Cellules HK-2
Informations générales
Description | La lignée cellulaire rein humain-2 (HK-2) est un type de cellule tubulaire proximale (CTP) dérivée d'un rein humain normal. Les cellules HK-2 ont été créées par transfection avec un rétrovirus recombinant contenant les gènes E6/E7 du papillomavirus humain 16 (HPV-16). Ce processus a conduit à l'immortalisation des cellules et à l'établissement d'une lignée cellulaire à croissance continue. Les cellules HK-2 ont été largement caractérisées et la recherche a montré qu'elles conservent un phénotype indiquant des CTP bien différenciés. Les cellules expriment l'EGF et en ont besoin pour leur croissance et leur survie. Elles sont positives pour divers gènes, notamment la phosphatase alcaline, la gamma glutamyltranspeptidase, la leucine aminopeptidase, la phosphatase acide, la cytokératine, l'alpha 3, l'intégrine bêta 1 et la fibronectine. En outre, les cellules conservent les caractéristiques fonctionnelles des tubules proximaux et sont capables de gluconéogenèse. Les cellules HK-2 sont dépendantes de l'ancrage, ce qui signifie qu'elles ont besoin d'une surface à laquelle adhérer pour se développer. Elles ne peuvent pas se développer dans la méthylcellulose, l'agar mou ou la suspension. Les cellules ont un diamètre moyen de 18,2 micromètres et leur temps de doublement varie entre 47,3 h et 61,7 h. En termes d'applications, les cellules HK-2 ont été largement utilisées dans la recherche toxicologique en raison de leur capacité à reproduire les résultats expérimentaux obtenus avec des CTP fraîchement isolées. Par exemple, les cellules HK-2 ont été utilisées pour étudier les effets des toxines environnementales, telles que le cadmium et le cisplatine, sur les cellules rénales. Ces cellules ont également été utilisées pour étudier les mécanismes sous-jacents aux maladies rénales telles que la néphropathie diabétique et les lésions rénales aiguës. Toutefois, il est essentiel de noter que la sensibilité des cellules HK-2 aux composés toxiques peut être affectée par le nombre de passages. En conclusion, les cellules HK-2 sont une lignée cellulaire de CTP bien caractérisée qui peut être utilisée dans une variété d'applications de recherche biologique, en particulier en toxicologie. Cependant, les chercheurs doivent être conscients des effets potentiels du passage sur la sensibilité de ces cellules aux composés toxiques, et le nombre de passages doit être pris en compte lors de l'interprétation des résultats expérimentaux. |
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Organisme | Humain |
Tissus | Rein, cortex, tubule proximal |
Synonymes | Hk-2, HK2, Rein humain-2 |
Caractéristiques
L'âge | Adulte |
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Genre | Homme |
Ethnicité | Européen |
Morphologie | Épithéliale |
Propriétés de croissance | Adhérent |
Identifiants / Biosécurité / Citation
Citation | HK-2 (numéro de catalogue 305021 de Cytion) |
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Niveau de biosécurité | 1 |
Expression / Mutation
Récepteurs exprimés | Facteur de croissance épidermique (EGF), exprimé |
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Expression des protéines | Phosphatase alcaline, Gamma Glutamyltranspeptidase, Leucine Aminopeptidase, Phosphatase acide, Cytokératine, Alpha 3, Beta 1 Intégrine, Fibronectine |
Manipulation
Milieu de culture | DMEM:Ham's F12, w : 3.1 g/L Glucose, w : 1.6 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 1.0 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a) |
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Suppléments moyens | Compléter le milieu avec 10% de FBS, 10 microgrammes/L d'IGF-1, 10 microgrammes/L d'EGF, 1 mg/L de transferrine, 0,5 microgramme/L de TGF-b1, 0,2 mg/L de biotine, 0,05 mg/ml de BPE |
Solution de passage | Accutase |
Sous-culture | Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
Taux de fractionnement | 1:2 à 1:4 |
Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
Congélation du milieu | CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100) ou CM-ACF (numéro de catalogue Cytion 806100) |
Manipulation des cultures cryoconservées |
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Contrôle de qualité / Profil génétique / HLA
Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence. Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes. |
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Profil STR |
Amélogénine: x,x
CSF1PO: 13
D13S317: 9
D16S539: 11,12
D5S818: 12
D7S820: 10,11
TH01: 9
TPOX: 8,9
vWA: 17,18
D3S1358: 16,17
D21S11: 28,30
D18S51: 12
Penta E: 10,11
Penta D: 9,12
D8S1179: 10,14
FGA: 20,22
D1S1656: 12,13
D6S1043: 12,13
D2S1338: 17,25
D12S391: 17.3,22
D19S433: 15,15.2
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