DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 is een alom erkend en veelgebruikt basismedium in celculturen voor biologisch onderzoek. Het dient als fundamentele voedingsbron voor de groei van diverse zoogdiercellijnen, met name wanneer het wordt aangevuld met foetaal runderserum (FBS).
Deze unieke formulering combineert Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) en Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in een precieze verhouding van 1:1. De toevoeging van L-glutamine verbetert de samenstelling nog verder.
DMEM, afgeleid van Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), biedt een hogere concentratie aan aminozuren en vitamines in vergelijking met zijn voorganger. Ham's F-12 daarentegen is gebaseerd op Ham's F-10-medium en biedt een aanvullende reeks essentiële componenten.
Om een optimale celgroei te ondersteunen, is het gebruikelijk om DMEM:Ham's F12 aan te vullen met FBS in een concentratie van doorgaans 5-10%. Deze toevoeging is noodzakelijk omdat het medium geen groeihormonen, lipiden en eiwitten bevat die cruciaal zijn voor de celontwikkeling.
DMEM:Ham's F12 bevat een pH-buffersysteem en wordt vaak aangevuld met fenolrood, een pH-indicator. Gekweekte cellen in DMEM:Ham's F12, of elk ander medium dat gebruikmaakt van het bicarbonaatbuffersysteem, vereisen een gecontroleerde CO2-omgeving van 5-10% om de juiste pH-waarden te handhaven.
Kwaliteitscontrole
- Steriel gefilterd
Opslag en houdbaarheid
- Bewaren bij +2 °C tot +8 °C, beschermd tegen licht.
- Na opening bewaren bij 4 °C en binnen 6–8 weken gebruiken.
Verzendvoorwaarden
- Omgevingstemperatuur
Bewaring
- Bewaar gekoeld bij +2 °C tot +8 °C in het donker. Vermijd bevriezing en herhaaldelijk opwarmen tot +37 °C, aangezien dit de productkwaliteit vermindert.
- Verwarm het medium niet boven 37 °C en gebruik geen ongecontroleerde warmtebronnen zoals magnetrons.
- Als slechts een deel van het medium wordt gebruikt, neem dan de benodigde hoeveelheid en verwarm deze tot kamertemperatuur voor gebruik.
Samenstelling
| Categorie | Bestanddelen | Concentratie (mg/L) |
| Aminozuren | Glycine | 18,75 |
| L-alanine | 4,45 | |
| L-Arginine HCl | 147,50 | |
| L-asparagine H₂O | 7,50 | |
| L-asparaginezuur | 6,65 | |
| L-cysteïne HCl H₂O | 17,56 | |
| L-Cystine 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutaminezuur | 7,35 | |
| L-glutamine | 365,00 | |
| L-histidine HCl H₂O | 31,48 | |
| L-Isoleucine | 54,47 | |
| L-Leucine | 59,05 | |
| L-Lysine HCl | 91,25 | |
| L-methionine | 17,24 | |
| L-fenylalanine | 35,48 | |
| L-proline | 17,25 | |
| L-serine | 26,25 | |
| L-Threonine | 53,45 | |
| L-tryptofaan | 9,02 | |
| L-Tyrosine 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valine | 52,85 | |
| Vitaminen | D-Biotine | 0,0035 |
| Cholinechloride | 8,98 | |
| D-Calciumpantothenaat | 2,24 | |
| Foliumzuur | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nicotinamide | 2,02 | |
| Pyridoxine HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal HCl | 2,00 | |
| Riboflavine | 0,219 | |
| Thiamine HCl | 2,17 | |
| Vitamine B12 | 0,68 | |
| Anorganische zouten | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Overige componenten | D-glucose | 3151,00 |
| Hypoxanthine | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolzuur | 0,042 | |
| Liponzuur | 0,105 | |
| Fenolrood-natriumzout | 8,63 | |
| Putrescine-2-HCl | 0,081 | |
| Natrium-pyruvaat | 55,00 | |
| Thymidine | 0,365 |