Wilms10M sejtek

800,00 EUR*

A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 ⁶ sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 10⁶ sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).

Árak adók és szállítási költségek nélkül

cryovial

Termékszám: 300418

Biztonsági adatlap

Terméklap

Elemzési tanúsítvány (CoA)

Anyagátadási megállapodás

Leírás	A Wilms10M sejtvonalat egy Wilms-tumoros (nefroblastómás) beteg metasztatikus tüdőcsomójából hozták létre. A Wilms10M sejtvonalra, akárcsak primer tumoros megfelelőjére, a Wilms10T-re, a WT1 gén homozigóta deléciója jellemző, ami a WT1 fehérje teljes hiányát eredményezi. A WT1 esszenciális a normális vesefejlődéshez, és deléciója agresszívabb tumoros viselkedéssel jár, különösen metasztatikus környezetben. Ezenkívül a Wilms10M sejtek heterozigozitásvesztést (LOH) mutatnak a 11p15 kromoszómarégióban, amely az IGF2 gént tartalmazza, ami tovább hozzájárul e sejtek rosszindulatú tulajdonságaihoz. A Wilms10M sejtek stabil kariotípust tartanak fenn, amelyben a WT1 régió specifikus delécióján kívül nincsenek jelentősebb kromoszóma-átrendeződések. Ez a metasztatikus szövetből származó sejtvonal különösen értékes a Wilms-tumorban az áttétképzést irányító molekuláris mechanizmusok tanulmányozásához. A sejtek mesenchymális jellegzetességeket mutatnak, olyan markereket expresszálnak, mint a vimentin, miközben hiányoznak belőlük az olyan epithelialis markerek, mint a citokeratin, ami arra utal, hogy a tumor stromális komponenséből származnak. A Wilms10M kutatásai az ezekben az áttétes sejtekben aktív jelátviteli útvonalakra összpontosítottak. A proteomikai elemzések számos receptor-tirozin-kináz (RTK) aktiválódását mutatták ki, köztük az IGF1R, PDGFRβ és AXL aktiválódását, amelyek részt vesznek a sejtek túlélésének, proliferációjának és metasztatikus potenciáljának elősegítésében. A downstream MAPK és PI3K/AKT jelátviteli útvonalak is aktiválódnak, amelyek kulcsszerepet játszanak a Wilms10M sejtek invazív és metasztatikus fenotípusának fenntartásában. Metasztatikus eredetét tekintve a Wilms10M alapvető modell a Wilms-tumor metasztázisának hátterében álló molekuláris események megértéséhez és az áttétes betegség elleni célzott terápiás stratégiák kifejlesztéséhez.
Szervezet	Emberi
Szövet	Vese
Betegség	Wilms-tumor
Alkalmazások	In vitro sejtkultúra modell. Biokémiai vizsgálatok
Szinonimák	Wilms10

Kor	2 év
Gender	Női
Etnicitás	Kaukázusi
Morfológia	Orsó alakú
Sejttípus	Wilms sejtek
Növekedési tulajdonságok	Adherent

Idézet	Wilms10M (Cytion katalógusszám: 300418)
Biológiai biztonsági szint	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SL

Mutációs profil	WT1 mutációs státusz: homozigóta del WT1 a del11p13-on belül. LOH: nincs a 11p13-ban, de UPD a 11p15-ben. CTNNB1 mutációs státusz: homozigóta del TCT, p.DS45, UPD 3p

Kultúrközeg	MSCGM kit (a Lonzától)
Dissociációs reagens	Accutase
Szubkultúrázás	Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Fagyasztási közeg	Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
A sejtek felolvasztása és tenyésztése	Ellenőrizze, hogy az injekciós üveg a szállításkor mélyhűtött marad-e, mivel a sejteket szárazjégen szállítják, hogy a szállítás során az optimális hőmérsékletet fenntartsák. Átvételt követően vagy azonnal tárolja a krioampullát -150 °C alatti hőmérsékleten a sejtek integritásának megőrzése érdekében, vagy folytassa a 3. lépéssel, ha azonnali tenyésztésre van szükség. Azonnali tenyésztés esetén gyorsan fel kell olvasztani az injekciós üveget úgy, hogy tiszta vízzel és antimikrobiális szerrel ellátott 37 °C-os vízfürdőbe merítjük, és 40-60 másodpercig óvatosan kevergetjük, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Az összes további lépést steril körülmények között, áramlásos elszívóban végezzük el, és nyitás előtt fertőtlenítsük a kriofülkét 70%-os etanollal. Óvatosan nyissa fel a fertőtlenített fiolát, és a sejtszuszpenziót óvatosan összekeverve helyezze át egy 15 ml-es centrifugacsőbe, amely 8 ml szobahőmérsékletű táptalajt tartalmaz. Centrifugáljuk az elegyet 300 x g-n 3 percig a sejtek szétválasztásához, és óvatosan dobjuk el a maradék fagyasztóközeget tartalmazó felülúszót. Óvatosan szuszpendáljuk újra a sejtpelletet 10 ml friss táptalajban. Adhezív sejtek esetében ossza a szuszpenziót két T25-ös tenyésztőlombik között; szuszpenziós kultúrák esetében az összes tápfolyadékot tegye át egy T25-ös lombikba a hatékony sejtkölcsönhatás és növekedés elősegítése érdekében. A sejtvonal folyamatos növekedése és fenntartása érdekében tartsa be a megállapított szubkultúra protokollokat, biztosítva a megbízható kísérleti eredményeket.
Inkubációs légkör	37°C, 5%_CO2, párásított légkör.
Lombik bevonat	Nincs
Fagyasztási eljárás	A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
Szállítási feltételek	A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
Tárolási feltételek	Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Sterilitás	A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Tételszám	Tanúsítvány típusa	Dátum	Katalógusszám
300418-030325	Elemzési bizonyítvány	26. May. 2025	300418
300418-110324	Elemzési bizonyítvány	23. May. 2025	300418

Ha a Cytion sejtvonalakat kizárólag egyetlen kutatási helyszínen végzett belső kutatáshoz kívánja felhasználni, kérjük, töltse ki és írja alá anyagátadási megállapodásunkat (MTA), majd küldje el azt megrendelésével együtt.

Bármilyen kereskedelmi célú felhasználás esetén – ideértve, de nem kizárólagosan a díjszabásos munkát, a minőség-ellenőrzési tesztelést, a termékforgalomba hozatalt, a diagnosztikai felhasználást vagy a szabályozási tanulmányokat – kérjük, töltse ki a tervezett felhasználási űrlapot, hogy elkészíthessük a projektjéhez igazodó megfelelő megállapodást.

Megjegyzés: Az MTA csak bizonyos sejtvonalakra vonatkozik. Ha ez a megjegyzés és az MTA dokumentum megjelenik egy termékoldalon, akkor a megállapodás alkalmazandó. Az MTA hatálya alá nem tartozó sejtvonalak esetében a megállapodásra való hivatkozás nem jelenik meg. Az MTA nem érvényes az amerikai, kínai vagy tajvani ügyfelek számára. Kérjük, vegye fel a kapcsolatot amerikai képviseletünkkel, hogy megkapja a megfelelő megállapodást.

Wilms10M sejtek

Általános információk

Jellemzők

Szabályozási adatok

Biomolekuláris adatok

A kezelése

Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA

Elemzési tanúsítvány (CoA)

Anyagátadási megállapodás