B16 세포 - 종양학 연구에서 B16 흑색종 세포에 대한 기초 가이드
B16은 생쥐 유래의 피부암(흑색종) 세포주입니다. 이 세포주는 인간 피부암 연구를 위한 효과적인 체외 모델입니다. 이 세포주는 고형 종양의 형성과 암세포의 전이를 연구하는 데 자주 사용됩니다.
- 배양 배지
- B16 세포는 10% 소 태아 혈청(FBS)을 함유한 EMEM(Eagle's Minimum Essential Medium) 배지에서 배양됩니다. 배양 배지는 주 2~3회 교체해야 합니다.
- 배양 배지
- B16 세포의 평균 세포수 배가 시간은 24시간으로 추정됩니다.
- 증식 형태
- B16 세포는 부착성 세포이며 단층으로 증식합니다.
- 생물안전 등급
- BSL-1
- 구입처
- Cytion — B16 주문
이 글은 B16 흑색종 세포주의 기본 사항을 이해하는 데 도움이 될 것입니다. 구체적으로 다음 내용을 다룹니다:
B16 세포주의 일반적 특성 및 기원
이 글의 이 섹션에서는 B16 흑색종 세포주의 특징적인 사항들을 다룹니다. 다음의 자주 묻는 질문에 대한 답변을 확인하실 수 있습니다. 예를 들어, B16 암 세포주란 무엇인가요? B16 세포는 어디에서 유래되었나요? B16 세포의 크기는 어느 정도인가요?
- B16 세포주는 1954년에 확립되었습니다. 이 세포들은 메인주 잭슨 연구소(Jackson Laboratories)에서 피부에 자연적으로 종양이 발생한 C57BL/6J 마우스에서 유래되었습니다.
- 이 세포들은 멜라닌을 생성하는 상피 세포로, 비장, 간, 폐로 전이할 수 있는 능력을 가지고 있습니다.
- 흑색종 B16 세포는 단층으로 증식하며 상피세포와 유사한 모양과 방추형 세포 형태를 보입니다.
- B16 세포주의 크기는 약 15.4 μm입니다.
- B16 세포에는 B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 및 B16F10을 포함한 뚜렷한 아클론이 있습니다. 이러한 아클론은 모세포인 B16 세포와 다르며 몇 가지 특정한 특징을 유지합니다. 예를 들어, 형태, 세포 크기 및 기타 특성에 차이가 있습니다. B16F10은 폐 전이 능력이 높으며, B164A5는 B16F10, B16-GMCSF 및 B16FLT3에 비해 가장 공격적인 피부암 세포주입니다 [1].
B16 세포주의 배양 정보
세포주를 유지하거나 배양하기 전에 배양 시간, 세포 유형, 배지, 배양 조건 등에 대한 주요 정보를 확인해야 할 수 있습니다. 이 섹션에는 B16 세포 배양에 필요한 모든 정보가 포함되어 있습니다.
B16 세포 배양의 핵심 사항
세포 배양 배양 시간:
B16 세포의 평균 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배양 배
부착 배양 또는 현탁 배양:
B16 세포는 부착성 세포이며 단층으로 증식합니다.
접종 밀도:
B16 세포는 1~2 x 10⁴ 세포/cm²의 밀도로 접종하는 것이 권장됩니다. 부착된 B16 세포는 1X PBS로 세척한 후 Accutase 용액을 사용하여 표면에서 분리합니다. 세포를 원심분리하고, 세포 펠릿을 배양액에 재현탁시킵니다. 이후 이 세포들을 새로운 플라스크에 분주하여 배양합니다.
배양액:
B16 세포는 10% 소 태아 혈청(FBS)을 함유한 EMEM(Eagle's Minimum Essential Medium) 배지에서 배양합니다. 배양 배지는 주 2~3회 교체해야 합니다.
배양 조건:
B16 세포주를 배양하기 위해 5% CO₂ 공급 및 37°C 온도를 유지하는 가습 인큐베이터를 사용합니다.
보관:
세포 생존율을 유지하기 위해 이 세포들은 -150°C 이하의 온도 또는 액체 질소의 기상 상태에서 보관됩니다.
동결 과정 및 배지:
B16 세포를 동결할 때는 CM-1 또는 CM-ACF 동결 배지를 사용하여 서서히 동결하는 과정을 거칩니다.
해동 과정:
동결된 B16 세포는 항균제가 포함된 수조에서 37°C로 해동합니다. 해동된 세포는 배양 배지가 들어 있는 플라스크에 분주하여 직접 배양할 수 있습니다. 또한, 이 세포들은 원심분리를 통해 동결 배지 성분을 제거한 후 새로운 배지에서 배양할 수 있습니다.
생물안전 등급:
B16 세포주는 생물안전 1등급 실험실에서 취급하거나 유지 관리해야 합니다.
B16 세포주: 장점과 단점
다른 세포주와 마찬가지로, B16 세포주도 고유한 장점과 단점을 모두 가지고 있습니다. 이 흑색종 세포주의 주요 장단점은 이 섹션에 나열되어 있습니다.
장점
B16은 그 장점 덕분에 전이 연구에 널리 사용되는 최초의 효과적인 생쥐 모델입니다. 이 피부암 세포주의 몇 가지 장점은 다음과 같습니다:
배양이 용이함
B16 세포주는 연구실에서 배양하기 쉽습니다. 이 세포주는 암 세포 생물학, 신호 전달 경로 등을 연구하는 데 널리 사용됩니다.
빠른 증식
B16 흑색종 세포주는 높은 증식률을 보여 세포 분열 및 성장 과정을 연구하는 데 적합합니다.
종양 형성 능력
B16은 침윤, 이동, 증식 등 종양과 유사한 특성을 지닌 종양 형성 세포주입니다. 종양 형성, 진행 및 전이를 연구하는 데 유용합니다.
단점
B16 세포주와 관련된 단점은 다음과 같습니다:
인간 관련성 부족
B16은 마우스 흑색종 세포주이므로 인간 피부암의 생물학적 특성을 정확히 반영하지 못할 수 있어, 연구 결과의 임상 적용 가능성을 제한할 수 있습니다.
이질성
B16 세포는 이질적이며, 동일한 배양 내에서도 다양한 유전적 및 표현형적 특성을 보입니다. 이는 결과의 신뢰성과 재현성에 영향을 미칠 수 있습니다.
B16 세포의 응용 분야
B16 세포주는 연구 분야에서 광범위하게 사용됩니다. 이 세포주의 몇 가지 유망한 응용 분야는 다음과 같습니다:
- 종양 생물학: 이 생쥐 피부암 세포주는 종양 형성 능력이 있으며, 종양 생물학을 이해하는 데 널리 사용됩니다. B16 세포를 사용하여 종양 세포의 성장, 증식 및 전이에 숨겨진 세포적 기전을 규명하기 위한 여러 연구가 수행되었습니다. 2020년에 수행된 한 연구에서는 B16 세포를 활용하여 흑색종의 형성, 성장 및 전이에 있어 장쇄 비코딩 RNA인 LncRNA MEG3의 역할을 조사했습니다. 이 연구는 비코딩 RNA가 miRNA-21/E-Cadherin 축을 조절하여 이러한 세포 현상을 촉진한다는 사실을 밝혀냈습니다 [2]. 이와 유사하게, B16 세포를 사용하여 종양 유발 면역억제에서 Notch1 신호전달의 잠재적 역할을 규명하기 위한 연구도 수행되었습니다 [3].
- 신약 개발: B16 세포는 후보 약물의 잠재적 치료 효과를 검증하고 테스트하는 데 사용됩니다. 한 연구에서는 B16 세포주를 사용하여 천연 화합물인 네오감보직산의 항종양 효과를 평가했습니다. 연구 결과에 따르면, 이 화합물은 PI3K/Akt/mTOR 신호 전달 경로를 조절하여 암세포 사멸을 유발하는 것으로 나타났습니다 [4]. 또 다른 연구에서는 B16 세포주를 사용하여 사포닌인 진세노사이드 Rg3의 항흑색종 효과를 조사했습니다. 이 연구는 이 천연 화합물이 ERK 및 Akt 경로를 하향 조절함으로써 항종양 활성을 유발한다고 제안했습니다 [5].
5. B16 세포를 다룬 연구 논문
다음은 B16 흑색종 세포주를 다룬 주요 연구 논문들입니다.
LncRNA MEG3는 miR-21/E-cadherin 축을 조절하여 흑색종의 성장, 전이 및 형성을 촉진한다
Cancer Cell International 저널(2020)에 게재된 이 논문은 장쇄 비코딩 RNA(LncRNA) MEG3가 miR-21/E-Cadherin 축을 조절함으로써 B16 흑색종 세포의 종양 형성, 성장 및 전이를 촉진한다고 제안했습니다.
새로운 소랄렌 유도체인 MPFC는 B16 세포에서 p38 MAPK 및 PKA 신호 전달 경로를 활성화하여 멜라닌 생성을 촉진한다
이 논문은 2018년 International Journal of Molecular Medicine에 게재되었습니다. 이 연구는 B16 세포에서 소랄렌 유도체인 4-메틸-6-페닐-2H-푸로[3,2-g]크로멘-2-온(MPFC)의 멜라닌 생성 효과와 기전을 조사했습니다. 이 연구는 이 유도체가 PKA 및 p38 MAPK 세포 신호 전달을 자극하여 멜라닌 생성을 촉진한다고 제안했다.
흑색종 세포에서 Notch1 신호전달은 TGF-β1의 발현 증가를 통해 종양에 의한 면역억제를 촉진했다
이 연구는 2018년 Journal of Experimental & Clinical Cancer Research에 게재되었다. 연구 결과에 따르면, B16 세포에서 Notch1 신호 전달이 활성화되면 TGF-β1 유전자의 발현이 증가하여 항종양 면역 반응을 저해할 수 있는 것으로 보인다.
네오감보직산은 PI3K/Akt/mTOR 신호 전달 경로를 통해 흑색종 B16 세포의 세포 사멸을 유도한다
이 연구는 2020년 Chunlan Wu와 동료들이 수행했으며, 『Acta Biochimica Polonica』 저널에 게재되었다. 이 연구에 따르면 천연 화합물인 네오감보기산은 PI3K/Akt/mTOR 신호 전달 경로를 조절하여 B16 흑색종 세포의 사멸을 유발할 수 있다.
강력한 항암제로서의 이리듐(III) 복합체는 AKT/mTOR 경로의 억제를 통해 B16 세포에서 세포사멸과 자가포식을 유도한다
이 연구 논문은 2018년 『European Journal of Medicinal Chemistry』에 게재되었다. 이 연구에서 연구진은 B16 흑색종 세포를 사용하여 이리듐(III) 복합체라는 화합물의 항암 활성을 조사했다.
아일란톤은 흑색종 B16 및 A375 세포에서 세포 주기 정지와 세포 사멸을 유도한다
이 연구는 식물 유래 생리활성 물질인 아일란톤이 B16 및 A375 흑색종 세포에서 세포 사멸과 세포 주기 정지를 유도할 수 있으므로 항암 잠재력을 지닌다고 제안했습니다. 이 논문은 2019년 『Biomolecules』에 게재되었습니다.
B16 세포주 관련 자료: 프로토콜, 동영상 등
B16 세포주의 배양 및 형질 도입 프로토콜을 설명하는 자료는 제한적입니다.
- 흑색종 세포 배양: 이 동영상은 흑색종 세포주 배양에 유용한 팁을 제공합니다.
- 세포주 재배양: 이 동영상은 세포주의 일반적인 재배양 프로토콜을 설명합니다.
- B16F10 세포주 형질 도입: 이 동영상은 B16 흑색종 세포의 하위 계통에 대한 형질 도입 프로토콜을 설명합니다. B16 세포에 대한 형질 도입 프로토콜을 최적화하는 데 도움이 될 수 있습니다.
다음은 B16 세포를 위한 몇 가지 세포 배양 프로토콜입니다.
- B16 세포 배양: 이 웹사이트에는 배지, 재배양, 해동 및 동결을 포함하여 B16 세포 배양에 필요한 모든 정보가 포함되어 있습니다.
참고 문헌
- Danciu, C. 외, 네 가지 다른 B16 생쥐 흑색종 세포 아계통의 행동: C57 BL/6J 피부. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Wu, L. 외, LncRNA MEG3는 miR-21/E-cadherin 축을 조절하여 흑색종의 성장, 전이 및 형성을 촉진한다. Cancer Cell International, 2020. 20: p. 1-14.
- Yang, Z. 외, 흑색종 세포 내 Notch1 신호전달은 TGF-β1의 발현 증가를 통해 종양 유발 면역억제를 촉진한다. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
- Wu, C. 외, 네오감보직산은 PI3K/Akt/mTOR 신호 전달 경로를 통해 흑색종 B16 세포의 세포 사멸을 유도한다. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
- Meng, L. 외, ERK 및 Akt 경로의 하향 조절을 통한 흑색종에서 진세노사이드 Rg3의 항종양 활성. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.