CTX šūnas
Vispārīga informācija
| Apraksts | CTX (arī pazīstama kā CTX0E03) ir nosacīti nemirstīga cilvēka neironu cilmes šūnu līnija, kas iegūta no pirmā trimestra cilvēka augļa garozas neiroepitelija. Šī līnija tika izveidota, retrovirāli integrējot c-mycERTAM fūzijas transģēnu, kas veicina šūnu proliferāciju tikai 4-hidroksitamoksifēna (4-OHT) klātbūtnē. 4-OHT trūkuma gadījumā un mitogēnu nesaturošā vidē CTX0E03 šūnas pārtrauc augšanu un diferenciējas neironos un astrocītos, saglabājot daudzpotento diferenciācijas spēju. Šī līnija ir klonāla, tai ir normāls cilvēka kariotips (46,XY), un tā tika izstrādāta saskaņā ar GMP prasībām, lai nodrošinātu iespējamo klīnisko pielietojumu. CTX0E03 ir novērtēta pirmsklīniskajos išēmiskā insulta modeļos (MCAo žurku modelis), kur implantētās šūnas veicināja ievērojamu sensomotorās funkcijas atjaunošanos. Šī līnija ir iekļauta klīniskajos pētījumos insulta ārstēšanai. To izmanto arī kā in vitro modeli neironu cilmes šūnu bioloģijā, kortikālo neironu diferenciācijā, Alcheimera slimības pētījumos (Abeta toksicitātes pētījumi) un neirofarmakoloģiskajā skrīningā. Nosacītā imortalizācijas sistēma padara CTX0E03 īpaši piemērotu drošības un efektivitātes pētījumiem, jo proliferāciju var apturēt, pirms transplantācijas atceļot 4-OHT. |
|---|---|
| Organisms | Cilvēks |
| Audu | Smadzenes (smadzeņu garoza) |
| Slimība | Normāls augļa garozas neiroepitēlijs; nosacīti nemirstīga neironu cilmes šūnu līnija |
| Pieteikumi | Neironu cilmes šūnu bioloģija; garozas neironu diferenciācija; insulta pētījumi; neirodeģeneratīvo slimību modelēšana; Alcheimera slimības pētījumi; neirofarmakoloģiskā skrīninga; šūnu terapijas pētījumi |
Raksturojums
| Morfoloģija | Neironu cilmes šūnu tipa (bipolāras, iegarenas) |
|---|---|
| Šūnas tips | Neironu cilmes šūnas |
| Augšanas īpašības | Pielipīgs (uz ar laminīnu pārklātām virsmām) |
Normatīvie dati
| Citāts | CTX (Cytion kataloga numurs 305358) |
|---|---|
| Bioloģiskās drošības līmenis | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_C2BI |
| ĢMO statuss | GMO-S1: Satur vienu kopiju retrovirāla c-mycERTAM nosacījuma imortalizācijas transgēna. Proliferācija ir atkarīga no 4-OHT. In vivo nav tumorogēns. Šī klasifikācija ir spēkā Vācijā; citās jurisdikcijās noteikumi var atšķirties. |
Biomolekulārie dati
Darbs ar
| Kultūras barotne | DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a) |
|---|---|
| Papildinājumi | Papildināt barotni ar 10% FBS |
| Disociācijas reaģents | Accutase, 5 min., 37 °C |
| Dubultošanās laiks | 50 līdz 60 stundas |
| Subkultivēšana | Kad šūnu segums ir 70–80 % blīvs, nosūciet barotni, nomazgājiet ar PBS (bez Ca²⁺/Mg²⁺), pievienojiet Accutase un inkubējiet 5–10 minūtes 37 °C temperatūrā. Neitralizējiet ar pilnvērtīgu barotni, centrifugējiet 300 × g 5 minūtes, atkārtoti suspendējiet svaigā barotnē ar 4-OHT un pārnesiet uz iepriekš pārklātām kolbām. Pirms pārklāšanas kolbas pārklājiet ar laminīnu (10 μg/ml PBS) 1 stundu 37 °C temperatūrā. |
| Sadalījuma attiecība | no 1 līdz 3 |
| Sēšanas blīvums | 1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm² |
| Šķidruma atjaunošana | Ik pēc 3–5 dienām (atkarībā no šūnu blīvuma) |
| Inkubācijas atmosfēra | 37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra. |
Kvalitātes kontrole un molekulārā analīze
Analīzes sertifikāts (CoA)
| Partijas numurs | Sertifikāta veids | Datums | Kataloga numurs |
|---|---|---|---|
| 305358-180526 | Analīzes sertifikāts | 03. Jul. 2026 | 305358 |