Wilms3 sejtek
800,00 EUR*
A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 6 sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 106 sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).
Általános információk
| Leírás | A Wilms3 sejtvonalat egy gyermekbeteg primer Wilms-tumorából hozták létre, amelyet szomatikus WT1 mutáció jellemez. Sok más Wilms-tumor sejtvonaltól eltérően a Wilms3 heterozigóta frameshift mutációt tartalmaz a WT1 génben (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), ami egy csonka WT1 fehérje termelődéséhez vezet. A WT1 funkciójának ez a részleges elvesztése olyan tumorok kialakulásával jár, amelyek stromális vagy mesenchymális fenotípust mutatnak. A Wilms3-ban a WT1 mutáció azonban nem homozigóta, ami bonyolultabbá teszi a vizsgálatát, mivel megtartja a WT1 bizonyos funkcióját, amely a teljes WT1-vesztéssel rendelkező sejtvonalakhoz képest másképp befolyásolhatja a tumorbiológiát. A Wilms3 a CTNNB1 génben is hordoz egy mutációt, amely kifejezetten a 41-es treonin (p.T41A), a Wnt jelátviteli útvonalban játszott kritikus szerepet érinti. Ez a mutáció stabilizálja a β-katenint, megakadályozva annak degradációját, és a Wnt-útvonal konstitutív aktiválódásához vezet. A Wnt jelátvitel tartós aktivációja hajtja a sejtek proliferációját és hozzájárul a tumorigenezishez a Wilms3-ban, ami kulcsfontosságú modellé teszi a CTNNB1 mutációk hatásának tanulmányozására egy részben funkcionális WT1 háttérrel összefüggésben. Fenotípusosan a Wilms3 sejtek mesenchymális morfológiát mutatnak, vimentint expresszálnak, és hiányzik belőlük a citokeratin, ami összhangban van az eredeti tumorban megfigyelt stromális jellemzőkkel. Ezek a sejtek korlátozott differenciálódási potenciált mutatnak, és bizonyos körülmények között képesek némi mesenchymális differenciálódásra. A Wilms3 proteomikai elemzései számos receptor-tirozin-kináz (RTK), köztük a PDGFRβ és az AXL aktiválódását mutatták ki, amelyek támogatják a sejtek túlélését és proliferációját. Emellett olyan downstream jelátviteli útvonalak, mint a MAPK és a PI3K/AKT aktiválódnak, ami erősíti a Wilms3 sejtek rosszindulatú tulajdonságait. A Wilms3 egyik egyedülálló aspektusa a WT1 részleges funkcionalitása, ami külön perspektívát nyújt arra vonatkozóan, hogy a WT1 mutációk hogyan járulnak hozzá a Wilms-tumor biológiájához, amikor a mutáció nem teljes. A Wilms3-ban a WT1 és a Wnt jelátvitel közötti kölcsönhatás értékes lehetőséget kínál az ezen útvonalaknak a daganatok fejlődésében játszott árnyalt szerepének tanulmányozására. Összességében a Wilms3 fontos modellként szolgál a Wilms-tumor hátterében álló molekuláris mechanizmusok vizsgálatához a részleges WT1-vesztés és a konstitutív Wnt-útvonal aktiválódása esetén. |
|---|---|
| Szervezet | Emberi |
| Szövet | Vese |
| Betegség | Wilms-tumor |
| Alkalmazások | In vitro sejtkultúra modell. Biokémiai vizsgálatok |
Jellemzők
| Kor | 11-12 hónap |
|---|---|
| Gender | Férfi |
| Etnicitás | Kaukázusi |
| Morfológia | Orsó alakú |
| Sejttípus | Wilms sejtek |
| Növekedési tulajdonságok | Adherent |
Szabályozási adatok
| Idézet | Wilms3 (Cytion katalógusszám: 300414) |
|---|---|
| Biológiai biztonsági szint | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SF |
Biomolekuláris adatok
| Mutációs profil | WT1 mutációs státusz: homozigóta c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 mutációs státusz: vad típus |
|---|
A kezelése
| Kultúrközeg | MSCGM kit (a Lonzától) |
|---|---|
| Dissociációs reagens | Accutase |
| Szubkultúrázás | Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak. |
| Fagyasztási közeg | Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében. |
| A sejtek felolvasztása és tenyésztése |
|
| Inkubációs légkör | 37°C, 5%CO2, párásított légkör. |
| Lombik bevonat | Nincs |
| Fagyasztási eljárás | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Szállítási feltételek | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Tárolási feltételek | Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt. |
Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA
| Sterilitás | A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá. |
|---|---|
| HLA allélok |
A*: '03:01:01
B*: '35:01:01, '35:03:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:03:01, '11:04:01
DQA1*: '03:01:01, '05:05:01
DQB1*: '03:01:01, '03:02:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:03:02, '01:06:01
|
Elemzési tanúsítvány (CoA)
| Tételszám | Tanúsítvány típusa | Dátum | Katalógusszám |
|---|---|---|---|
| 300414-221 | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 300414 |
Anyagátadási megállapodás
Ha a Cytion sejtvonalakat kizárólag egyetlen kutatási helyszínen végzett belső kutatáshoz kívánja felhasználni, kérjük, töltse ki és írja alá anyagátadási megállapodásunkat (MTA), majd küldje el azt megrendelésével együtt.
Bármilyen kereskedelmi célú felhasználás esetén – ideértve, de nem kizárólagosan a díjszabásos munkát, a minőség-ellenőrzési tesztelést, a termékforgalomba hozatalt, a diagnosztikai felhasználást vagy a szabályozási tanulmányokat – kérjük, töltse ki a tervezett felhasználási űrlapot, hogy elkészíthessük a projektjéhez igazodó megfelelő megállapodást.
Megjegyzés: Az MTA csak bizonyos sejtvonalakra vonatkozik. Ha ez a megjegyzés és az MTA dokumentum megjelenik egy termékoldalon, akkor a megállapodás alkalmazandó. Az MTA hatálya alá nem tartozó sejtvonalak esetében a megállapodásra való hivatkozás nem jelenik meg. Az MTA nem érvényes az amerikai, kínai vagy tajvani ügyfelek számára. Kérjük, vegye fel a kapcsolatot amerikai képviseletünkkel, hogy megkapja a megfelelő megállapodást.