RBL-2H3 šūnas — RBL-2H3 nozīme alerģiskajā reakcijā un imunoloģiskajos pētījumos
RBL-2H3 šūnu līnija ir no žurkām iegūta bazofīlo leikēmijas šūnu līnija, ko izmanto imunoloģijas pētījumos. Tā kalpo kā modelis, lai pētītu tūskas šūnu fizioloģiju, uzvedību un funkcijas. Šīs šūnas izmanto arī alerģisko reakciju, imunoloģisko procesu, kā arī zāļu testēšanas un izstrādes pētījumos.
- Audzēšanas barotne
- RBL-2H3 šūnu kultivēšanai izmanto EMEM barotni, kas satur 10 % FBS, 2 mM L-glutamīnu, 2,2 g/l NaHCO3 un EBSS sāli. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
- Šūnu skaita dubultošanās laiks
- RBL-2H3 tūskas šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 50–60 stundas.
- Augšanas veids
- RBL-2H3 ir adhezīva šūnu līnija.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- BSL-2
- Piegādātājs
- Cytion — Pasūtīt RBL-2H3
- RBL-2H3 šūnas: izcelsme un vispārējās īpašības
- RBL-2H3 šūnas: informācija par kultivēšanu
- RBL-2H3 bazofilu šūnu līnijas priekšrocības un ierobežojumi
- RBL-2H3 šūnu līnija: imūnoloģiskās pētniecības stūrakmens
- RBL-2H3 šūnu līnija: būtiskākie jautājumi pētniekiem
- Atsauces
- RBL-2H3 šūnu līnija padziļinātiem imunoloģiskajiem pētījumiem
- RBL-2H3 šūnas: pētniecības publikācijas
- Resursi par RBL-2H3 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli
- Bieži uzdotie jautājumi
RBL-2H3 šūnas: izcelsme un vispārējās īpašības
Pirms bazofilu šūnu līnijas izmantošanas savos pētījumos, jums jāzina tās izcelsme un vispārējās īpašības. Šajā raksta sadaļā jūs uzzināsiet par RBL-2H3 šūnu pamatiem. Piemēram, kas ir RBL-2H3 tūskas šūnas? Kāpēc izmantot RBL-2H3 šūnas? Kas ir RBL-2H3 šūnas žurku bazofīlajā leikēmijā? Kāda ir RBL-2H3 morfoloģija? Vai RBL-2H3 šūnas ir nemirstīgas?
- RBL-2H3 ir bazofīlās leikēmijas šūnas, kas 1978. gadā tika iegūtas no Wistar žurku bazofīlajām šūnām Nacionālā zobārstniecības pētniecības institūta Imunoloģijas laboratorijā.
- RBL-2H3 šūnām piemīt c-kit receptora tirozīna kināze un mastocītu proteāzes II (RMCP-II) receptori, kas tās padara par potenciālu mastocītu modeli. Tāpēc tās parasti sauc par mastocītiem, neskatoties uz to, ka tās cēlušās no žurku bazofiliem [1].
- Aktivācijas gadījumā tās izdala histamīnu un citus mediatorus, kā arī ekspresē augstas afinitātes IgE receptorus.
- RBL-2H3 šūnām ir fibroblastu līdzīga morfoloģija.
RBL-2H3 šūnas: informācija par kultivēšanu
Šī sadaļa palīdzēs jums iepazīties ar dažiem galvenajiem aspektiem, kas saistīti ar RBL-2H3 šūnu līnijas kultivēšanu. Jūs uzzināsiet: kāds ir RBL-2H3 šūnu dubultošanās laiks? Kāds ir RBL-2H3 šūnu sēšanas blīvums? Kāds ir RBL-2H3 šūnu kultivēšanas protokols? Kāda ir RBL-2H3 šūnu līnijas sasaldēšanas barotne?
Galvenie punkti RBL-2H3 šūnu kultivēšanā
Populācijas dubultošanās laiks:
RBL-2H3 tūskas šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 50–60 stundas.
Pielipušas vai suspensijā:
RBL-2H3 ir adhezīva šūnu līnija.
Subkultivācijas attiecība:
RBL-2H3 šūnām sadalīšanas attiecība tiek uzturēta diapazonā no 1:2 līdz 1:4. Adhēzīvās šūnas tiek mazgātas ar magnija un kalcija nesaturošu 1x PBS šķīdumu. Pārsēšanas šķīdumā pievieno Accutase, un šūnas 10 minūtes tur pie istabas temperatūras, lai tās atdalītos no kultūras trauka dibena. Pievieno svaigu barotni, un šūnas centrifugē. Savāktās šūnas uzmanīgi atkārtoti suspendē svaigā barotnē un ielej jaunās kolbās, kas satur augšanas barotni.
Augšanas barotne:
RBL-2H3 šūnu kultivēšanai izmanto EMEM barotni, kas satur 10 % FBS, 2 mM L-glutamīnu, 2,2 g/l NaHCO₃ un EBSS sāli. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:
RBL-2H3 šūnas kultivē mitrinātā inkubatorā, kas iestatīts uz 37 °C temperatūru un pieslēgts 5 % CO₂ avotam.
Uzglabāšana:
Šūnas uzglabā šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai elektriskajā saldētavā temperatūrā zem -150 °C, lai ilgtermiņā saglabātu šūnu dzīvotspēju.
Sasaldēšanas process un barotne:
RBL-2H3 šūnu sasaldēšanai, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu, tiek izmantota CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas vide. Īsumā šī metode ļauj temperatūru pazemināt par 1 °C minūtē un pasargā šūnas no šoka.
Atkausēšanas process:
RBL-2H3 šūnas atkausē iepriekš iestatītā ūdens vannā (37 °C) aptuveni 60 sekundes. Pēc tam šūnas pievieno svaigai kultivēšanas videi un centrifugē. Šis solis ir būtisks, lai noņemtu sasaldēšanas vides sastāvdaļas. Tālāk šūnu nogulsnes atkārtoti suspendē augšanas vidē, un šūnas pārnes kolbā kultivēšanai.
Bioloģiskās drošības līmenis:
RBL-2H3 šūnas jāuzglabā 1. bioloģiskās drošības laboratorijās.
Publicēts: 2023 | Pēdējā pārskatīšana: 2026. gada maijs
RBL-2H3 bazofilu šūnu līnijas priekšrocības un ierobežojumi
RBL-2H3 šūnas tiek plaši izmantotas imunoloģiskajos pētījumos. Šajā sadaļā ir aprakstītas to galvenās priekšrocības un ierobežojumi.
Priekšrocības
- Viegli kultivējamas: RBL-2H3 šūnas var viegli kultivēt un uzturēt laboratorijas apstākļos. Tas veicina rentablus un reproducējamus eksperimentus, padarot tās par populāru izvēli sākotnējiem pētījumiem imunoloģijā.
Ierobežojumi
- Ne-cilvēciskā izcelsme: Tā kā RBL-2H3 šūnas ir iegūtas no žurku bazofiliem, tās var neprecīzi atspoguļot cilvēka bioloģiskos procesus, kas var ierobežot to piemērojamību pētījumos, kas veltīti tieši cilvēkam. Tādēļ, ekstrapolējot rezultātus uz cilvēka organismu, dati ir jāinterpretē ar piesardzību.
- Vienkāršots tūskas šūnu modelis: Lai gan šīs šūnas nodrošina pamata modeli tūskas šūnu funkciju izpētei, tās pilnībā neatspoguļo tūskas šūnu mijiedarbības sarežģīto dabu cilvēka imūnsistēmā. Tādējādi tās var neatbilstoši modelēt tūskas šūnu daudzpusīgās lomas imūnreakcijās vai slimību stāvokļos in vivo.
RBL-2H3 šūnu līnija: imūnoloģiskās pētniecības stūrakmens
Bazofilu un mastocītu pētījumi, izmantojot RBL-2H3 šūnu līniju
No Rattus norvegicus iegūtā RBL-2H3 šūnu līnija kalpo kā galvenais modelis bazofilu un mastocītu bioloģijas pētīšanai. Šie žurku mastocīti sniedz būtisku ieskatu mastocītu mediatoru atbrīvošanā, kas ir ļoti svarīga, lai izprastu alerģiskus stāvokļus, piemēram, alerģisko rinītu. Izmantojot šīs šūnas, pētnieki izpēta šūnu receptoru dinamiku un imūnoloģisko sinapšu veidošanos, kam ir centrālā nozīme imūnsistēmas reakcijā uz alergēniem. Interesantā pētījumā, kas publicēts 2019. gadā, tika izmantota RBL-2H3 šūnu līnija un pētīti mehānismi, kas ir pamatā pseidoalerģiskajām reakcijām, ko izraisa Qingkailing injekcija. Pētījumā tika konstatēts, ka PI3K-RAC1 signālkaskāde daļēji izraisa šo alerģisko reakciju šūnās [2].
Imunoloģisko sinapšu dinamika alerģijas pētījumos
RBL-2H3 šūnas, kuras plaši izmanto imūnoloģijas pētījumos, ir īpaši efektīvas imūnoloģisko sinapšu dinamikas izpētē. Tas palīdz noskaidrot imūnsistēmas komunikācijas procesus, un to var piemērot gan perifērās asins, gan peritoneālo tūskas šūnu pētījumos. Šādi pētījumi ir būtiski, lai vispusīgi izprastu imūnreakciju gan sistēmiskā, gan lokalizētā kontekstā.
Zāļu skrīninga un toksicitātes testēšana
Zāļu skrīningā un testēšanā tiek izmantota RBL šūnu reaģētspēja uz dažādiem stimuliem, tostarp pētot, kā H₂O₂ inhibē IgE-mediētas reakcijas. Šīm šūnām ir būtiska loma tādu slimību kā streptokoku infekciju ārstēšanas metožu izstrādē, kur mitis grupas streptokoki inhibē mastocītu aktivāciju. Turklāt pētnieki, izmantojot šo RBL 2H3 mc modeli, novērtē dažādu vielu, tostarp ķīmisko vielu, zāļu un nanodaļiņu, toksisko iedarbību. Piemēram, nesenā pētījumā (2022) tika novērtēta polistirola mikroplastmasas citotoksicitāte attiecībā uz RBL-2H3 šūnām. Tika konstatēts, ka mikroplastmasa bojā RBL-2H3 šūnu organellas un veicina šūnu nāvi [3]. Vēl vienā 2021. gada pētījumā, izmantojot RBL-2H3 mc modeli, tika novērtēts dabiskā produkta — neferīna — pretalerģiskais un pretiekaisuma potenciāls. Pētījums atklāja, ka šim savienojumam piemīt labas pretalerģiskas un pretiekaisuma īpašības [4].
Progresīvas imunoloģisko mērījumu metodes
RBL-2H3 šūnu konsekventā un izmērāmā mediatoru atbrīvošanās padara tās ideāli piemērotas ērtam fluorimetrijas pētījumam, kas atvieglo precīzus un pareizus mērījumus, kuri ir būtiski slimību izpētei un terapeitisko līdzekļu novērtēšanai.
RBL-2H3 šūnu līnija, kuras izcelsme ir Rattus norvegicus, ir nenovērtējams resurss gan fundamentālajos, gan lietišķajos pētījumos imunoloģijas jomā. Tā piedāvā plašas iespējas paplašināt mūsu zināšanas un uzlabot imūnoloģisko slimību ārstēšanu.
RBL-2H3 šūnu līnija padziļinātiem imunoloģiskajiem pētījumiem
RBL-2H3 šūnas: Pētniecības publikācijas
Tālāk ir minētas dažas interesantas pētniecības publikācijas, kurās aprakstītas RBL-2H3 tūskas šūnas:
Narirutīna inhibējošā iedarbība uz RBL-2H3 šūnu degranulāciju
Šis pētījums tika publicēts žurnālā „Immunopharmacology and Immunotoxicology” (2021). Pētījumā tika izvirzīta hipotēze, ka dabiskais savienojums narirutīns inhibē RBL-2H3 šūnu degranulāciju, regulējot NF-κB, MAPK un tirozīna kināzes signālceļu.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „International Journal of Molecular Sciences” (2020), tika izvirzīts pieņēmums, ka apigenīns ievērojami nomāc RBL-2H3 un RAW264.7 šūnu alerģiskās un iekaisuma reakcijas. Tādējādi tas varētu kalpot kā potenciāls līdzeklis imūnsistēmai saistītu slimību apkarošanai.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „International Journal of Molecular Sciences” (2021), tika novērtēta dabiskā savienojuma saponarīna pretalerģiskā un pretiekaisuma iedarbība, izmantojot dažādas šūnu līnijas, tostarp RBL-2H3.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine” (2014), tika konstatēts, ka Benchalokawichian ekstrakti un daži aktīvie komponenti potenciāli inhibē β-heksosaminidāzes atbrīvošanos no RBL-2H3 šūnām.
Šis raksts tika publicēts 2018. gadā žurnālā „International Journal of Biological Macromolecules”. Pētījumā tika norādīts, ka dabīgais produkts spirulina maxima inhibē RBL 2H3 degranulāciju, novēršot MAPK un AKT fosforilāciju.
Resursi par RBL-2H3 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli
RBL-2H3 ir plaši izmantota tūskas šūnu līnija. Šeit ir minēti pieejamie resursi, kas aptver RBL-2H3 kultivēšanas un transfekcijas protokolus:
- RBL-2H3 mastocītu modelis: Šis pētījuma raksts ietver protokolus par RBL-2H3 kultūru uzturēšanu un RBL-2H3 transfekciju.
Šeit ir daži resursi, kuros izskaidrots RBL-2H3 šūnu kultivēšanas protokols:
- RBL-2H3 šūnas: Šī tīmekļa vietne ir noderīga, lai apgūtu RBL-2H3 šūnu līnijas kultivēšanas protokolus. Turklāt tajā ir iekļauta informācija par RBL-2H3 šūnu barotnēm un kultivēšanas apstākļiem.
RBL-2H3 šūnu līnija: svarīgākie jautājumi un atbildes pētniekiem
Atsauces
- Passante, E. un N. Frankish, RBL-2H3 šūnu līnija: tās izcelsme un piemērotība kā tūskas šūnu modelis. Inflamm Res, 2009. 58(11): 737.–745. lpp.
- Li, Q. u. c., Pseudoalerģiska reakcija, ko izraisa Qingkailing injekcija, daļēji caur PI3K-Rac1 signālceļu RBL-2H3 šūnās. Toxicology Research, 2019. 8(3): 353.–360. lpp.
- Liu, L., et al., Polistirola mikro- (nano-) plastmasas daļiņas bojā RBL-2H3 šūnu organellas un veicina MOAP-1 darbību, izraisot apoptozi. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: 129550. lpp.
- Chiu, K.-M., et al., Neferīna pretalerģiskā un pretiekaisuma iedarbība uz RBL-2H3 šūnām. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): 10994. lpp.