NCI-H460細胞 - NCI-H460の知見で肺がん研究をナビゲートする
NCI-H460は、肺がんおよび毒性学研究で一般的に使用されるヒト由来の非小細胞肺がん細胞である。この細胞株は、腫瘍の発生、増殖、薬剤耐性を含む様々な癌生物学的側面を研究するための貴重なツールである。さらに、NCI-H460細胞は抗癌剤の開発に適したモデルである。
NCI-H460細胞起源と一般的特徴
細胞株の起源と一般的な特徴は、その研究応用に大きく寄与する。このセクションでは、NCI-H460肺がん細胞の起源と顕著な特徴について解説する。あなたは知ることになる：NCI-H460細胞とは何か？NCI-H460細胞株とは何ですか？NCI-H460の形態は？
- NCI-H460細胞株は大細胞肺癌のヨーロッパ人男性の胸水から生まれた。1982年にA.F. Gazdarらによって樹立されました。
- NCI-H460肺癌細胞は上皮形態を有している。
- NCI-H460は低3倍体の核型を持つ腫瘍性細胞株である。これらの細胞の最頻染色体数は57である。NCI-H460細胞は58染色体も同程度の割合で保有している。
- これらの肺癌細胞は非小細胞肺腫瘍のように多くのNCI-NCI-H460変異、例えばNCI-H460 KRAS変異を有しており、これらは細胞の増殖、成長、浸潤、転移に関与している。
NCI-H460細胞 培養情報
NCI-H460細胞株を適切に取り扱い、維持するために以下のポイントを知っておく必要があります。NCI-H460の倍加時間、NCI-H460培地、NCI-H460肺がん細胞の基本的な細胞培養手順についてお知らせします。
NCI-H460細胞培養のポイント
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倍加時間： |
NCI-H460の倍加時間は約33時間である。 |
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接着または懸濁状態： |
NCI-H460肺がん細胞は接着している。 |
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副培養比率 |
NCI-H460細胞に推奨される分割比率は1:2および1:4である。古い培地を除去した後、接着細胞を1×リン酸緩衝生理食塩水で洗浄する。その後、細胞をAccutase passaging solutionとともに周囲温度で8～10分間インキュベートする。解離した細胞を培地に再懸濁し、遠心分離する。回収した細胞を再び懸濁し、培養用の新しいフラスコに流し込む。 |
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増殖培地： |
RPMI1640をNCI-H460培地として使用する。10%ウシ胎児血清、2.1mM安定グルタミン、2.0g/L NaHCO3を添加する。培地は週に2～3回交換する。 |
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増殖条件： |
NCI-H460の培養は、5%CO2を供給し続ける加湿インキュベーター内で37℃の温度で維持する。 |
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保存： |
NCI-H460肺がん細胞は、液体窒素の気相中、または電気式超低温フリーザーで-150℃以下で長期保存できる。 |
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凍結プロセスと培地 |
NCI-H460細胞の凍結保存にはCM-1またはCM-ACF培地を使用する。細胞の生存率を最大限に守るため、緩慢凍結法を推奨する。 |
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融解プロセス： |
凍結したNCI-H460細胞は、あらかじめ温めたウォーターバス（37℃）で40～60秒間、小さな氷の塊が残るまで解凍する。解凍した細胞に新鮮培地を加え、遠心分離して凍結培地成分を除去する。回収した細胞ペレットを再度懸濁し、細胞を増殖用培地の入った新しいフラスコに分注する。NCI-H460細胞はフラスコ表面に接着するのに24時間近くかかることがある。 |
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バイオセーフティーレベル |
NCI-H460肺がん細胞はバイオセーフティーレベル1の実験室で取り扱われ、維持されている。 |
NCI-H460細胞の利点と欠点
NCI-H460は肺がん研究で広く用いられている細胞株である。このセクションでは、NCI-H460肺がん細胞に関する一般的な利点と欠点を取り上げる。
利点
NCI-H460非小細胞肺がん細胞株の利点は以下の通りである：
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腫瘍由来
NCI-H460細胞株は大細胞肺がん患者由来で、この特定の肺がんタイプを代表する。この細胞株は肺癌の生物学を研究し、新しい効果的な治療法を開発するためのモデルとして使用されている。NCI-H460細胞は腫瘍形成能を有しており、免疫不全マウスに注入してin vivo腫瘍モデルを作成し、腫瘍の増殖、発生、潜在的な薬剤の有効性を研究することができる。
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高い増殖率
NCI-H460はA549のような他の非小細胞肺がん細胞株よりも高い増殖率を示す。この利点は利用可能性を高め、研究者が再現性のある時間的制約のある実験を行うのに役立つ。
欠点
NCI-H460肺がん細胞に関連する欠点は以下の通りである：
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均一性
NCI-H460細胞は一人の患者の腫瘍から得られたため均質である。従って、一般的に患者腫瘍で観察される複雑性や不均一性が欠如している。
NCI-H460細胞の研究応用
NCI-H460肺がん細胞は肺がんに関連した研究で広く使用されている。以下にNCI-H460細胞の重要な研究応用例を挙げる：
- 肺がん研究： 肺がん研究：NCI-H460細胞は、腫瘍の発生、増殖、転移に関与する細胞および分子メカニズムを研究するための貴重なモデルである。さらに、肺がんの進行に関連するシグナル伝達経路、分子標的、様々な遺伝子変異を研究するためにも使用される。これらの因子を効果的に研究するために、NCI-H460細胞を用いていくつかの研究が行われてきた。2019年に実施された研究では、過剰発現した核内ユビキタスカゼインおよびサイクリン依存性キナーゼ基質（NUCKS）が、PI3K/ACTシグナル伝達経路の制御を介して腫瘍細胞の増殖に関与することが提唱された［1］。同様に、eIF4E遺伝子の役割を研究するためにNCI-H460細胞を用いたin vitroとin vivoの研究がある。その結果、eIF4E遺伝子が肺癌の成長と血管新生に関与していることが明らかになり、有望な抗肺癌剤を開発するための標的となりうることがわかった[2]。
- 創薬と薬剤開発 ヒト肺癌細胞株であるNCI-H460は、創薬や薬剤開発の研究に広く用いられている。研究者はこれらの細胞を用いて、新規薬剤候補、標的療法、主にNCI-H460のKRAS変異を標的とした治療法の毒性と有効性を調べている。Haoyue Hu氏らが2023年に行った研究では、NCI-H460細胞を用いてアンロチニブの抗がん作用を検討した。その結果、アンロチニブはMEK/ERKシグナル伝達カスケードを阻害することによって、KRAS変異肺がん細胞の増殖に部分的に影響を及ぼすことが示された［3］。同様に、フェノール化合物であるカルノシン酸が、NCI-H460細胞を用いて抗増殖活性とアポトーシス活性についてスクリーニングされた[4]。
- 薬剤耐性： NCI-H460細胞株は肺癌の薬剤耐性メカニズムを研究するのに理想的である。研究者らはこれらの細胞を用いて薬剤耐性モデルを開発し、基礎となる遺伝子、分子因子、シグナル伝達経路を同定している。例えば、非小細胞肺癌細胞におけるペメトレキセド耐性の基礎となる分子メカニズムを研究するために、マルチターゲット抗葉酸剤であるペメトレキセド耐性NCI-H460細胞を開発した研究がある [5]。
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NCI-H460細胞を用いた研究発表
NCI-H460肺がん細胞株に関する興味深い研究発表をいくつかご紹介します。
黒豆由来の天然グルカンがPI3K-AktおよびMAPK経路を介してがん細胞の増殖を抑制する
Molecules誌（2023年）に掲載されたこの研究は、黒豆由来の天然α-1,6-グルカンBBWPWが、PI3K/Akt/MAPK経路を制御することにより、NCI-H460細胞の増殖を阻害することを提案した。
ジオシン-6′-O-アセテートは、細胞周期の停止とカスパーゼ依存的アポトーシスの誘導を介して肺がん細胞の増殖を阻害する
Phytomedicine（2019年）のこの論文は、新規天然化合物であるジオシン-6′-O-アセテートがNCI-H460肺がん細胞に対して抗増殖効果を発揮することを研究した。
miRNA-425-5pはPTEN/PI3K/ACTシグナル軸を介して肺がんの増殖を促進する
BMC Pulmonary Medicine（2020年）の研究によると、miRNA-425-5pはPTEN/PI3K/ACT経路を介して肺癌の腫瘍形成を促進する。
キナリザリンは、Akt、MAPK、STAT3およびp53シグナル伝達経路を調節することにより、肺がんA549細胞に対して抗腫瘍効果を発揮する
Molecular Medicine Reports（2017年）のこの論文は、NCI-H460および他の肺がん細胞におけるキナリザリン化合物の抗腫瘍能とその基礎となるメカニズムを提案した。
ユーカリ・グロブルスLabill.煎じ薬エキスは、p53レベルを増加させ、細胞周期プロファイルを変化させることにより、NCI-H460細胞の増殖を阻害する
Food and Function誌（2019年）に掲載されたこの研究は、NCI-H460細胞を用いたユーカリ・グロブルス・ラビル.エキスの潜在的な抗がん作用を強調している。調査結果は、植物エキスがNCI-H460 p53発現を増加させ、細胞周期プロファイルを調節することによってこれらの効果を示したことを示した。
NCI-H460細胞株のリソース：プロトコール、ビデオ、その他
NCI-H460肺がん細胞をフィーチャーしたオンラインリソースは以下の通り。
- NCI-H460細胞トランスフェクションこのチュートリアルビデオはNCI-H460細胞をプラスミドDNAでトランスフェクションするためのステップバイステップのガイドです。
以下のリンクはH460細胞の必須細胞培養情報を含んでいます。
- NCI-H460細胞このウェブサイトでは、NCI-H460細胞の培地、サブカルチャー、凍結、融解の手順に関する重要な情報を提供します。
- NCI-H460細胞の継代 この文書では、NCI-H460細胞の継代培養とサブカルチャーについてご案内します。また、NCI-H460細胞のトランスフェクションのプロトコールを学ぶのにも役立ちます。
NCI-H460細胞株の探索：FAQと洞察
参考文献
- Hu, C., et al.,NUCKSはPi3k/Aktシグナル伝達経路を介して肺癌細胞の増殖、移動、浸潤を促進する。Clinical and Investigative Medicine, 2021.44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al.,EGPI-1, a novel eIF4E/eIF4G interaction inhibitor, inhibits lung cancer cell growth and angiogenesis through Ras/MNK/ERK/eIF4E signal pathway.Chemico-Biological Interactions, 2022.352: p. 109773.
- Hu, H., et al.,アンロチニブは、MEK/ERK経路を抑制することにより、KRAS変異肺がん細胞に対して抗がん作用を示す。Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni、A.C.ら、カルノシン酸は腫瘍性NCI-H460および非腫瘍性IMR-90肺細胞において抗増殖およびアポトーシス作用を示す。トキシコロジーと環境衛生のジャーナル、パートA、2020年。83(10): p. 412-421.
- Xu,Y.-L.ら、ペメトレキセド耐性NCI-H460/PMT細胞の樹立と特性解析。Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry（旧Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents）、2019年。19(6): p. 731-739.