HT-29 세포주
HT-29는 광범위한 암 및 독성학 연구에 활용되는 인간 대장암 세포주입니다. 예를 들어, 이 세포들은 대장암에 대한 표준 항암 치료에 민감하게 반응합니다. 또한, HT-29 세포주는 세균 감염에 대한 장 상피의 반응을 조사하기 위한 잘 규명된 체외 모델입니다. HT-29 세포는 성숙한 장 세포, 즉 장상피세포의 특성을 모방하므로 부착 및 기전 연구에 적합합니다.
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- 증식 유형
- 부착형
- 생물안전 등급
- BSL-1
HT-29 세포: 기원 및 일반 정보
어떤 세포주를 사용하기 전에, 해당 세포주의 일반적인 특성과 기원에 대해 알아야 합니다. 이 섹션에서는 다음 내용을 확인할 수 있습니다: HT-29 세포란 무엇인가요? HT-29는 대장암 세포주인가요? HT-29 세포의 형태학적 특징은 무엇인가요?
HT-29 세포주는 무엇입니까? HT-29는 1964년 Trempe와 Fogh에 의해 확립된 대장 선암 세포주입니다. 이 세포는 원래 대장 선암을 앓고 있던 백인 여성(44세)의 원발 종양에서 유래되었습니다[1]. 확립된 이래, 이 세포주는 암의 생물학적 특성을 연구하는 데 사용되어 왔습니다.
HT-29 세포의 형태: HT-29 세포주는 일반적으로 상피와 유사한 형태를 띱니다. 분화된 세포는 단층으로 성장하고, 단단한 세포-세포 접합부를 형성하며, 정점 브러시 경계를 가지고 있습니다. 이 세포들을 포도당이 부족한 배지에서 배양하거나 부티레이트나 산과 같은 유도 물질을 투여하면, 장세포와 유사한 특징을 보입니다.
세포 크기: HT-29 대장암 세포주의 직경은 11 μm입니다.
게놈 및 배수성: HT-29 세포주의 모달 염색체 수는 71개입니다. 이는 68~72개 범위일 수 있습니다. 또한, HT-29 세포의 간소화된 염색체 수는 과삼배체이며, 2S 성분은 2.4%의 비율로 발생합니다.
HT29 MTX란 무엇인가? HT29 MTX는 10 µM 메토트렉세이트에 적응시켜 원래의 HT-29 인간 대장암 세포주에서 분리된 메토트렉세이트 내성 세포주입니다. 이 세포들은 점액을 분비하는 성숙한 잔세포의 특성을 나타냅니다.
HT-29 세포주의 배양 정보
세포주의 기본적인 배양 요건을 파악하면 작업을 수월하게 진행할 수 있습니다. 다음 사항을 확인해야 합니다: HT-29 세포주의 배양 배지 배양 조건은 무엇인가요? HT-29 세포의 접종 밀도는 얼마인가요? HT-29 세포에 적합한 배지는 무엇인가요?
배양 배수 시간
HT-29 세포주의 평균 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배
부착성/부유성
HT-29는 부착성 세포주입니다.
접종 밀도
HT-29 세포에 권장되는 접종 밀도는 3 x 104 세포/cm2입니다. 배양된 세포를 1X PBS로 세척하고, Accutase와 8~10분간 배양한 후 분리합니다. 신선한 배지를 추가하고 세포를 원심 분리합니다. 세포 펠릿을 재부유시킨 후, 권장 세포 밀도로 새로운 플라스크에 세포를 분주합니다.
배양 배지
HT-29 세포의 최적 배양을 위해서는 2.5 mM L-글루타민과 10 % FBS가 보충된 Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM)을 사용합니다. 배지는 주 2~3회 교체해야 합니다.
배양 조건
HT-29 세포의 배양에는 37°C의 온도와 5% CO2가 공급되는 가습 인큐베이터가 필요합니다.
보관
이 세포는 -195°C 이하의 액체 질소 기상(vapor phase)에 보관합니다.
동결 배지 및 공정
HT-29 세포주에 사용되는 동결 배지는 CM-1 또는 CM-ACF입니다. 세포는 온도를 1°C씩 서서히 낮추는 저속 동결 공정을 통해 동결되며, 이 공정은 세포의 생존력을 효과적으로 보호합니다.
해동 과정
동결된 HT-29 세포는 37°C로 설정된 수조에서 해동됩니다. 이 세포들은 재현탁하여 신선한 배양 배지 플라스크에 직접 분주할 수 있습니다. 반대로, 해동된 세포를 원심분리하여 동결 배지 성분을 제거한 후, 새로운 배지에 재현탁시켜 플라스크에서 배양할 수도 있습니다.
생물 안전 등급
HT-29 세포주의 취급 및 유지 관리에는 생물안전 등급 1이 사용됩니다.
HT-29 세포: 장점과 한계
모든 세포주에는 다른 세포주와 구별되는 고유한 장단점이 있습니다. 이 섹션에서는 HT-29 세포와 관련된 주요 장점과 한계에 대해 다룹니다.
장점
HT-29 세포의 주요 장점은 다음과 같습니다:
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배양이 용이함
HT-29 세포주는 배양에 복잡한 조건이 필요하지 않아 취급 및 유지 관리가 용이합니다. 연구실에서는 널리 배양되고 있습니다.
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장 세포의 체외 모델
HT-29 세포는 특정 배양 조건 하에서 성숙한 장 세포(장상피세포 및 점액 생성 세포)로 분화할 수 있습니다. 이 세포들은 음식물 소화 및 생체 이용률을 연구하기 위한 세포 모델로 사용됩니다.
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높은 형질 도입 효율
HT-29 대장암 세포는 높은 형질 도입 효율을 보여 유전자 발현 및 조절 연구에 적합합니다. 다양한 방법을 사용하여 일시적 및 안정적 형질 도입 실험을 수행할 수 있습니다.
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약물 민감성
HT-29 세포는 대장암 치료에 흔히 사용되는 플루오로우라실 및 옥살리플라틴과 같은 항암제에 민감합니다. 이 세포는 약물 내성을 연구하고 대장암 치료제 후보 물질을 선별하는 데 사용됩니다.
한계
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이질성
다른 암 세포주와 마찬가지로 HT-29 세포는 이질성을 보이며 균일한 세포 집단을 형성하지 못할 수 있습니다. 이는 특정 분석에서 결과의 재현성에 영향을 미치고 실험 결과에 사소한 편차를 초래할 수 있습니다.
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제한된 분화 능력
HT-29 세포는 분화 능력이 제한적입니다. 이 세포는 장 세포나 결장 세포로 완전히 분화하지 못하고, 몇 가지 특징적인 특성만 나타냅니다. 이러한 한계로 인해 더 복잡한 생물학적 과정을 연구하는 데에는 사용이 제한될 수 있습니다.
HT-29 세포: 응용 분야
HT-29 세포주는 광범위한 응용 분야로 인해 연구실에서 널리 배양됩니다. 이 섹션에서는 HT-29 세포의 몇 가지 주요 응용 분야만을 다룹니다.
암 연구: HT-29는 대장 선암 세포주이므로, 암의 진행, 발병 및 근본적인 분자적 기전을 연구하는 데 사용됩니다. 2018년에 수행된 한 연구에서는 HT-29 세포주를 사용하여 전이에 관여하는 세포 분자를 조사했습니다. 이 연구에서는 비멘틴(vimentin)과 CXCR4 유전자가 세포 전이를 조절한다는 사실을 관찰했습니다. 반면, microRNA-193a-5p 모방체를 형질 도입하면 이러한 유전자의 mRNA 수준을 감소시켜 암세포의 전이를 성공적으로 억제할 수 있습니다 [2].
독성학 연구: HT-29 세포주는 독성학 연구에 광범위하게 사용됩니다. 이 대장암 세포주는 다양한 분석법을 통해 여러 후보 약물의 독성을 평가하는 데 활용됩니다. 예를 들어, 한 연구에서는 식물 Syzygium cumini의 에탄올 추출물이 HT-29 세포주에 미치는 잠재적 독성을 조사했습니다. 그 결과, HT-29 세포의 성장이 현저히 억제되는 것으로 나타나, 이 추출물이 유망한 항암 특성을 가지고 있음을 시사했습니다 [3].
미생물학: HT-29는 잠재적 미생물(즉, 박테리아 및 바이러스)의 병인을 조사하기 위한 숙주 세포 시스템으로 사용될 수 있습니다. 연구자들은 HT-29 세포를 미생물에 감염시켜 그 독성과 숙주 반응을 조사할 수 있습니다. 한 연구에서는 HT-29 세포를 사용하여 유산균의 프로바이오틱 특성을 탐구했습니다 [4]. 또 다른 연구에서는 HT-29 세포를 사용하여 박테리오파지 치료의 효능과 안전성을 평가했습니다 [5].
5. HT-29 세포에 관한 연구 논문
이 섹션에서는 연구 계획을 수립하는 데 도움이 될 HT-29 세포에 관한 주목할 만한 논문들을 소개합니다.
HT-29 대장암 세포주에 대한 Syzygium cumini 에탄올 추출물의 항암 효과 평가
이 연구는 Syzygium cumini 에탄올 추출물을 대장암 세포주 HT-29에 대한 잠재적 항암제로 제안했습니다. 이 추출물은 암세포의 성장을 현저히 억제했습니다.
테트란드린은 Bcl-2/카스파제 3/PARP 경로와 G1/S기를 통해 대장암 HT-29 세포의 성장을 억제합니다
Bioscience Reports에 게재된 이 논문은 테트란드린(Tetrandrine)이라는 화합물의 HT-29 세포에 대한 항암 활성을 검증했다. 그 결과, 테트란드린이 세포 신호 전달 경로를 조절하여 암세포의 증식과 성장을 억제하는 것으로 나타났다.
microRNA-193a-5p는 전이 경로를 억제하여 인간 HT-29 대장암 세포의 이동을 억제한다
이 연구는 miRNA-193a-5p가 전이 관련 유전자를 조절함으로써 HT-29 세포의 전이를 잠재적으로 조절할 수 있다고 제안했다.
박테리오파지는 세균 배양 환경보다 인간 세포가 있는 환경에서 세균에 대해 더 강력한 독성을 나타낸다: HT-29 세포를 통한 통찰
이 논문은 2018년 Nature Scientific Reports에 게재되었다. 본 연구는 제안된 박테리오파지 치료법의 효능을 평가하기 위해 HT-29 종양 형성 세포주를 장 세포 모델로 활용했다.
유산균의 프로바이오틱 특성과 장병독성 세균의 Caco-2 및 HT-29 세포 부착 억제 능력
이 연구에서 연구진은 HT-29 세포를 사용하여 유산균의 프로바이오틱 활성을 조사했습니다. 흥미롭게도, 이 연구는 유산균이 병원성 세균의 결장 세포 부착을 방지한다는 것을 보여주었습니다.
HT-29 세포 자료: 프로토콜, 동영상 및 기타
이 섹션에서는 HT-29 세포의 유지 관리, 배양 및 형질 도입 프로토콜을 학습하는 데 도움이 되는 온라인 자료를 다룹니다.
세포 배양 프로토콜
다음 자료들은 HT-29 세포의 재배양에 대한 안내를 제공합니다.
- HT-29 세포 배양: 이 링크는 배지, 해동 및 HT-29 세포의 분배에 대한 기본 지식을 제공합니다.
- HT-29 배양 유지: 이 기사에는 HT-29 세포 배양 및 유지 관리에 관한 모든 유용한 정보가 포함되어 있습니다.
형질 도입 프로토콜
HT-29 세포주는 전사 효율이 뛰어나 유전자 발현 연구에 자주 사용됩니다. 다음 자료들은 이 세포에 적용 가능한 전사 프로토콜을 설명합니다.
- HT-29 형질 도입: 이 웹사이트 링크에는 HT-29 세포의 형질 도입에 대한 상세한 프로토콜이 포함되어 있습니다.
- HT-29 세포주 형질 도입: 이 문서는 플라스미드 DNA를 이용한 HT-29 세포주의 형질 도입 프로토콜을 설명합니다.
HT-29 세포주 관련 동영상
이 종양 형성 세포주의 배양 및 유지 관리에 관한 동영상 몇 가지를 소개합니다.
이 기사의 정보가 HT-29 세포주의 취급 및 유지 관리에 유용하고 충분할 것으로 기대합니다. 연구에 HT-29 세포를 사용할 계획이라면 당사에서 주문하십시오.
참고 문헌
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio, HT29 세포주. 식품 생리활성 물질이 건강에 미치는 영향: in vitro 및 ex vivo 모델, 2015: p. 113-124.
- Shirafkan, N. 외, microRNA-193a-5p는 전이 경로의 억제를 통해 인간 HT-29 대장암 세포의 이동을 억제한다. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, 및 R. Safaralizadeh, HT-29 대장암 세포주에 대한 Syzygium cumini 에탄올 추출물의 항암 효과 평가. 위장관암 저널, 2021. 52: p. 575-581.
- Fonseca, H.C. 외, 락토바실러스의 프로바이오틱 특성과 장병독성 세균의 Caco-2 및 HT-29 세포 부착 억제 능력. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: p. 102-112.
- Shan, J. 외, 박테리오파지는 박테리아 배양 환경보다 인간 세포가 있는 환경에서 박테리아에 대해 더 강력한 독성을 나타낸다; HT-29 세포를 통한 통찰. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5091.