Cellules A498

Stockage à long terme
Dans la recherche biologique, la cryoconservation des cellules de mammifères est un outil inestimable. La conservation réussie des cellules est une priorité absolue, car la perte d'une lignée cellulaire en raison d'une contamination ou de mauvaises conditions de stockage entraîne une perte de temps et d'argent, ce qui retarde en fin de compte les résultats de la recherche. Une fois les cellules transférées d'un milieu de croissance cellulaire à un milieu de congélation, elles sont généralement congelées à une vitesse régulée et stockées dans de la vapeur d'azote liquide ou à une température inférieure à -130°C dans un congélateur mécanique. Le milieu de congélation CM-ACF permet la cryoconservation des cellules à une température inférieure à -130°C (ou dans l'azote liquide), ce qui élimine essentiellement le besoin d'un congélateur ultra-bas supplémentaire et coûteux, ainsi que les processus de congélation à vitesse contrôlée, longs et exigeants. Il suffit de prélever les cellules, d'aspirer le milieu de croissance, de les remettre en suspension dans le CM-ACF, de les transférer dans un cryovial et de conserver le flacon à une température inférieure à -130 °C.
Longue durée de conservation
CM-ACF est un milieu de cryoconservation sans sérum, prêt à l'emploi, qui peut être conservé au réfrigérateur jusqu'à un an.
Des centaines de chercheurs font confiance au CM-ACF
Notre milieu de congélation cellulaire sans sérum CM-ACF est un produit leader sur le marché en Allemagne et en Europe et se distingue par de nombreuses publications impliquant des centaines de lignées cellulaires différentes dans le monde entier. Nous l'avons testé avec plus de 1000 lignées cellulaires issues de notre banque de cellules propriétaire.
Ingrédients optimisés sans sérum
CM-ACF ne contient pas de produits à base de sérum. Les milieux de cryoconservation contenant du sérum présentent l'inconvénient d'avoir des taux de récupération fluctuants et une composition peu claire. Étant donné que la composition et la concentration des protéines et autres composants biologiques varient d'un lot à l'autre dans le sérum, la reproductibilité des expériences avec des cellules congelées dans un milieu contenant du sérum peut être compromise. Comme chaque composant de CM-ACF est soigneusement défini, vous pouvez être assuré que les cellules se rétablissent toujours à l'identique.

Contient du DMSO, du glucose, des sels
Pouvoir tampon pH = 7,2 à 7,6

Universel
- même pour la préservation des cellules souches
Toutes les lignées cellulaires courantes peuvent être congelées et décongelées pour obtenir de nombreuses cellules viables. Par rapport aux milieux standard, le taux de récupération des cellules, même les plus délicates, est nettement plus élevé. En utilisant CM-ACF, nous conservons plus de 1000 lignées cellulaires différentes avec un succès exceptionnel.
Applications et validation
Les cellules conservées dans notre milieu de congélation CM-ACF peuvent être utilisées pour le comptage, la viabilité et la cryoconservation des cellules, la culture cellulaire, la culture de cellules de mammifères, l'analyse de l'expression génétique et le génotypage, la transcription in vitro et les réactions en chaîne par polymérase. L'efficacité de chaque lot est évaluée sur des cellules CHO-K1. Chaque lot est soumis à des tests de pH, d'osmolalité, de stérilité et d'endotoxines afin de garantir une qualité élevée.

L'un des milieux de culture cellulaire synthétiques les plus utilisés est le milieu minimum essentiel Eagle (MEM). Développé par Harry Eagle, ce milieu a été introduit pour la première fois en 1959 et est devenu depuis un choix populaire pour divers types de cellules cultivées en monocouches et en lignées cellulaires adhérentes.
Ce milieu EMEM est composé de 2 mM de L-Glutamine, 1,5 g/L de NaHCO3, EBSS, 1 mM de pyruvate de sodium et NEAA.
Que contient l'EMEM ?
L'EMEM est une version modifiée du milieu minimum essentiel d'Eagle, contenant la solution saline équilibrée d'Earle, des acides aminés non essentiels, de la L-glutamine, du pyruvate de sodium et du bicarbonate de sodium. Il est important de noter que ce niveau réduit de bicarbonate de sodium (NaHCO3, 1,5 g/L) est destiné à une utilisation à 5 % de CO2 dans l'air. Pour préserver son efficacité, il est recommandé de conserver le milieu entre 2 °C et 8 °C dans l'obscurité lorsqu'il n'est pas utilisé.
À quoi sert l'EMEM ?
Le milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM) est un milieu de culture cellulaire qui permet de maintenir les cellules en culture tissulaire. Le milieu contient des concentrations plus élevées d'acides aminés, ce qui permet une approximation plus précise de la composition protéique des cellules de mammifères cultivées. L'EMEM peut être utilisé pour cultiver diverses cellules, notamment des fibroblastes, des cellules de la lignée cellulaire du cancer du foie humain (HepG2) et des cellules astrocytaires dérivées de progéniteurs de cerveau fœtal humain (PDA). Il est généralement utilisé en présence de sérum bovin fœtal (FBS), de sérum de veau ou de cheval.
En quoi l'EMEM est-il différent des autres milieux de culture cellulaire ?
Si l'EMEM et le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) présentent certaines similitudes, ils diffèrent également. Les deux milieux sont dépourvus de protéines et contiennent les acides aminés, les sels, le glucose et les vitamines nécessaires pour fournir de l'énergie à une cellule et la maintenir en culture tissulaire. Cependant, la formulation du DMEM est modifiée pour contenir jusqu'à quatre fois plus de vitamines et d'acides aminés et deux à quatre fois plus de glucose que l'EMEM. Il convient de noter que l'EMEM est également différent de la formulation originale du MEM.
Contrôle de qualité

pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.

Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.

Composition




Composants
mg/L


Sels inorganiques
Chlorure de calcium x 2H2O
264,92



Sulfate de magnésium
97,67



Chlorure de potassium
400,00



Chlorure de sodium
6,800.00



Dihydrogénophosphate de sodium x H2O
140,00


Autres composants
D(+)-Glucose
1,000.00



Rouge de phénol
10,00



Pyruvate de sodium
110,00



NaHCO3
1,500.00


Acides aminés
L-Alanine
8,90



L-Arginine x HCl
126,00



L-Asparagine x H2O
13,20



Acide L-aspartique
13,30



L-Cystine
24,00



L-Glutamine
292,30



Acide L-Glutamique
14,70



Glycine
7,50



L-Histidine x HCl x H2O
42,00



L-Isoleucine
52,00



L-Leucine
52,00



L-Lysine x HCl
72,50



L-Méthionine
15,00



L-Phénylalanine
32,00



L-Proline
11,50



L-Sérine
10,50



L-Thréonine
48,00



L-Tryptophane
10,00



L-Tyrosine
36,00



L-Valine
46,00


Vitamines
D-Pantothénate de calcium
1,00



Chlorure de choline
1,00



Acide folique
1,00



myo-Inositol
2,00



Nicotinamide
1,00



Pyridoxal x HCl
1,00



Riboflavine
0,10



Thiamine x HCl
1,00

Réactif de dissociation cellulaire Accutase
- Une alternative douce à la trypsine
Accutase est une solution de détachement cellulaire qui révolutionne l'industrie de la culture cellulaire. Il s'agit d'un mélange d'enzymes protéolytiques et collagénolytiques qui imite l'action de la trypsine et de la collagénase. Contrairement à la trypsine, Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est beaucoup plus doux pour les cellules, ce qui en fait une solution idéale pour le détachement de routine des cellules du matériel plastique de culture tissulaire standard et du matériel plastique à revêtement adhésif. Dans cet article de blog, nous allons explorer les avantages et les utilisations d'Accutase et la façon dont il change la donne dans la culture cellulaire.
Avantages d'Accutase
Accutase présente plusieurs avantages par rapport aux solutions de trypsine traditionnelles. Tout d'abord, il peut être utilisé chaque fois qu'un détachement doux et efficace d'une lignée cellulaire adhérente est nécessaire, ce qui en fait un substitut direct à la trypsine. Deuxièmement, Accutase fonctionne extrêmement bien sur les cellules souches embryonnaires et neuronales, et il a été démontré qu'il maintient la viabilité de ces cellules après le passage. Troisièmement, Accutase préserve la plupart des épitopes pour une analyse ultérieure par cytométrie de flux, ce qui la rend idéale pour l'analyse des marqueurs de la surface cellulaire.
En outre, il n'est pas nécessaire de neutraliser Accutase lors du passage des cellules adhérentes. L'ajout de milieu après la séparation des cellules dilue Accutase de sorte qu'elle n'est plus en mesure de détacher les cellules. Ceci élimine le besoin d'une étape d'inactivation et permet aux techniciens de culture cellulaire de gagner du temps. Enfin, Accutase n'a pas besoin d'être aliquoté et un flacon est stable au réfrigérateur pendant 2 mois.
Applications d'Accutase
Accutase remplace directement la solution de trypsine et peut être utilisé pour le passage des lignées cellulaires. En outre, Accutase donne de bons résultats lors du détachement de cellules pour l'analyse de nombreux marqueurs de surface cellulaire par cytométrie de flux et pour le tri cellulaire. D'autres applications en aval du traitement par Accutase comprennent l'analyse des marqueurs de surface cellulaire, les essais de croissance virale, la prolifération cellulaire, les essais de migration des cellules tumorales, le passage de routine des cellules, l'augmentation de la production (bioréacteur) et la cytométrie de flux.
Composition d'Accutase
Accutase ne contient aucun composant mammalien ou bactérien et est un mélange enzymatique naturel avec une activité enzymatique protéolytique et collagénolytique. Il est formulé à une concentration beaucoup plus faible que la trypsine et la collagénase, ce qui le rend moins toxique et plus doux, mais tout aussi efficace.
Efficacité d'Accutase
Accutase s'est avéré efficace pour détacher les cellules primaires et les cellules souches et maintenir une viabilité cellulaire élevée par rapport aux enzymes d'origine animale telles que la trypsine. 100 % des cellules sont récupérées après 10 minutes, et il n'y a aucun inconvénient à laisser les cellules dans Accutase jusqu'à 45 minutes, grâce à l'autodigestion d'Accutase.
En résumé
En conclusion, Accutase est une solution puissante qui change la donne dans le domaine de la culture cellulaire. Grâce à sa nature douce, son efficacité et sa polyvalence, Accutase est l'alternative idéale à la trypsine. Si vous recherchez une solution fiable et efficace pour le détachement cellulaire, Accutase est la solution qu'il vous faut.

Solution saline tamponnée au phosphate (PBS) : Le tampon optimal pour votre recherche biologique
La solution saline tamponnée au phosphate (PBS) est une solution tampon polyvalente utilisée dans de nombreuses applications biologiques et chimiques, ainsi que dans le traitement des tissus. Notre solution PBS est formulée avec des ingrédients de haute qualité pour garantir un pH constant pendant les expériences. L'osmolarité et les concentrations ioniques de notre solution PBS correspondent à celles du corps humain, ce qui la rend isotonique et non toxique pour la plupart des cellules.
Composition de notre solution PBS
Notre solution PBS est un mélange de tampons phosphatés et de solutions salines de qualité supérieure dont le pH est ajusté. À une concentration de travail de 1X, elle contient 137 mM de NaCl, 2,7 mM de KCl, 8 mM de Na2HPO4 et 2 mM de KH2PO4. Nous avons choisi cette composition sur la base des protocoles du CSHL et de Molecular cloning by Sambrook, qui sont des normes bien établies dans la communauté des chercheurs.
Applications de notre solution PBS
Notre solution PBS est idéale pour une large gamme d'applications dans la recherche biologique. Ses propriétés isotoniques et non toxiques la rendent idéale pour la dilution de substances et le rinçage de récipients cellulaires. Notre solution PBS avec EDTA peut également être utilisée pour désengager les cellules attachées et agglutinées. Cependant, il est important de noter que les métaux divalents tels que le zinc ne peuvent pas être ajoutés au PBS, car cela peut entraîner une précipitation. Dans ce cas, il est recommandé d'utiliser les tampons Good's. En outre, notre solution PBS s'est avérée être une alternative acceptable au milieu de transport viral pour le transport et le stockage de virus à ARN, tels que le SARS-CoV-2.
Stockage de notre solution PBS
Notre solution PBS peut être conservée à température ambiante, ce qui en facilite l'utilisation et l'accès.
En résumé
En résumé, notre solution PBS est un composant essentiel dans de nombreuses expériences biologiques et chimiques. Ses propriétés isotoniques et non toxiques la rendent adaptée à de nombreuses applications, de la culture cellulaire au milieu de transport viral. En choisissant notre solution PBS de haute qualité, les chercheurs peuvent optimiser leurs expériences et garantir des résultats précis et fiables.
Composition du PBS




Composants
mg/L


Sels inorganiques
Chlorure de potassium
200,00



Phosphate de potassium dihydrogène
200,00



Chlorure de sodium
8,000.00



hydrogénophosphate de di-sodium anhydre
1,150.00