HROG06 T0 M2 Cellen

€ 800,00*

De producten worden bevroren verzonden in cryobuisjes met droogijs. Elk cryobuisje bevat doorgaans 3 × 10 ⁶ cellen voor hechtende lijnen of 5 × 10⁶ cellen voor suspensielijnen (zie het batch-CoA voor meer informatie).

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 300883

Veiligheidsinformatieblad

Productblad

Overeenkomst met derden

Beschrijving	HROG06 T0 M2 is een primaire humane glioblastoma multiforme (GBM) cellijn die is opgezet uit vers verwijderd tumorweefsel van een volwassen patiënt bij wie WHO-graad IV glioblastoma is vastgesteld. De aanduiding "T0" geeft aan dat het tumormonster werd verkregen tijdens de eerste chirurgische ingreep, terwijl "M2" verwijst naar het tweede onafhankelijk gegenereerde in-vitromodel dat is afgeleid van dezelfde primaire tumor. De cellijn werd ontwikkeld binnen het HROG-platform (Hansestadt Rostock Glioma), dat zich richt op het genereren van gliomaculturen met een ultralaag aantal passages die de biologische en moleculaire kenmerken van de oorspronkelijke tumor van de patiënt behouden. HROG06 T0 M2 groeit hechtend onder gestandaardiseerde kweekomstandigheden en vertoont een spindelvormige, fibroblast-achtige morfologie die typisch is voor primaire GBM-culturen. Immunofenotypische analyses van de HROG-serie tonen de expressie aan van neurale en gliale afstammingsmarkers zoals gliaal fibrillair zuur eiwit (GFAP), nestine en vimentine, wat de astrocytaire oorsprong van de tumor ondersteunt. Moleculaire karakterisering binnen het HROG-platform omvat de beoordeling van klinisch relevante biomarkers, zoals MGMT-promotor-methylatiestatus, EGFR-amplificatie en mutatieprofilering van genen, waaronder TP53, IDH1/2, KRAS en BRAF, wat het behoud van tumor-geassocieerde genomische veranderingen in vroege passageculturen bevestigt. HROG06 T0 M2 is gebruikt voor in-vitro-evaluatie van therapeutische reacties op standaardbehandelingen voor glioblastoom, waaronder alkylerende chemotherapeutische middelen en gerichte remmers. Vergelijkende analyses binnen de HROG-collectie wijzen op een stabiele morfologie, reproduceerbare groeikinetiek en consistente geneesmiddelgevoeligheidsprofielen in vroege passages, wat de geschiktheid ervan als translationeel onderzoeksmodel ondersteunt. Als een van patiënten afkomstige GBM-cellijn met een laag aantal passages biedt HROG06 T0 M2 een klinisch relevant platform voor het bestuderen van de biologie van glioblastoom, tumorheterogeniteit en mechanismen van behandelingsresistentie.
Organisme	Mens
Weefsel	Hersenen
Ziekte	Glioblastoom

Etniciteit	Kaukasisch
Groei eigenschappen	Aanhangend

Citeren	HROG06 T0 M2 (Cytion catalogusnummer 300883)
Bioveiligheidsniveau	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccessie	CVCL_B7FP
Deposant	M. Linnebacher

Kweekmedium	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Supplementen	Vul het medium aan met 10% FBS
Scheidingsreagens	Accutase
Subcultuur	Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Middel invriezen	Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Cellen ontdooien en kweken	Controleer of de flacon bij levering diepgevroren blijft, aangezien de cellen op droog ijs worden verzonden om optimale temperaturen tijdens het transport te behouden. Bewaar het cryoflesje na ontvangst onmiddellijk bij temperaturen lager dan -150 °C om de integriteit van de cellen te behouden, of ga verder met stap 3 als onmiddellijke kweek vereist is. Voor onmiddellijke kweek: ontdooi de flacon snel door deze onder te dompelen in een waterbad van 37 °C met schoon water en een antimicrobieel middel, waarbij u 40-60 seconden zachtjes schudt totdat er een klein ijsklontje overblijft. Voer alle volgende stappen uit onder steriele omstandigheden in een stromingskap en desinfecteer de cryoflacon met 70% ethanol voordat deze wordt geopend. Open voorzichtig de gedesinfecteerde flacon en breng de celsuspensie over in een centrifugebuis van 15 ml met 8 ml kweekmedium op kamertemperatuur en meng voorzichtig. Centrifugeer het mengsel gedurende 3 minuten bij 300 x g om de cellen te scheiden en gooi het supernatant met resterend vriesmedium voorzichtig weg. Resuspendeer de celpellet voorzichtig in 10 ml vers kweekmedium. Verdeel voor adherente cellen de suspensie over twee T25-kweekkolven; breng voor suspensiekweken al het medium over in één T25-kweekkolf om effectieve celinteractie en -groei te bevorderen. Houd u aan de vastgestelde subcultuurprotocollen voor continue groei en onderhoud van de cellijn, om betrouwbare experimentele resultaten te garanderen.
Incubatieatmosfeer	37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.
Kolfcoating	Geen
Invriesprocedure	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Verzendvoorwaarden	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Opslagomstandigheden	Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Steriliteit	Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Houd er rekening mee dat deze cellijn niet beschikbaar is onder een standaard MTA van Cytion, omdat hiervoor een overeenkomst met een derde partij nodig is en/of er moet worden onderhandeld met de oorspronkelijke licentiegever.

HROG06 T0 M2 Cellen

Algemene informatie

Kenmerken

Regelgevende gegevens

Biomoleculaire gegevens

Omgaan met

Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA

Overeenkomst met derden