B-LCL-HROC195細胞
一般情報
| 説明 | B-LCL-HROC195は、成人患者の腫瘍組織または末梢血から分離したBリンパ球を起源とする、エプスタイン・バーウイルス(EBV)不死化ヒトBリンパ芽球様細胞株である。 本細胞は、T細胞およびNK細胞の増殖を抑制するシクロスポリンAの存在下で、マーモセット細胞株B95/8由来のEBV含有上清によるex vivo感染により生成された。数週間の培養後、安定したリンパ芽球様細胞の増殖が達成され、長期的なin vitro増殖に適した持続的に増殖する単クローン性または寡クローン性のB細胞集団が得られた。 免疫表現型において、B-LCL-HROC195はCD19およびCD20の発現に加え、CD23やCD80などの高レベルの活性化・成熟マーカーを特徴とする成熟・活性化B細胞プロファイルを示す。MHCクラスIおよびクラスII分子の強い発現は、抗原提示能が保持されていることを示唆する。 個々のクローンに応じて、CD27、CD38、CD138などの分化関連マーカーの発現が変動することが観察され、これはB細胞成熟の異なる段階を反映している。T細胞マーカーは陰性であり、系統特異性が確認されている。 機能的には、B-LCL-HROC195は特定のアイソタイプ(例:IgG、IgM、IgA)の免疫グロブリンを分泌し、長期培養中も安定して維持される。 分泌された抗体は培養上清から回収可能であり、抗原結合アッセイ、腫瘍細胞認識研究、疾患関連抗原の同定など、下流応用に使用できる。EBV不死化B細胞モデルとして、B-LCL-HROC195は腫瘍免疫学や全身性免疫応答の文脈における体液性免疫応答、B細胞活性化・分化、抗体媒介メカニズムを調査するための堅牢なin vitroプラットフォームを提供する。 |
|---|---|
| 生物 | 人間 |
| 組織 | 末梢血 |
| 病気 | 癌腫 |
| 同義語 | Bc HROC195 |
特徴
| 年齢 | 年齢不詳 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| エスニシティ | 白人 |
| 形態学 | 丸い細胞 |
| セルタイプ | Bリンパ芽球 |
| 成長特性 | サスペンション |
規制データ
| 引用 | B-LCL-HROC195 (Cytion カタログ番号 302043) |
|---|---|
| バイオセーフティレベル | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| セロサウルス・アクセション | CVCL_B7FC |
生体分子データ
| 表面抗原 | CD19 |
|---|---|
| ウイルス | 形質転換体EBV |
ハンドリング
| 培地 | RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a) |
|---|---|
| サプリメント | 培地に10%熱不活性化FBSを添加する。 |
| サブカルチャー | フラスコ内の細胞懸濁液をピペッティングにより上下に優しく均質化し、代表的なサンプルを採取して1mlあたりの細胞密度を測定する。新鮮な培養液で懸濁液を希釈し、細胞濃度を1×10⁵細胞/mlに調整した後、調整した懸濁液を新たなフラスコに分注し、さらなる培養を行う。 |
| フリーズ・ミディアム | 凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。 |
| 細胞の解凍と培養 |
|
| インキュベーションの雰囲気 | 37℃、5%CO2、加湿雰囲気。 |
| フラスコ・コーティング | 解凍後の最適な接着と生存率を得るためには、コラーゲンコートフラスコまたはプレートの使用を推奨する。 |
| 凍結手順 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 配送条件 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 保管条件 | 長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。 |
品質管理/遺伝子プロファイル/HLA
| 不妊症 | マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。 細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査を受けている。 |
|---|---|
| HLA対立遺伝子 |
A*: '01:01:01, '68:01:02
B*: '08:01:01, '51:01:01
C*: '07:01:01, '15:02:01
DRB1*: '08:04:01, '13:01:01
DQA1*: '01:03:01, '05:05:01
DQB1*: '03:01:01, '06:03:01
DPB1*: '02:01:02, '13:01:01
E: '01:01:01, '01:03:03
|