Accutase sejtleválasztó oldat – 100 ml

Accutase sejtleválasztó oldat EDTA-val és fenolvörössel – 100 ml

Az Accutase egy használatra kész, steril szűrt sejtleválasztó oldat, amelyet a tripszin/EDTA kíméletes alternatívájaként fejlesztettek ki a tapadó emlős sejtek standard szövetkultúra-műanyag edényekről és tapadásgátló bevonattal ellátott felületekről történő leválasztására. Proteolitikus és kollagenolitikus enzimaktivitást ötvöz egy kiegyensúlyozott sóoldatban, hogy hatékony, ugyanakkor kontrollált leválasztást biztosítson, megőrizve a sejtfelszíni fehérjéket, és támogatva a magas posztpasszázs-életképességet és a gyors újratapadást.

Az Accutase összetétele Dulbecco foszfátpufferolt sóoldatán (DPBS) alapul, EDTA-val és fenolvörössel, mint vizuális pH-indikátorral. Az enzimek nem emlős és nem bakteriális eredetűek, ezért az Accutase különösen alkalmas őssejtkutatásra, vakcina-előállítási folyamatokra és minden olyan alkalmazásra, ahol az állati vagy mikrobiális eredetű szennyeződéseket minimálisra kell csökkenteni. Az oldat 37 °C-on öninhibálódik, ezért a leválasztás után nincs szükség semlegesítő reagensre vagy szérumtartalmú táptalajra – a sejteket közvetlenül friss táptalajba lehet átvinni.

Főbb jellemzők

• Használatra kész, 1x-es, steril szűrt folyadék – hígításra vagy rekonstitúcióra nincs szükség
• Kombinált proteolitikus és kollagenolitikus enzimaktivitás a kíméletes disszociáció érdekében
• Minden tétel standardizált, meghatározott diszociációs aktivitással a tételek közötti konzisztencia érdekében
• Nem emlős és nem bakteriális enzim eredetű
• 37 °C-on öninhibálódik – nincs szükség semlegesítő oldatra
• Dulbecco PBS-ben EDTA-val készítve
• Fenolvörös vizuális pH-indikátorként
• pH 6,8 – 7,8

Jellemző alkalmazások

Az Accutase kíméletesen disszociálja a legkülönbözőbb adhezív és érzékeny sejttípusokat, beleértve az emberi embrionális őssejteket (hESCs), az emberi indukált pluripotens őssejteket (iPSCs), az idegsejteket, az elsődleges idegsejteket, valamint a rutinszerűen tenyésztett adhezív sejtvonalakat, mint például a HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 és A549. Tipikus felhasználási területek:

• Adhéziós emlős sejtek rutinszerű szubkultiválása és átültetése
• hESC-k, iPSC-k és más érzékeny vonalak kíméletes egysejtes disszociációja
• Minták előkészítése áramlási citometriához és FACS-elemzéshez
• Olyan sejtfelszíni markerek elemzése, ahol az epitóp integritása fontos
• Sejtvándorlás, proliferáció és apoptózis vizsgálatok
• Nyugalmi állapot vizsgálata szérumhiány és onkogén transzfekciós vizsgálatok segítségével
• Tumorsejtek és idegcsíra-sejtek migrációs vizsgálatai
• Termelés felfuttatása bioreaktoros munkafolyamatokban

Rutin munkákhoz körülbelül 10 ml Accutase-t alkalmazzon 75 cm² tenyésztési felületre, és inkubálja 5–10 percig szobahőmérsékleten. Az optimális inkubációs időt minden sejtvonal esetében meg kell határozni, és az nem haladhatja meg az egy órát. Az adagolás előtt öblítse le a sejtréteget Ca²⁺/Mg²⁺-mentes sóoldattal, például kalcium- és magnéziummentes DPBS-sel, hogy eltávolítsa a maradék szérumot és a kétértékű kationokat.

Kezelés és tárolás

A bontatlan palackot -15 °C-on vagy annál alacsonyabb hőmérsékleten fagyassza le. Szobahőmérsékleten vagy egy éjszakán át +2 °C és +8 °C között olvassza fel. Ne olvassza fel az Accutase-t 37 °C-os vízfürdőben, mivel a magas hőmérséklet csökkenti az enzimaktivitást. Felolvasztás után az oldat +2 °C és +8 °C között legfeljebb 2 hónapig tárolható; ne tárolja szobahőmérsékleten. Az alkalmazás előtt ne melegítse elő a reagenset 37 °C-ra – adja hozzá közvetlenül a mosott sejtekhez szobahőmérsékleten. A hosszú távú tárolhatóság érdekében az ismételt felolvasztási ciklusok elkerülése érdekében egyszer használatos adagolás ajánlott. Mindig aszeptikus körülmények között dolgozzon.

Minőség

Szigorú minőségi előírások szerint gyártva. Az Accutase minden tételét szteril szűrőn szűrik, és szterilitás, pH, megjelenés és disszociációs aktivitás szempontjából tesztelik, hogy tételenkénti konzisztens, reprodukálható teljesítményt biztosítsanak.

Termékjellemzők

Összetétel (literenkénti összetétel)

Az Accutase az Innovative Cell Technologies, Inc. bejegyzett védjegye.