gegevens van MC3T3-E1 een directe mechanistische onderbouwing vormden voor de waargenomen in vivo-effecten.

Onderzoek naar koud atmosferisch plasma richtte zich specifiek op de regeneratie van alveolair bot door MC3T3-E1-cellen bloot te stellen aan een op maat gemaakte helium-CAP-bron. Negrescu et al. toonden aan dat CAP-behandeling de celoverleving en osteogene differentiatie op een tijdsafhankelijke manier beïnvloedde, zoals vastgesteld door middel van levend/dood-testen, CCK-8-levensvatbaarheidstesten, ALP-activiteitsmetingen en morfologische karakterisering. [19] Deze resultaten hebben CAP op de kaart gezet als een kandidaat voor fysieke aanvullende therapie bij alveolaire botdefecten, waarbij MC3T3-E1-cellen de kwantitatieve differentiatiemetingen opleveren die nodig zijn om de behandelingsparameters te optimaliseren.

De met MC3T3-E1-cellen ontwikkelde methode voor driedimensionale sferoïde-kweek is direct relevant voor de tandheelkundige regeneratieve geneeskunde. Het systeem van sferoïden op een collageenscaffold, dat door Wen et al. in een model voor tandautotransplantatie werd geëvalueerd, leidde tot superieure alveolaire botregeneratie en ontstekingsremmende genexpressie in vergelijking met controles met cellen in een monolaag, wat suggereert dat de verhoogde paracriene activiteit van MC3T3-E1-sferoïden zich kan vertalen in klinisch betekenisvolle verbeteringen bij de genezing van tandalveolen. [10]

Conclusie

MC3T3-E1-cellen blijven een onmisbaar en uitgebreid gevalideerd model voor onderzoek naar botbiologie. Van hun oorspronkelijke karakterisering als een klonale pre-osteoblastlijn die in vitro kan mineraliseren, tot hun huidige toepassing in baanbrekende gebieden zoals 3D-bioprinten, medicijnafgifte op basis van nanodeeltjes, parodontale regeneratie en ruimtevaartgeneeskunde, hebben deze cellen een buitengewone wetenschappelijke veelzijdigheid getoond. Hun duidelijk gedefinieerde differentiatiestadia, robuuste markerexpressie en reactievermogen op een breed scala aan osteogene prikkels maken ze tot de referentiecellijn voor het evalueren van nieuwe biomaterialen, het identificeren van therapeutische doelwitten bij osteoporose en osteomyelitis, en het ontrafelen van de signaalroutes die de botvorming regelen. Of u nu onderzoek doet naar ferroptose, mechanobiologie of de volgende generatie implantaatcoatings, MC3T3-E1-cellen bieden het reproduceerbare, biologisch relevante platform dat uw onderzoek vereist. Bekijk de volledige specificaties of bestel MC3T3-E1-cellen rechtstreeks op cytion.com.

Belangrijkste publicaties

1. Sudo H, Kodama HA, Amagai Y (1983) In-vitro-differentiatie en verkalking in een nieuwe klonale osteogene cellijn afkomstig van de schedel van pasgeboren muizen. The Journal of Cell Biology. PMID: 6826647
2. Chen YH, Connelly JP, Florian C (2023) Profileringstechniek op basis van korte tandemherhalingen via next-generation sequencing voor de authenticatie van cellijnen. Disease Models & Mechanisms. PMID: 37712227
3. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) Door middel van SNP-array-profilering van muizencellijnen worden de oorspronkelijke stammen geïdentificeerd en komen kruisbesmetting en wijdverspreide aneuploïdie aan het licht. BMC Genomics. PMID: 25277546
4. Wang D, Christensen K, Chawla K (1999) Isolatie en karakterisering van MC3T3-E1-preosteoblast-subklonen met een verschillend differentiatie- en mineralisatiepotentieel in vitro en in vivo. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 10352097
5. Quarles LD, Yohay DA, Lever LW (1992) Verschillende proliferatieve en gedifferentieerde stadia van MC3T3-E1-cellen van muizen in kweek: een in-vitro-model van de ontwikkeling van osteoblasten. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 1414487
6. Baba TT (2000) Herstel van minerale afzettingen door dexamethason in de matrix van niet-mineraliserende osteoblastische cellen die uit MC3T3-E1-cellen zijn gesubkloneerd. Calcified Tissue International. PMID: 11136541
7. Wang C, Li Z, Yang H (2026) Apelin-13 activeert via APJ de BMP4/SMAD-route om de differentiatie van osteoblasten en de mineralisatie te bevorderen. Tissue & Cell. PMID: 42269418
8. Zhai H, Lin M, Lu C (2026) De miR-211-5p/FOXO3-as versnelt de osteogene differentiatie en de genezing van botbreuken door de Wnt/β-catenine-route te beïnvloeden. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. PMID: 42219493
9. Pei T, Su G, Yang J (2026) Correctie: Vloeistofschuifspanning reguleert de osteogene differentiatie via door annexine A6 gemedieerde autofagie in MC3T3-E1-cellen. International Journal of Molecular Sciences. PMID: 42196630
10. Wen Z, Li X, Yue L (2026) Spontaan gevormde sferoïden van mesenchymale stamcellen bevorderen de regeneratie van het alveolaire bot en remmen ontstekingen na autotransplantatie van tanden. Regenerative Therapy. PMID: 42199333
11. Gong J, Ma Y, Huang J (2026) Eiwitextract uit behaard gewei verlicht osteoporose en houdt verband met de activering van de Wnt/β-catenine-signaalroute. Pharmaceuticals (Basel, Zwitserland). PMID: 42198339
12. He L, Zheng Y, Zeng Z (2026) Effect van quercetine op osteoblastdisfunctie bij ratten met osteoporose door regulering van de via de Nrf2/SLC7A11/GPX4-route gemedieerde ferroptose. Cytotechnology. PMID: 42238059
13. Yang J, Tang Z, Chen C (2026) Structurele karakterisering en het potentieel tegen osteoporose in vivo en in vitro van twee polysacchariden uit Psoralea corylifolia L. Carbohydrate Polymers. PMID: 42173575
14. Zhang H, Zhao Y (2026) Curcumine-nanodeeltjes in combinatie met narlumosbart reguleren de wingless-type MMTV-integratiesite (wnt)/β-catenine-signaalroute in osteoblastachtige cellen. Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences. PMID: 42170973
15. Chen X, Mo R, Yang S (2026) Ontstekingscytokines en metabolische routes bij osteomyelitis: inzichten op basis van Mendeliaanse randomisatie en experimentele validatie. Advances in Clinical and Experimental Medicine. PMID: 42200571
16. Liu P, Shen J, Bian Y (2026) Een met terbium gedoteerd, 3D-geprint raamwerk van carbonaathydroxyapatiet bevordert de botregeneratie. Journal of Translational Medicine. PMID: 42260646
17. Liao J, Li Z (2026) Antibacteriële en osteogene werking van een samengestelde coating van EGCG/HAP/AgNPs op een titaniumoppervlak. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. PMID: 42216990
18. Ryu JH, Mangal U, Kim JH (2026) Dosisafhankelijke effecten van zinkoxide-nanodeeltjes op de cellulaire reactie van pre-osteoblasten. Scientific Reports. PMID: 42303653
19. Negrescu AM, Zampieri L, Martines E (2026) Tijdsafhankelijke modulatie van MC3T3-E1-pre-osteoblasten door een koud heliumplasma: een voorlopig onderzoek naar de mogelijke relevantie ervan voor de regeneratie van alveolair bot. Biomedical Physics & Engineering Express. PMID: 42208566
20. Kong J, Li H, Guo X (2026) Therapeutische werkzaamheid van ASA-ALN-CD’s bij parodontitis: van antibiofilm- en ontstekingsremmende werking tot regeneratie van het alveolaire bot. ACS Biomaterials Science & Engineering. PMID: 42213513
21. Hughes-Fulford M, Lewis ML (1996) Effecten van microzwaartekracht op de activering van de groei van osteoblasten. Experimental Cell Research. PMID: 8612673
22. Hughes-Fulford M (2001) Veranderingen in genexpressie en signaaltransductie in microzwaartekracht. Journal of Gravitational Physiology. PMID: 12638602