3T3-L1 세포주: 비만을 이해하는 열쇠

마우스 전지방세포에서 유래한 3T3-L1 세포주는 비만, 당뇨병 및 기타 관련 건강 상태와 관련된 근본적인 세포 메커니즘을 연구하는 데 광범위하게 활용되고 있습니다. 또한 3T3-L1 세포는 전지방세포가 성숙한 지방세포로 변하는 과정인 지방 형성을 촉진하는 복잡한 세포 하부 경로를 탐구하는 데 중추적인 역할을 합니다.

3T3-L1 세포주의 배경과 기원

이 섹션에서는 3T3-L1 세포주의 특성, 3T3-L1 지방세포의 크기, 유래 등 이 세포주로 연구를 시작하는 연구자에게 기본이 되는 3T3-L1 세포주에 대한 필수적인 세부 사항을 자세히 설명합니다.

마우스 섬유아세포 세포에서 유래한 3T3-L1 라인은 지질 축적 능력을 위해 선택된 스위스 알비노 마우스의 3T3 세포에서 하위 복제되었습니다. 전구체 3T3 세포는 마우스 배아에서 추출했습니다.
처음에는 3T3-L1 세포는 섬유아세포와 유사한 구조를 보이지만 특정 조건에서 분화하여 지방 세포의 특성을 채택합니다.
3T3-L1 지방세포의 크기는 분화 단계에 따라 달라지는데, 미분화 세포는 일반적으로 평균 직경이 15.4μm인 반면 분화 후 7일째와 14일째의 평균 직경은 각각 약 18.8μm와 20.3μm입니다[1].
3T3-L1 세포는 염색체 수가 2n = 40인 불안정한 핵형이 특징입니다.

성장하는 지방 세포의 3차원 의료용 애니메이션.

3T3-L1 세포의 배양

3T3-L1 세포는 연구 실험실에서 널리 배양됩니다. 이 섹션에서 제공하는 다음 배양 정보는 3T3-L1 배양을 효과적으로 처리하고 유지하는 데 도움이 될 수 있습니다. 여기에서 알 수 있습니다: 3T3-L1 세포의 배양 시간은 어떻게 되나요? 3T3-L1은 부착성 세포주인가요, 현탁성 세포주인가요? 3T3-L1의 시딩 밀도는 얼마인가요?

3T3-L1 세포 배양을 위한 핵심 사항

인구 배가 시간:	3T3-L1 세포의 대략적인 인구 배가 시간은 28시간입니다.
부착 또는 정지 상태:	3T3-L1은 부착형 세포주입니다.
시딩 밀도:	3T3-L1 세포의 경우 3 x¹⁰³ ^세포/cm2 세포 시딩 밀도를 권장합니다. 세포 밀도가 6 x¹⁰⁴ ^{세포/cm2에} 도달하면 세포를 70~80% 농도로 통과시켜야 합니다. 시딩을 위해 세포를 1배 PBS로 세척하고 Accutase 용액을 사용하여 분리한 후 배지와 함께 첨가하고 원심분리합니다. 회수된 세포를 새로운 배지에 다시 부유시키고 새 플라스크에 분배합니다.
성장 배지:	3T3-L1 세포의 최적 성장을 위해 DMEM(둘베코의 수정된 독수리 배지)을 사용합니다. 이 배지에는 일반적으로 4.0mM L-글루타민, 3.7g/L NaHCO3, 4.5g/L 포도당 및 10% 태아 소 혈청이 보충됩니다.
성장 조건:	3T3-L1 세포 배양은 37°C의 가습 인큐베이터에서 5% CO2 공급으로 유지합니다.
보관:	3T3-L1 세포는 -150°C 이하의 온도에서 전기 냉동고 또는 액체 질소 증기 상에 보관합니다.
냉동 과정 및 배지:	3T3-L1 지방세포 동결에는 저속 동결 방법을 통해 CM-1 또는 CM-ACF 배지를 사용합니다. 이 방법은 세포 온도를 1°C만 떨어뜨리고 생존력을 보호합니다.
해동 과정:	냉동된 3T3-L1 세포를 수조에서 37°C로 급속 해동합니다. 해동된 세포는 즉시 배양액에 다시 부유하고 플라스크에 직접 분배하여 성장시킬 수 있습니다. 이와 반대로 세포를 원심분리하여 오래된 동결 배지를 제거하고 새로운 배지에 다시 부유시킨 후 배양할 수 있습니다.
생물학적 안전 수준:	3T3-L1 쥐 세포주에는 생물안전 레벨 1 실험실 설정을 권장합니다.

10배 및 20배 배율에서 3T3-L1 세포의 합류성 단층.

3T3-L1 세포주: 장점과 한계

이 섬유아세포 세포주에는 많은 장단점이 있습니다. 여기에서는 3T3-L1 세포주의 몇 가지 중요한 장점과 한계에 대해 설명합니다.

장점

손쉬운 관리: 3T3-L1 세포는 실험실에서 쉽게 배양할 수 있어 여러 세포 기반 실험에 편리합니다.
저렴한 비용: 3T3-L1 세포주는 갓 분리한 지방세포보다 저렴하여 분화 및 기타 세포 과정을 연구하는 데 비용 효율적인 대안을 제공합니다.
분화 능력: 마우스 섬유아세포 3T3-L1 세포는 분화 능력을 가지고 있습니다. 특정 자극에 노출되면 지방세포 표현형 및 기타 특징적인 특징을 획득할 수 있습니다.

제한 사항

생리적 관련성이 부족합니다: 생쥐에서 유래한 3T3-L1 지방 세포는 인간 지방 세포 및 지방 조직과의 생리적 관련성이 부족합니다. 생체 내 지방 조직의 이질성과 복잡성을 완전히 나타내지 못하기 때문에 실험 결과를 인간에게 직접 적용하는 데 한계가 있습니다.

3T3-L1 세포의 응용

3T3-L1 지방 세포의 분화

3T3-L1 세포주는 일반적으로 지방 세포 생물학, 지방 세포 분화 및 관련 세포 및 분자 메커니즘을 연구하는 데 사용됩니다. 3T3-L1 세포가 지방세포로 분화하는 과정은 지방세포의 생체 내 분화 경로를 매우 유사하게 모방합니다. 지방 조직에서 간질 혈관 분획 내에 존재하는 전구 세포는 영양 상태 및 호르몬 신호를 포함한 다양한 생리적 신호에 반응하여 성숙한 지방 세포로 분화할 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다. 3T3-L1 모델을 사용하면 지방세포 전구체 분화 경로를 자세히 연구할 수 있어 지방 형성과 외부 요인에 의한 조절을 관장하는 분자 메커니즘에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다.

분화 과정은 일반적으로 인슐린, 덱사메타손, 이소부틸메틸잔틴(IBMX)을 포함하는 특정 유도제에 3T3-L1 전지방세포를 노출시킴으로써 배양에서 유도할 수 있습니다. 이러한 유도는 일련의 전사 및 세포 이벤트를 촉발하여 지질 방울 축적, 인슐린 민감성, 퍼옥시좀 증식인자 활성화 수용체 감마(PPARγ) 및 CCAAT/인핸서 결합 단백질 알파(C/EBPα) 같은 지방세포 특이 단백질의 발현을 특징으로 하는 지방세포 표현형을 획득하도록 유도합니다.

성숙한 3T3-L1 지방세포의 기능적 특성

분화된 3T3-L1 지방세포는 지방 생성 유전자를 발현하며 지질 저장 및 이동 능력, 아디포카인 분비, 인슐린 반응 등 성숙한 지방세포의 여러 기능적 특성을 나타냅니다. 이러한 세포는 중성지방을 합성하고 분해할 수 있게 되어 에너지 항상성 유지에 중요한 역할을 합니다. 3T3-L1 지방세포에 대한 연구는 지방 조직의 내분비 기능을 조명하여 전신 대사에 영향을 미치는 다양한 생리 활성 펩타이드와 단백질의 분비를 강조했습니다.

당뇨병 및 비만 연구

3T3-L1 전지방세포는 당뇨병과 비만에 관여하는 분자 경로를 연구하기 위한 시험관 내 모델로 사용됩니다. 또한, 이러한 질병을 퇴치하기 위한 약물이나 기타 치료제를 선별하는 데 도움이 될 수 있습니다. 예를 들어, 2022년에 수행된 연구에서는 3T3-L1 세포를 사용하여 전통 허브인 오시멈 포스콜레이 벤트의 항당뇨 효과를 탐구했습니다. 연구진은 처리된 세포에서 포도당 흡수, 지방 생성 마커, 전사 마커(DGAT1, CEBP/α, PPARγ)를 평가했습니다. 이에 따라 3T3-L1 세포를 사용하여 식물 화합물인 캠페롤의 항비만 효과를 평가한 연구가 진행되었습니다. 연구진은 이 화합물이 지방 전구세포에서 지방 형성을 억제하고 지방 분해를 촉진함으로써 항비만 잠재력을 보인다는 사실을 발견했습니다.

3T3-L1 세포를 다룬 연구 논문

다음은 3T3-L1 세포를 다룬 저명한 논문 중 가장 많이 인용된 최근 논문입니다.

아피게트린은 PPARγ와 CEBP-α를 하향 조절하여 3T3-L1 세포에서 지방 형성을 억제합니다

건강과 질병의 지질(2018)에 발표된 논문에서는 플라보노이드인 아피게트린이 3T3-L1 세포에서 전사인자 수준, 즉 CEBP-α와 PPARγ를 감소시켜 지방 형성을 억제한다고 제안했습니다.

3T3-L1 전지방세포와 난소 절제 생쥐에서 로가닉산의 항지방 생성 효과

이 연구는 2018년에 Molecules 저널에 게재되었습니다. 이 연구에서는 용담( Gentiana lutea L.) 뿌리의 화합물 로가닉산이 3T3-L1 세포에서 지방 생성 효과를 발휘하여 항비만 잠재력을 가지고 있다고 제안했습니다.

3T3-L1 지방 세포의 지질 함량, 세포 생존력 및 산화 스트레스에 대한 디메틸 설폭사이드의 용량 의존적 효과

독성학 보고서(2018)에 실린 이 논문에서는 디메틸 설폭사이드가 3T3-L1 세포의 지질 함량, 산화 스트레스 및 생존력에 미치는 잠재적 영향을 용량 의존적으로 탐구했습니다.

아드로핀이 3T3-L1 세포와 쥐의 일차 지방 전구세포의 증식 및 분화에 미치는 영향

이 기사는 2019년 분자 및 세포 내분비학 저널에 게재되었습니다. 이 연구에서 연구자들은 아드로핀 단백질이 3T3-L1 세포 증식 및 분화와 쥐의 일차 지방세포에 미치는 영향을 평가했습니다.

운다리아 피나티피다의 후코이단은 3T3-L1 지방세포에서 포도당 흡수를 자극하고 기저 지방 분해를 감소시켜 항당뇨 효과가 있습니다

이 영양 연구(2019) 연구에서는 운다리아 피나티피다에서 얻은 황화 다당류인 후코이단의 항당뇨 효능을 조사했습니다. 그 결과 후코이단은 포도당 흡수를 촉진하고 지방 전구세포 3T-L1 세포의 기저 지방 분해를 감소시키며 이러한 효과를 발휘하는 것으로 밝혀졌습니다.

진세노사이드 Rg2는 AMPK 경로를 통해 3T3-L1 전지방세포에서 지방 형성을 억제하고 고지방식이로 유도된 비만 마우스에서 비만을 억제합니다

이 연구 논문은 2019년에 식품 및 기능 저널에 게재되었습니다. 천연물인 진세노사이드 Rg2가 AMPK 캐스케이드를 조절하여 3T3-L1 세포와 비만 마우스에서 지방 형성을 억제함으로써 항비만 효과를 발휘한다는 것을 제안했습니다.

3T3-L1 세포주에 대한 리소스: 프로토콜, 동영상 등

3T3-L1은 유명한 마우스 섬유아세포 세포주입니다. 이 세포주의 배양, 감염, 동결 및 해동 프로토콜에 대한 여러 리소스를 사용할 수 있습니다.

여기에 몇 가지 리소스가 언급되어 있습니다.

3T3-L1 세포의 분화: 이 링크에서는 3T3-L1 전지방세포 분화에 대한 자세한 프로토콜을 제공합니다.
3T3-L1 세포 이식: 이 동영상은 3T3-L1 세포의 감염에 대한 튜토리얼 가이드입니다.
3T3 세포의 통과: 이 동영상에서는 3T3 마우스 섬유아세포 세포를 통과시키는 절차에 대해 설명합니다.

여기에서 3T3-L1 세포주 배양에 대한 몇 가지 프로토콜을 확인할 수 있습니다.

3T3-L1 세포 배양하기: 이 링크에는 3T3-L1 세포 분열에 대한 자세한 단계별 가이드가 포함되어 있습니다. 또한 세포 동결 및 분화를 위한 프로토콜도 포함되어 있습니다.
3T3-L1 세포 배양 및 분화: 이 링크에서는 3T3-L1 세포의 배양 및 분화를 위한 프로토콜을 제공합니다.

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콘텐츠: 1.5 milliliter

세금 및 배송비 별도 가격

cryovial

제품 번호: 400107

참고 문헌

Scepter™ 2.0 셀 카운터를 이용한 인간 지방 유래 줄기세포의 신속한 분석 및 지방세포로의 3T3-L1 분화. 바이오테크놀로지, 2012. 53(2): p. 109-111.
Xu, J., et al., microRNA-16-5p는 EPT1 조절을 통해 3T3-L1 지방세포 분화를 촉진합니다. 생화학 및 생물 물리학 연구 커뮤니케이션, 2019. 514(4): p. 1251-1256.
Zhang, L., 외., 분화 및 지질 대사 촉진은 3T3-L1 전지방세포에 대한 DINP 노출의 주요 효과입니다. 환경 오염, 2019. 255: p. 113154.
칼릴, H.E. 외, 인실리코 접근법을 이용한 당뇨병 쥐와 3T3-L1 섬유아세포의 당뇨, 세포사멸, 지방 생성 바이오마커에 대한 오시멈 포스콜레이 벤트의 개선 효과. Molecules, 2022. 27(9): p. 2800.
토레스-빌라레알, D. 외, 3T3-L1 세포에서 지방 형성을 억제하고 지방 분해를 증가시켜 켐페롤의 항비만 효과. 생리학 및 생화학 저널, 2019. 75: p. 83-88.