HK-2 세포 - 신장 연구에서 HK-2 세포를 활용한 신장 기능 및 병리 탐구
HK-2는 독성학 연구에 널리 사용되는 불멸화 인간 신장 상피 세포주입니다. 연구자들은 이 신장 세포를 대상으로 환경 독소의 영향을 평가합니다. 또한, 신장 질환과 그 기전을 규명하기 위해 HK-2 세포를 활용하기도 합니다.
- 배양 배지
- 10% 소 태아 혈청, 0.05 mg/ml 소 뇌하수체 추출물(BPE) 및 5 ng/ml 표피 성장 인자(EGF)를 함유한 각질세포주 배지가 이상적인 HK-2 세포 배지입니다. 배지는 주 2~3회 교체해야 합니다.
- 배양 배지
- HK-2 세포의 배양 배지 교체 주기는 47.3시간에서 61.7시간 사이입니다.
- 증식 유형
- HK-2 신장 상피 세포주는 부착성입니다.
- 생물안전 등급
- BSL-2
- 구입처
- Cytion — HK-2 주문
HK-2 세포: 유래 및 일반적 특성
세포주의 적절한 취급, 유지 관리 및 사용을 위해서는 세포주의 기원과 일반적인 특성을 반드시 알아야 합니다. 이 글의 이 섹션에서는 다음 내용을 다룹니다: 인간 신장 2(Human Kidney 2)의 HK-2 세포란 무엇인가? HK-2의 역할은 무엇인가? HK-2 세포란 무엇인가? HK-2 세포주의 기원은 무엇인가? HK-2 세포의 크기와 형태는 어떻게 되나요?
- Human Kidney 2 (HK-2) 세포는 유럽인 성인의 정상 신장 조직에서 유래한 근위 세뇨관 세포의 일종입니다. HK-2 세포주는 인간 유두종 바이러스 16형의 E6/E7 유전자를 포함하는 재조합 레트로바이러스를 신장 세포에 형질 도입하여 확립되었습니다. 이 실험을 통해 지속적으로 증식하는 HK-2 신장 상피 세포주가 불멸화되고 확립되었습니다.
- HK-2 세포는 상피 형태를 보입니다.
- HK-2 세포의 크기는 직경 17.4~18.6 µm입니다. 평균 직경은 18.2 µm입니다 [1].
HK-2 세포주: 배양 정보
인간 신장 2(HK-2) 세포주 배양에 관한 정보는 해당 세포를 다루기 전에 큰 도움이 될 수 있습니다. 이 글의 해당 섹션에서는 HK-2 세포 배양에 필수적인 정보를 다룹니다. 다음 내용을 확인할 수 있습니다: HK-2 세포는 부착성 세포인가? HK-2 세포의 배양 배수 시간은 얼마인가? HK-2 세포 배양에는 어떤 배지가 사용되는가?
HK-2 세포 배양의 핵심 사항
세포 배양 배수 시간:
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부착형 또는 현탁형:
HK-2 신장 상피 세포주는 부착성입니다.
재배양 비율:
HK-2 세포는 1:2에서 1:4의 비율로 재배양됩니다. 부착형 HK-2 세포는 1× PBS로 세척한 후, Accutase 용액을 첨가하고 실온에서 8~10분간 배양합니다. 분리된 세포에 배양액을 첨가하고 원심분리합니다. 회수된 세포를 조심스럽게 재현탁시킨 후 배양을 위해 새로운 플라스크에 옮깁니다.
증식 배지:
10% 소 태아 혈청, 0.05 mg/ml 소 뇌하수체 추출물(BPE) 및 5 ng/ml 표피 성장 인자(EGF)를 함유한 각질세포주 배지가 HK-2 세포 배양에 이상적입니다. 배지는 주 2~3회 교체해야 합니다.
배양 조건:
인간 신장 2 세포주 배양은 37°C, 5% CO₂ 공급이 이루어지는 가습 인큐베이터에서 유지됩니다.
보관:
동결된 세포는 액체 질소의 기상 또는 초저온 냉동고 내 -150°C 이하의 온도에서 보관합니다.
동결 과정 및 배지:
CM-1 또는 CM-ACF 동결 배지는 HK-2 세포 동결에 이상적입니다. 간단히 말해, 분당 1°C씩만 온도가 떨어지도록 하여 세포가 충격을 받지 않도록 하는 서서히 동결하는 방법을 채택합니다.
해동 과정:
동결된 세포는 섭씨 37도로 설정된 수조에서 해동됩니다. 해동된 세포에 신선한 배양 배지를 첨가하여 재현탁시킵니다. 이후, 세포를 배양 배지가 들어 있는 새로운 플라스크에 분배합니다. 24시간 후, 동결 배지 성분을 제거하기 위해 배지를 교체합니다.
생물안전 등급:
HK-2 세포 배양은 생물안전 등급 1 실험실에서 유지됩니다.
HK-2 세포의 장점과 한계
HK-2는 널리 사용되는 인간 근위세뇨관 상피 세포주입니다. 다른 세포주와 마찬가지로 이 세포주에도 몇 가지 장점과 한계가 있습니다. 이 섹션에서는 인간 신장 2 세포주의 주요 장단점에 대해 살펴보겠습니다.
장점
HK-2 세포주의 주요 장점은 다음과 같습니다:
잘 규명된 특성
HK-2 세포주는 형태, 크기 및 게놈 측면에서 광범위하게 규명되어 있습니다. 이 정상 신장 세포를 대상으로 수많은 연구가 수행되었습니다.
불사화
HK-2는 수명이 길어 여러 번의 배양을 통해 증식할 수 있는 지속적 세포주입니다. 이 특징 덕분에 실험실 실험에 필요한 세포를 지속적으로 공급할 수 있습니다.
근위세뇨관 상피 세포의 특성
HK-2 세포는 인간 신장에서 발견되는 근위세뇨관 세포(PTC)의 특징인 잘 분화된 표현형을 나타냅니다. 이러한 독특한 특성 덕분에 HK-2 세포는 신장 생리학, 세포 과정 및 다양한 자극에 대한 반응을 연구하는 데 유용한 체외 모델이 됩니다.
한계
HK-2 세포주의 몇 가지 한계는 다음과 같습니다:
체외 모델
HK-2는 정상 신장 세포의 체외 모델 역할을 하며, 특히 근위세뇨관 상피 세포의 특성을 나타냅니다. 그러나 인체 내 신장 조직과 미세환경의 복잡성을 완전히 재현하지는 못할 수 있습니다.
연구에서의 HK-2 세포주 응용
HK-2 세포주는 독성학 연구 분야에서 다양한 용도로 활용됩니다. 여기서는 이 인간 근위세뇨관 세포주의 구체적이고 중요한 연구 활용 사례 몇 가지를 살펴보겠습니다.
- 신장 생리학: HK-2 세포는 정상적인 신장 생리학 및 기능을 연구하는 데 널리 사용됩니다. 연구자들은 이 근위세뇨관 상피세포를 활용하여 이온 채널, 수송 과정 및 신장 항상성을 조절하는 기타 세포 기전을 조사합니다. 예를 들어, 연구자들은 신장 상피 세포인 HK-2에서 네오리그난인 (+)-코노카판(CNCP)에 의해 유도된 세포 사멸에서 일시적 수용체 전위 채널 6(TRPC6)의 역할을 연구했습니다[2].
- 신장 질환: 인간 신장 2 세포주는 급성 신장 손상 및 당뇨병성 신장병과 같은 다양한 신장 질환과 그 기저에 있는 세포 및 분자적 기전을 연구하는 데 활용됩니다. 예를 들어, 클로토 단백질의 메틸화 수준이 신장 손상과 관련이 있다는 연구 결과가 있습니다. 클로토 유전자 프로모터의 메틸화를 감소시키면 발현을 증진시키고, 당뇨병 db/db 마우스 모델 및 고혈당 처리된 HK-2 세포에서 유발된 신장 손상을 완화할 수 있습니다 [3].
- 독성학 연구: HK-2 세포는 다양한 약물, 화학 물질 및 환경 오염 물질의 잠재적 영향을 평가하기 위한 훌륭한 연구 도구입니다. 이러한 연구는 연구자들이 신장 세포에 대한 약물의 안전성과 부작용을 평가하는 데 도움이 될 수 있습니다. 예를 들어, 2022년에 발표된 한 연구에서는 천연 허브인 Polygonatumkingianum (PK) 다당류와 수성 추출물이 HK-2 세포에서 우라늄으로 유발된 신독성에 미치는 잠재적 영향을 평가했습니다. 연구진은 PK가 신장 세포에 보호 효과를 발휘하고 우라늄 중독을 예방한다는 사실을 발견했습니다 [4].
5. HK-2 세포: 연구 논문
다음은 HK-2 신장 상피 세포를 다룬 흥미로운 연구 논문들입니다.
CircHIPK3는 miR-326/miR-487a-3p/SIRT1 조절을 통해 인간 신장 세뇨관 상피 HK-2 세포에 대한 고혈당 독성을 완화합니다
Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022)에 게재된 이 연구는 원형 RNA HIPK3가 고혈당 독성으로 인한 HK-2 세포 증식 억제를 완화할 수 있다고 제안했습니다. 또한, miR-326/miR-487a-3p/SIRT1 캐스케이드를 조절하여 세포 사멸을 억제할 수 있습니다.
HK-2 신장 근위 세뇨관 세포와 786-0 암세포에서 금 나노입자의 차별적 독성 메커니즘
Nanomedicine (2020)에 발표된 이 연구 논문은 786-0 암세포와 HK-2 근위 세뇨관 상피세포에서 금 나노입자(AuNPs)의 서로 다른 독성 기전을 평가했습니다.
miRNA-320c 억제를 통해 HK-2 세포에서 고혈당에 의한 독성을 완화할 수 있음
이 논문은 『Renal Failure』(2022)에 게재되었다. 연구 결과에 따르면, microRNA-320c는 PTEN을 표적으로 삼고 PI3K/AKT 신호전달을 억제함으로써 신장 세포(HK-2)에서 고혈당에 의해 유발된 독성을 감소시킬 수 있다.
중간엽 줄기세포 유래 엑소좀이 HK-2 세포의 상피-중간엽 전이를 완화한다
Tissue Engineering Part A (2022)에 게재된 이 연구는 중간엽 줄기세포 유래 엑소좀이 HK-2 신장 세포의 상피-중간엽 전이를 방지한다고 제안했다.
LncRNA TapSAKI는 HK-2 세포 및 소변 유래 패혈증 유발 신장 손상에서 염증 손상을 촉진한다
『Journal of Pharmacy and Pharmacology』(2019)의 논문에 따르면, lncRNA TapSAKI는 microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB 신호 전달 경로를 조절하여 HK-2 세포의 염증 반응과 세포 사멸을 증강시킨다고 한다.
HK-2 세포주 관련 자료: 프로토콜, 동영상 등
HK-2는 잘 알려진 세포주입니다. 다음은 HK-2 세포 배양 프로토콜을 설명하는 자료들입니다.
- HK-2 세포 배양: 이 웹사이트는 HK-2 세포 배양 정보가 풍부합니다. 예를 들어, HK-2 세포 배지 조제법, 패싱 프로토콜, 증식 배양 및 동결 보존 배양의 취급 및 유지 관리 프로토콜을 제공합니다.
- 세포 분화: 이 동영상은 부착성 세포주의 일반적인 분화 또는 분주 프로토콜을 익히는 데 도움이 될 것입니다.
참고 문헌
- Handl, J. 외, 반복적 패싱이 독성 화합물에 대한 인간 근위세뇨관 HK-2 세포의 민감성에 미치는 영향. Physiological Research, 2020. 69(4): p. 731.
- Yang, G. 외, TRPC6 채널의 활성화는 HK-2 세포에서 (+)-코노카판에 의한 세포 사멸에 기여한다. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: p. 281-290.
- Yang, X.H. 외, EGCG는 당뇨병성 db/db 마우스 및 HK-2 세포에서 클로토 과메틸화를 역전시켜 신장 손상을 완화한다. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020.
- Li, W. 외, Polygonatum kingianum 다당류 및 수성 추출물이 인간 신장(HK-2) 세포에서 우라늄에 의한 독성에 미치는 보호 효과. International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: p. 68-79.