Hep3B 세포: 간세포암 연구 및 발견
HEP3B는 인간 유래의 불멸화 간세포암 세포주입니다. 이 세포주는 간독성 및 약물 대사 연구에 널리 사용됩니다. HEP3B의 형질 도입 효율은 매우 높으므로, 이 세포는 간암의 발생, 진행 및 치료적 개입을 연구하는 데 흔히 사용됩니다. 이 글은 HEP3B 세포주를 다루는 데 필요한 모든 정보를 다루고 있습니다. 주요 내용은 다음과 같습니다:
- 배양 배지
- HEP3B 세포 배양에는 10% FBS, 2.2 g/L NaHCO3, 2 mM L-글루타민 및 Earle's Balanced Salt Solution(EBSS)을 함유한 EMEM 배지가 사용됩니다.
- 배양 배지
- HEP3B 세포의 배양 배지 배양 시간은 약 36시간입니다.
- 증식 유형
- 이 간암 세포주는 부착성입니다.
- 생물학적 안전 등급
- BSL-1
- HEP3B 세포의 일반적 특성 및 유래
- HEP3B 세포주 배양 정보
- HEP3B 세포주: 장점 및 한계
- 연구에서의 HEP3B 세포 활용
- HEP3B 세포주에 관한 논문
- HEP3B 세포주 관련 자료: 프로토콜, 동영상 등
HEP3B 세포의 일반적 특성 및 유래
세포주에 대해 가장 먼저 알아야 할 정보는 그 유래와 일반적인 특성입니다. 이는 연구에서 세포주를 어떻게 활용할지 결정하고, 세포주를 다루는 데 도움이 됩니다. 이 기사 섹션에서는 HEP3B의 유래와 특성에 관한 모든 필수 정보를 다룹니다. 여기서 알아볼 내용: HEP3B 세포주란 무엇인가? HEP3B 세포의 기원은 무엇인가? HEP3B 세포의 형태학적 특징은 무엇인가?
- HEP3B는 지속성 인간 간암 세포주로, 간세포암종(HCC)을 앓고 있던 8세 아프리카 소년의 간 조직에서 유래했습니다. 이 세포주는 1979년 미국 필라델피아 위스타 연구소(Wistar Institute)의 바바라 B. 놀스(Barbara B. Knowles) 연구실에서 아덴(Aden)과 동료들에 의해 확립되었습니다 [1].
- HEP3B 세포는 염색체에 B형 간염 바이러스(HBV) 게놈이 통합되어 있습니다.
- 이 간세포암 세포는 상피 형태를 보입니다.
- HEP3B 세포의 모달 염색체 수는 60개입니다. HepG2와 달리, 이 세포는 재배열된 1번 염색체를 가지고 있지 않습니다.
HepG2와 Hep3B의 차이점은 무엇입니까?
HepG2와 HEP3B는 세포당 염색체 수에서 차이가 있습니다. HEP3B는 60개의 염색체를 포함하는 반면, HepG2 세포는 평균 55개의 염색체를 가지고 있습니다. 또한, HepG2는 종양 형성 능력이 없고 B형 간염 바이러스 음성이지만, HEP3B는 종양 형성 능력이 있고 HBV 양성입니다.
HEP3B 세포주 배양 정보
세포주의 배양 정보를 알고 있으면 배양 과정을 훨씬 수월하게 진행할 수 있습니다. 이 섹션에서는 HEP3B HBV 세포주 배양에 관한 모든 핵심 사항을 다룹니다. 여기에는 다음 내용이 포함됩니다: HEP3B 세포의 배양 배수 시간은 얼마인가요? HEP3B 배양 조건은 어떻게 되나요? HEP3B HCC 세포는 어떻게 배양하나요?
HEP3B 세포 배양의 핵심 사항
배양 배수 시간:
HEP3B 세포의 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양
부착형 또는 현탁형:
이 간암 세포주는 부착성입니다.
분할 비율:
HEP3B 세포는 1:2에서 1:4의 비율로 분배 배양합니다. 부착형 HEP3B 세포를 1× PBS로 세척한 후 Accutase 분리 용액과 함께 배양합니다. 8~10분 후, 신선한 배지를 추가하고 세포를 원심분리합니다. 회수된 세포는 신중하게 재현탁시킨 후, 권장 분할 비율에 따라 배지가 들어 있는 플라스크에 옮겨 담습니다.
배양 배지:
HEP3B 세포 배양에는 10% FBS, 2.2 g/L NaHCO3, 2 mM L-글루타민 및 Earle's Balanced Salt Solution (EBSS)을 함유한 EMEM 배지를 사용합니다.
배양 조건:
HEP3B 세포는 5% CO₂가 지속적으로 공급되는 37°C의 가습 인큐베이터에서 배양합니다.
보관:
동결된 HEP3B 세포는 전기 냉동고 또는 액체 질소의 기상 상태에서 -150°C 이하의 온도로 보관합니다.
동결 과정 및 배지:
HEP3B 세포에 권장되는 동결 배지는 CM-1 또는 CM-ACF입니다. 세포 생존율을 보호하기 위해 분당 1°C만 온도가 떨어지도록 하는 서서히 냉동하는 과정을 통해 세포를 동결합니다.
해동 과정:
동결된 세포는 37°C로 미리 설정된 수조에서 40~60초 동안 해동합니다. 이후 이 세포들을 신선한 배양 배지에 넣고 원심분리하여 동결 배지 성분을 제거합니다. 회수된 세포는 재현탁하여 배양을 위해 새로운 플라스크에 분배합니다.
생물안전 등급:
HEP3B 세포 배양에는 생물안전 등급 1 실험실이 필요합니다.
HEP3B 세포주: 장점 및 한계
HEP3B는 널리 사용되는 간세포암 세포주입니다. 이 섹션에서는 이 간암 세포주의 주요 장점과 한계에 대해 중점적으로 다룹니다.
장점
HEP3B 세포의 주요 장점은 다음과 같습니다:
배양이 용이함
HEP3B 세포는 까다로운 배양 조건이 필요하지 않아 연구실에서 다루고 유지하기 쉽습니다. 이는 실험 절차를 단순화합니다.
높은 형질 도입 효율
HEP3B 세포는 뛰어난 형질 도입 효율을 보여, 유전자 조작 및 유전자 발현 관련 연구에 널리 사용됩니다.
종양 형성 능력
HEP3B는 면역결핍 마우스에 주입했을 때 종양을 형성할 수 있는 종양 형성성 간세포암 세포주입니다. 이는 HEP3B 이종 이식 모델을 이용한 암 진행 및 발병 연구에 도움이 됩니다.
HEP3B의 P53 상태
HEP3B 세포는 간세포암종(HCC) 및 기타 암과 유사한 P53 유전자 돌연변이를 가지고 있어, 암의 성장, 발달 및 진행에 대한 P53 돌연변이의 영향을 연구하는 데 적합합니다.
한계
HEP3B 세포주와 관련된 한계는 다음과 같습니다:
체외 세포 모델
HEP3B 세포주는 간세포암(HCC) 세포의 체외 모델로 사용됩니다. 그러나 이는 생체 내에서 관찰되는 HCC의 복잡성을 완전히 반영하지 못할 수 있습니다. 결과적으로 체외 실험 결과는 생체 내(in vivo)에서 관찰되는 결과와 다를 수 있습니다.
연구에서의 HEP3B 세포 활용
HEP3B 세포주는 생의학 연구 분야에서 다양한 응용 가능성을 제공합니다. HEP3B 세포의 주요 연구 응용 분야는 다음과 같습니다:
- 암 생물학: HEP3B는 인간 간세포암종 세포주입니다. 이는 HCC의 발생 및 진행 기저에 있는 세포 및 분자적 메커니즘을 규명하는 데 있어 매우 귀중한 세포 모델입니다. 연구자들은 이 세포를 사용하여 간암과 관련된 유전적 돌연변이, 세포 과정 및 세포 신호 전달 경로를 연구합니다. 예를 들어, 한 연구에서는 HEP3B 세포를 활용하여 microRNA-223-3p가 NLRP3 인플람소좀 구성 요소를 조절하고, 증식을 억제하며, HEP3B 간세포암 세포의 세포 사멸을 촉진한다는 사실을 밝혀냈습니다 [2].
- 신약 스크리닝 및 개발: HEP3B 세포주는 간암에 대한 새로운 치료제의 시험, 스크리닝 및 개발에도 사용됩니다. 또한, 다양한 항암제 및 치료법의 독성과 효능을 평가하는 데 활용됩니다. 연구자들은 또한 이 간암 세포주를 사용하여 약물 대사를 연구했습니다. 연구진은 HEP3B 세포를 활용하여 코티누스 코기그리아(Cotinus coggygria) 식물 추출물이 HEP3B 간세포암 세포에 미치는 세포독성 잠재력을 평가했습니다 [3].
- 바이러스 감염: HEP3B는 B형 간염 바이러스 양성 세포주이므로, 간암 발병으로 이어질 수 있는 바이러스 감염, 즉 HBV 및 HCV를 연구하는 데 활용됩니다. 이는 바이러스 감염을 더 잘 이해하고 잠재적인 항바이러스 치료법을 개발하는 데 도움이 될 수 있습니다. 예를 들어, 한 연구에서는 HEP3B 간세포암 세포를 사용하여 C형 간염 바이러스 전파에 있어 유비퀴틴화의 중요성을 조사했다. 이 연구 결과는 유비퀴틴 특이적 프로테아제 15(USP15)가 지질 방울 형성과 HCV RNA 번역 등 간세포 특이적 기능을 조절하여 HCV의 증식에 관여한다는 것을 시사했습니다 [4].
5. HEP3B 세포주에 관한 논문
이 글의 이 섹션에서는 HEP3B 세포에 관한 몇 가지 흥미로운 연구 논문을 다룰 것입니다.
인간 간세포암 HEP3B 세포에서 루테올린에 의한 세포사멸 및 자가포식 조절
Biochemical and Biophysical Research Communications(2019)에 게재된 이 논문은 루테올린 화합물에 의해 유발된 소포체 스트레스가 P53 결손 HEP3B 세포에서 P53 독립적인 방식으로 항종양 효과를 발휘할 수 있다고 제안했습니다.
Avicennia marina에서 분리된 루페올을 이용한 HEP3B 간암 세포 표적화 가능성
Archiv der Pharmazie (2021)에 게재된 이 연구는 5환 트리테르페노이드인 루페올을 HEP3B 세포에 대한 잠재적 항암제로 제안했습니다.
이 논문은 'Molecular Medicine Reports'(2017)에 게재되었다. 연구 결과에 따르면 Cnidium monnieri (L.) Cusson 에탄올 추출물은 p53 및 Akt/GSK-3β 신호 전달 경로의 조절을 통해 간암 세포인 HepG2 및 HEP3B에서 세포 사멸(아포토시스)과 세포주기 정지를 유도한다고 합니다.
아우라노핀은 PI3K/Akt 신호 전달 경로의 비활성화를 통해 간세포암 Hep3B 세포에서 설포라판 매개 세포 사멸을 증강시킨다
Biomolecules and Therapeutics (2020)에 발표된 이 연구는 아우라노핀이 시너지 효과를 나타내며 PI3K/AKT 경로의 활성화를 통해 HEP3B 세포의 설포라판 매개 세포 사멸을 촉진한다고 제안했다.
Circular RNA-0072309는 microRNA-665를 표적으로 하여 Hep3B 세포주에서 항종양 효과를 나타낸다
BioFactors(2023)에 게재된 이 연구 논문은 원형 RNA-0072309가 miRNA-665를 표적으로 하여 간세포암종 세포 HEP3B에서 항종양 효과를 발휘한다고 제안했습니다.
HEP3B 세포주 관련 자료: 프로토콜, 동영상 등
다음은 HEP3B 세포와 관련하여 이용할 수 있는 몇 가지 자료입니다:
- HEP3B 형질 도입: 이 동영상은 HEP3B 세포의 형질 도입 프로토콜을 설명합니다.
- HEP3B 형질 도입 효율: 이 링크를 통해 HEP3B DMEM 배지 조성, 세포 분화, HEP3B 세포 형질 도입 프로토콜에 대해 알아볼 수 있습니다. 또한, 형질 도입 프로토콜에서 HEP3B 리포펙타민 3000 시약의 최적화에 대한 정보도 제공합니다.
다음 링크에는 HEP3B 세포 배양 프로토콜이 포함되어 있습니다:
- HEP3B 배양 조건: 이 링크를 통해 Huh7 및 HEP3B 배양 세포의 취급 및 유지 관리 프로토콜을 확인할 수 있습니다.
- HEP3B 세포: 이 웹사이트에는 HEP3B 배지, 세포 분할, 해동, 증식 배양 및 동결 보존 배양 처리 프로토콜을 포함하여 HEP3B 세포에 대한 풍부한 정보가 있습니다.
참고문헌
- Puttahanumantharayappa, L.D. 외, 간세포암종 세포주의 기원과 특성. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
- Wan, L. 외, miRNA-223-3p는 NLRP3를 조절하여 Hep3B 세포의 세포 사멸을 촉진하고 증식을 억제한다. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. 및 S. Selen-Isbilir, Hep3B 암 세포주에 대한 Cotinus coggygria 추출물의 세포독성 효과. Natural Product Research, 2022: p. 1-4.
- Kusakabe, S. 외, USP15는 바이러스 RNA 번역 및 지질 방울 형성을 조절하여 C형 간염 바이러스 증식에 관여한다. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.