HT22細胞株
HT22は神経科学研究で一般的に使用されるマウス神経細胞株である。神経変性疾患の研究や、潜在的な神経保護療法や治療法の試験に有用である。その上、HT22細胞はグルタミン酸感受性であるため、グルタミン酸誘発毒性や神経細胞障害を調べるのに用いられる。
この記事では、あなたの研究活動に役立つHT22細胞の重要な側面に焦点を当てます。主な内容は以下の通りです：
- HT22細胞の一般的属性と起源
- HT22細胞株の培養に関する情報
- HT22細胞株の利点と欠点
- HT22細胞株の研究応用
- HT22細胞を取り上げた研究論文
- HT22細胞に関するリソース：プロトコル、ビデオ、その他
1.HT22細胞の一般的特徴と起源
このセクションでは、HT22細胞の起源と一般的な特徴に光を当てます。細胞株に関するこのような情報を知っておくことは、その細胞株の研究を始める前に必要です。ここでは以下のことを学びます：HT22細胞とは何か？HT22海馬細胞の形態とは？HT22細胞のサイズは？
HT22はマウスの脳の海馬領域に由来する連続細胞株である。温度感受性ポリオーマウイルスであるシミアンウイルス40（SV40）T抗原を介したマウス神経組織の不死化によって開発された親細胞株HT-4のサブクローンです。
これらの細胞は成熟海馬細胞とは異なり、海馬由来の成熟神経細胞のようにグルタミン酸受容体やコリン作動性受容体を持たない。従って、記憶に関連した研究には適さない[1]。
HT22細胞は上皮細胞様の外観を持つ。
2.HT22細胞株の培養情報
HT22細胞は神経科学の研究室で使用されています。これらの細胞を培養する前に、研究者は作業を簡単かつ効率的にするために必要不可欠な細胞培養情報を探します。このセクションでは、HT22細胞を培養するための重要なポイントをすべて網羅します。知っておいていただきたいことHT22細胞の倍加時間とは？HT22 細胞の培養方法は？HT22細胞培養プロトコールとは？HT22細胞培地とは何ですか？
HT22細胞培養のポイント
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倍加時間： |
HT22細胞の倍加時間は約15時間です。 |
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接着性か懸濁性か： |
HT22細胞は接着性である。 |
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副培養比率： |
HT22海馬細胞のサブカルチャー比率は1:3～1:6である。簡単に説明すると、培地を除去し、接着細胞を1 x PBSで洗浄する。アキュターゼ解離液をフラスコに加え、細胞を周囲温度で8～10分間インキュベートする。その後、新しい培地を加え、細胞をバイアル瓶に集め遠心する。得られた細胞ペレットを注意深く再懸濁し、培養フラスコに分注して増殖させる。 |
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増殖培地： |
HT22細胞の培養にはDMEM培地を用いる。最適な細胞増殖のために、10% FBS、4.5 g/L Glucose、4 mM L-Glutamine、1.5 g/L NaHCO3、および1.0 mM Sodium pyruvateが添加されている。 |
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増殖条件： |
HT22細胞の培養は、加湿インキュベーター（37℃、5％CO2供給 ）内で行う。 |
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保存： |
凍結したHT22細胞は、液体窒素の気相または超低温電気フリーザーで-150℃以下で長期保存できる。 |
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凍結プロセスと培地 |
HT22細胞は、CM-1またはCM-ACF培地で緩慢凍結法により凍結することができる。この方法では、1分間に1℃しか温度が下がらないため、細胞をショックから守り、生存率を維持することができる。 |
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融解プロセス： |
細胞を37℃のウォーターバスで40～60秒間、小さな氷の塊が残るまで解凍する。その後、培地を細胞に加え、遠心分離して凍結培地成分を除去する。細胞ペレットを再懸濁し、細胞を培地の入った新しいフラスコに流し込む。この後、細胞を37℃のインキュベーターで少なくとも24時間培養する。 |
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バイオセーフティ・レベル |
HT22細胞の培養には、バイオセーフティレベル1の実験室設定が必須である。 |
3.HT22細胞株の長所と短所
HT22海馬細胞には、他の神経細胞株とは異なる長所と短所がある。ここでは、この細胞株の特筆すべき長所と短所について述べる。
長所
HT22マウス神経細胞株の長所は以下の通りである：
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増殖速度が速い
HT22細胞の倍加時間は15時間であり、迅速かつ効率的な実験が可能で、タイムリーな研究成果につながる。
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不死化
HT22は不死化細胞株であるため、長期間にわたり継続的な増殖が可能です。このため、細胞の安定した入手が可能で、時間とコストを削減し、一貫した結果を伴う長期的な実験を容易にします。
欠点
HT22細胞の欠点は以下の通りである：
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マウス由来
HT22細胞株はマウスの脳海馬組織由来であるため、ヒトのニューロン細胞の複雑な生理や行動を完全に表現していない可能性があり、トランスレーショナルな関連性が制限される。
4.HT22細胞株の研究応用
HT22細胞は神経生物学研究に広く用いられている。この論文では、この細胞株の有望な応用例をいくつか取り上げる：
- 神経科学研究： 神経科学研究：HT22細胞は神経変性疾患研究、すなわちアルツハイマー病やパーキンソン病研究に広く用いられている。これらの疾患に関する神経毒性や酸化ストレス機構を研究するための貴重な研究ツールと考えられている。2020年に行われた研究では、PI3K/ACT/CREB経路がHT22細胞における高血糖誘発性神経毒性に関与していることが判明した[2]。同様に、最近の研究では、Nrf2/HO-1経路とNF- κBシグナル軸がHT22アミロイドβの毒性に重要な役割を果たしていることが提唱された[3]。
- 薬剤スクリーニング： HT22細胞は、薬物試験やスクリーニングの目的で広く使用されている。HT22細胞は、神経変性疾患と闘うための神経保護効果を示す潜在的な治療薬を研究者が同定するのに役立っている。2019年に実施された研究では、グルタミン酸処理HT22海馬細胞におけるテトラヒドロクルクミン化合物の神経保護能を探索した。ここで、グルタミン酸はHT22細胞において酸化ストレスを誘導し、マイトジェン活性化プロテインキナーゼを活性化することによって細胞死を引き起こす[4]。
5.HT22細胞を取り上げた研究論文
HT22細胞株を用いた興味深い研究論文をご紹介します：
HT22細胞およびアルツハイマー病マウスにおける抗酸化活性を介したクロシンの神経保護作用の検討
International Journal of Molecular Medicine（2019年）に掲載されたこの研究は、L-グルタミン酸で損傷したHT22細胞において、Crocus sativus L.から単離された化合物であるクロシンの神経保護能を提案した。
新規オキシンドール誘導体はマウス海馬HT22細胞における酸化ストレス誘発細胞死を予防する
Neuropharmacology (2018)に掲載されたこの論文は、オキシンドール誘導体が酸化ストレスによって誘導されるHT22細胞死を予防することを報告した。
ジンセノサイドRb2はHT22細胞におけるグルタミン酸媒介性の酸化ストレスと神経細胞死を抑制する
この研究論文は、2019年のJournal of Ginseng Researchに掲載された。本研究は、HT22細胞株を用いて、天然物であるジンセノサイドRb2の神経保護作用を探索した。その結果、ジンセノサイドRb2は、マウス海馬細胞HT22において、グルタミン酸誘発酸化ストレスと細胞死を効率的に減少させることが判明した。
銀ナノ粒子は、PI3K/ACT/mTORシグナル伝達経路を介したオートファジーとアポトーシスを介してHT22細胞の細胞毒性を誘導した。
Ecotoxicology and Environmental Safety (2021)に掲載されたこの研究は、HT22細胞株における銀ナノ粒子の細胞毒性を評価したものである。
この研究論文は、2020年にNeural regeneration research誌に掲載された。フェロスタチン-1は、フェロプトーシスの阻害剤であり、HT22海馬細胞の酸化毒性を防ぐことを提唱した。
6.HT22細胞に関するリソース：プロトコル、ビデオ、その他
HT22細胞のトランスフェクション、分化、細胞培養プロトコルを説明したオンラインリソースをいくつかご紹介します：
- HT22 トランスフェクション： HT22 transfection: この文書には、24ウェルおよび96ウェル細胞培養プレートにおけるHT22トランスフェクションのための最適化されたプロトコールが含まれています。
- HT22細胞の分化：HT22細胞の分化プロトコールについて包括的に解説しています。
以下のリンクにHT22細胞培養プロトコールが掲載されています：
- HT22細胞のサブカルチャー： このリンクは、HT22細胞株の亜培養プロトコールを学ぶのに役立ちます。さらに、細胞に神経毒性を誘導するプロトコルを学ぶのにも役立ちます。
- HT22海馬細胞このウェブサイトには、HT22細胞の倍加時間、培地、細胞培養プロトコールに関する多くの有用な情報が掲載されている。
参考文献
- He, M., et al.,分化はHT22ニューロンの興奮毒性感受性を低下させる。Neural Regen Res, 2013.8(14): p. 1297-306.
- フィセチンは、PI3K/Akt/CREBシグナル経路を介して、HT22細胞の高グルコース誘導神経毒性を抑制する。Frontiers in Neuroscience, 2020.14: p. 241.
- また、"Nrf2/HO-1 "経路を介したHT22細胞のβ-アミロイド誘発神経毒性に対するベルベリンの保護効果も報告されている。Bioorganic Chemistry, 2023.133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al.,海馬HT22細胞におけるグルタミン酸誘導酸化ストレスに対するテトラヒドロクルクミンの神経保護効果.Molecules, 2019.25(1): p. 144.