SW-620 šūnas — ietekme uz resnās zarnas vēža pētījumiem un eksperimentiem
SW-620 šūnas veido cilvēka kolorektālā vēža šūnu līniju, kas atbilst Dukes C stadijai. Tām piemīt augsts tumorogēnais un metastātiskais potenciāls. Tāpēc tās plaši izmanto vēža un toksikoloģijas pētījumos. Šajā rakstā tiks izskatīti kolorektālā vēža šūnu līnijas SW-620 pamataspekti.
- Augšanas barotne
- SW-620 šūnu ideālai augšanai izmanto DMEM barotni, kas papildināta ar 10 % liellopu embriju serumu, 4,5 g/l glikozes, 4 mM L-glutamīna, 1,5 g/l NaHCO3 un 1,0 mM nātrija piruvāta. Barotni jāmaina divas reizes nedēļā.
- Dubultošanās laiks
- SW-620 šūnu dubultošanās laiks ir no 20 līdz 26 stundām.
- Augšanas veids
- SW-620 šūnu līnija ir adhezīva. Šūnas veido monoslāņus uz kultūras trauka virsmas.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- BSL-1
- Piegādātājs
- Cytion — Pasūtīt SW-620
SW-620 šūnu izcelsme un vispārējās īpašības
Izcelsme un vispārējās īpašības ir galvenā informācija par šūnu līniju. Iepriekšēja informācija par to ir būtiska pētniekiem, kuri apsver tās iekļaušanu savos pētījumos. Šajā raksta sadaļā tiks izskaidrotas SW-620 šūnu līnijas galvenās īpašības un izcelsme. Galvenokārt jūs uzzināsiet: Kas ir SW620 šūnu līnija? Kādas ir SW-620 šūnu līnijas īpašības? Kāda ir SW-620 izcelsme? Kāds ir SW-640 šūnu izmērs? Un kāda ir atšķirība starp SW-620 un SW-480?
- SW-620, kolorektālās karcinomas šūnu līnija, cēlusies no mediātizēta limfmezgla bojājuma 51 gadu vecam kaukāziešu vīrietim ar resnās zarnas adenokarcinomu [1]. Šo šūnu līniju deponēja A. Leibovitz un kolēģi.
- SW-620 šūnām piemīt epitēlija morfoloģija. Tās sastāv no mazām, apaļām un bipolārām šūnām, kurām ir mikrovili.
- SW-620 šūnu diametrs ir 14,4 ± 0,3 μm.
- Šīm resnās zarnas vēža šūnām piemīt hiperdiploīds kariotips. SW-620 šūnu modālais hromosomu skaits ir 50, kas var svārstīties no 45 līdz 53.
SW-480 pret SW-620
SW-480 un SW-620 ir kolorektālā vēža šūnu līnijas. SW-480 tika iegūta no primārā audzēja, savukārt SW-620 tika izveidota no metastāzēm skartā limfmezgla. Turklāt no šīm šūnu līnijām izveidotie ksenotransplantāti atšķiras viens no otra. SW-620 ksenotransplantāti veido audzēja šūnu slāņus, savukārt SW-480 ksenotransplantāti veido dziedzerveida struktūras [2]. Abām šūnu līnijām ir identiski mutāciju profili.
SW-620 šūnas: informācija par kultivēšanu
Ir ļoti svarīgi izprast šūnu līnijas audzēšanas pamatprincipus, jo tas nodrošina pareizu rīcību un uzturēšanu. Šajā sadaļā ir minēti daži galvenie punkti par SW-620 audzēšanu, kas var palīdzēt jums uzzināt: Kas ir SW-620 barotne? Kāds ir SW-620 šūnu dubultošanās laiks? Kā kultivēt SW-620 šūnas?
Galvenie punkti par SW-620 šūnu kultivēšanu
Dubultošanās laiks:
SW-620 dubultošanās laiks ir no 20 līdz 26 stundām.
Pielipušas vai suspensijā:
SW-620 šūnu līnija ir adhezīva. Šūnas veido monoslāņus uz kultivēšanas trauka virsmas.
Subkultivācijas attiecība:
SW-620 šūnas tiek subkultivētas ar sadalīšanas koeficientu 1:3. Adherentās šūnas tiek skalotas ar fosfāta sāls buferu (1X) bez magnija un kalcija. Pēc tam pievieno pasāžēšanas šķīdumu Accutase, un šūnas inkubē istabas temperatūrā 8–10 minūtes. Pievieno svaigu barotni, un šūnas centrifugē. Pēc tam ievāktās šūnas uzmanīgi atkārtoti suspendē augšanas barotnē un sadala jaunās kolbās turpmākai audzēšanai.
Augšanas barotne:
SW-620 šūnu ideālai augšanai izmanto DMEM barotni, kas papildināta ar 10 % liellopu augļa serumu, 4,5 g/l glikozes, 4 mM L-glutamīna, 1,5 g/l NaHCO3 un 1,0 mM nātrija piruvāta. Barotni jāmaina divas reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:
SW-620 resnās zarnas karcinomas šūnas kultivē mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā un 5 % CO₂ koncentrācijā.
Uzglabāšana:
Pēc sasaldēšanas SW-620 šūnas uzglabā temperatūrā zem -150 °C ultra-zemas temperatūras saldētavās vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē.
Sasaldēšanas process un barotne:
CM-1 vai CM-ACF ir ideāla sasaldēšanas vide SW-620 šūnām. SW-620 šūnu sasaldēšanai tiek izmantots lēns sasaldēšanas process. Tas ļauj temperatūrai pazemināties tikai par 1 °C minūtē, tādējādi aizsargājot šūnu dzīvotspēju.
Atkausēšanas process:
Sasaldētās SW-620 šūnas atkausē ūdens vannā, kas iepriekš iestatīta uz 37 °C, 40–60 sekundes. Pēc atkausēšanas pievieno kultivēšanas vidi un šūnas centrifugē, lai atbrīvotos no sasaldēšanas vides elementiem. Pēc tam iegūto šūnu nogulsni atkārtoti suspendē augšanas vidē, un šūnas pārlej jaunā kolbā turpmākai audzēšanai.
Bioloģiskās drošības līmenis:
SW-620 kultūru apstrādei ir nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa (BSL-1) laboratorija.
SW-620 šūnu priekšrocības
Priekšrocības
- Kolorektālā karcinoma modelēšana: SW-620 šūnas kalpo kā būtisks kolorektālās karcinomas modelis, ļaujot padziļināti pētīt audzēja un metastāžu mehānismus, jo īpaši ksenotransplantātu modeļos.
- Vēža pētniecība un terapija: Šīs šūnas atvieglo vēža bioloģijas, ķīmijterapijas efektivitātes un šūnu nāves mehānismu, tostarp anoikīzes, izpēti.
- CD133 ekspresija: CD133 ekspresija SW-620 šūnās sniedz ieskatu vēža cilmes šūnu bioloģijā un tās ietekmē uz audzēju veidošanos un rezistenci pret terapiju.
- Plūsmas citometrijas pielietojumi: Plūsmas citometrijas analīze šīm šūnām ļauj novērtēt šūnu populācijas, apoptozes līmeņus un proliferāciju.
SW-620 šūnu līnijas izmantošana pētniecībā
Turpmāk ir aprakstītas pētniecības jomas, kurās SW-620 šūnas ir daudzsološas:
- Vēža pētījumi: SW-620 ir nenovērtējams šūnu modelis kolorektālā vēža bioloģijas izpētei. Pētnieki izmanto šo in vitro modeli, lai izpētītu molekulāros mehānismus, kas virza vēža šūnu augšanu, invāziju un migrāciju. Turklāt to var izmantot, lai pētītu SW620 šūnu līnijas mutācijas, piemēram, p53, APC un KRAS. 2021. gadā veiktajā pētījumā tika izvērtēta SW620 šūnu līnijas KRAS mutācijas ietekme uz jauna medikamenta FL118 jutību. Tika novērots, ka KRAS pārmērīga ekspresija palielina FL118 izraisīto kolorektālo šūnu apoptozi, savukārt tās apklusināšana to samazina. Šie rezultāti var palīdzēt prognozēt FL118 lietošanu resnās zarnas karcinomas pacientiem ar KRAS mutāciju [3].
- Zāļu skrīnings un izstrāde: SW-620 šūnu līniju plaši izmanto, lai veiktu skrīningu un pārbaudītu potenciālos zāļu kandidātus pret resnās zarnas vēzi. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai novērtētu zāļu citotoksicitāti un efektivitāti, kas var veicināt mērķtiecīgu ārstēšanas pieeju izstrādi. Piemēram, vienā pētījumā, izmantojot SW-620 šūnu līniju, tika pētīta kanēļa un krustnagliņu atsevišķu ēterisko eļļu savienojumu pretkolorektālā vēža iedarbība [4].
- Metastāžu pētījumi: Ņemot vērā augsto metastāžu veidošanās potenciālu, SW-620 šūnas var izmantot, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas ir vēža šūnu metastāžu pamatā. Piemēram, Zhou Yang un viņa kolēģi atklāja Grainy-head-like 2 (GRHL2) gēna lomu resnās zarnas vēža progresēšanā un metastāzē. Viņi izvirzīja hipotēzi, ka GRHL2 gēna ekspresija kavē resnās zarnas vēža progresēšanu un metastāzi, nomācot epitēlija-mezohinēzes pāreju (EMT) [5].
Aizsargājiet savu SW620 šūnu līniju
SW-620 šūnas: Publikācijas
Šajā sadaļā tiks apkopotas dažas interesantas un visbiežāk citētas pētnieciskās publikācijas par SW-620 šūnām.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „Molecular Carcinogenesis“ (2017), tika izvirzīts pieņēmums, ka polifenola urolitīna A lietošana izraisa autofāgiju kolorektālā vēža šūnu līnijā SW620. Tā arī nomāca vēža šūnu metastāzes.
Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā „Oncology Letters“ (2018), izmantojot SW-620 šūnas, tika pētīts tetrandrīna — bis-benzilizohinolīna alkaloīda — pretmetastāžu potenciāls.
CDCA3 veicina šūnu proliferāciju, aktivizējot NF-κB/ciklīna D1 signālceļu kolorektālajā vēzī
Šis raksts ir publicēts žurnālā „Biochemical and Biophysical Research Communications“ (2018). Tajā izvirzīts pieņēmums, ka CDCA3 (ar šūnu dalīšanās ciklu saistītais 3) gēns ir paaugstināts kolorektālā vēža šūnās un veicina to proliferāciju, aktivizējot NF-κB signālceļu.
Žurnālā „International Journal of Molecular Sciences“ (2021) publicētajā pētījumā tika izpētīta bispecifiskās antivielas (ABL001) un ķīmijterapijas zāļu sinerģiskā ietekme uz audzēja progresēšanu SW620 ksenotransplantāta modelī.
Šis raksts ir publicēts žurnālā „Cells“ (2018). Tajā tika pētīta Bacopa monnieri, Bacopaside II ekstrakta pretvēža aktivitāte SW-620 un citās kolorektālā vēža šūnās.
Resursi par SW-620 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli
Tālāk ir uzskaitīti daži tiešsaistes resursi, kuros aprakstītas SW-620 resnās zarnas vēža šūnas.
- SW-620 transfekcija: Šajā rakstā īsumā aprakstīts protokols SW-620 šūnu līnijas stabilai transfekcijai.
Šajā saitē ir atrodams SW-620 šūnu kultivēšanas protokols.
- SW-620 šūnu kultūras protokols: Šī saite sniegs pamatinformāciju par SW-620 šūnu līniju. Tā palīdzēs arī apgūt protokolu par SW-620 šūnu subkultivēšanu un krioprezervētu un proliferējošu SW-620 kultūru apstrādi.
- Šūnu kultivēšanas protokoli: Šis video ir lielisks avots, lai apgūtu adhezīvo šūnu pārstādīšanas, sasaldēšanas un atkausēšanas protokolus.
Biežāk uzdotie jautājumi par SW620 šūnām
SW620 šūnas ir cilvēka kolorektālās adenokarcinomas šūnas, kas iegūtas no resnās zarnas vēža pacienta limfmezglu metastāzēm, tāpēc tās ir nozīmīgas vēža pētījumiem.
SW620 šūnu diametrs parasti ir no 15 līdz 30 mikrometriem, lai gan tas var atšķirties atkarībā no kultūras apstākļiem.
SW620 šūnās ir vairākas mutācijas, tostarp TP53 gēna mutācijas. Šīs mutācijas var ietekmēt šūnu morfoloģiju, kā rezultātā populācijā veidojas dažādas formas un izmēri.
SW620 un SW480 šūnas ir iegūtas no resnās zarnas adenokarcinomas, bet SW620 šūnas ir no metastātiskas vietas, bet SW480 šūnas ir no primārā audzēja. Šī atšķirība var ietekmēt to ģenētisko uzbūvi, uzvedību kultūrā un reakciju uz ārstēšanu.
SW620 šūnas ir ļoti noderīgas audzēju ģenēzes izpētē, jo īpaši tāpēc, ka tās spēj veidot audzējus peļu ksenogrāfa modeļos un tām ir vēža cilmes šūnu marķieri, piemēram, CD133.
Jā, SW620 šūnas tiek izmantotas, lai pētītu šūnu nāves ceļus, tostarp apoptozi un anoikozi, kā tās reaģē uz dažādām vēža terapijām un vides apstākļiem.
SW620 šūnu augstais metastatiskais potenciāls un to izcelsme no metastātiska limfmezgla padara tās par piemērotu modeli resnās zarnas vēža izplatības izpētei.
Plūsmas citometrija ļauj pētniekiem analizēt SW620 šūnu īpašības, tostarp CD133 ekspresijas modeļus un apoptozes vai jutības pakāpi pret anoikozi.
SW620 šūnām ir augsts audzēja potenciāls, kad tās ievieto imūndeficītu peļu ksenogrāftu modeļos, tāpēc tās ir vērtīgas vēža progresēšanas pētījumiem in vivo.
Atsauces
- Siekmann, W., et al., Lidokaīna un ropivakaina ietekme uz primārajām (SW480) un metastātiskajām (SW620) resnās zarnas vēža šūnu līnijām. Oncol Lett, 2019. 18(1): 395.–401. lpp.
- Hewitt, R.E., et al., Kolorektālā vēža progresēšanas modeļa validācija. J Pathol, 2000. 192(4): 446.–54. lpp.
- Thangaiyan, R., et al., Kras mutāciju apakštipi ievērojami ietekmē kolorektālā vēža šūnu jutību pret FL118, jaunu survivīna, Mcl-1, XIAP, cIAP2 un MdmX inhibitoru. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): 7458. lpp.
- Petrocelli, G., et al., Molekulas, kas atrodamas augu ēteriskajās eļļās, kolorektālā vēža (CRC) profilaksei un ārstēšanai. Molecules, 2021. 26(4): 885. lpp.
- Yang, Z., et al., GRHL2 kavē kolorektālā vēža progresēšanu un metastāzes, nomācot epitēlija-mezenhīma pāreju. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): 1195.–1205. lpp.