SW-620-solut – vaikutus paksusuolisyövän tutkimukseen ja kokeisiin
SW-620-solut muodostavat Dukesin luokituksen C-vaiheen ihmisen paksusuolisyöpäsolulinjan. Niillä on suuri tuumorigeeninen ja metastaattinen potentiaali. Siksi niitä käytetään laajalti syöpä- ja toksikologiatutkimuksissa. Tässä artikkelissa tarkastellaan paksusuolisyöpäsolulinjan SW-620 perusominaisuuksia.
- Kasvatusväliaine
- SW-620-solujen ihanteelliseen kasvuun käytetään DMEM-kasvatusliuosta, johon on lisätty 10 % naudan sikiöseerumia, 4,5 g/l glukoosia, 4 mM L-glutamiinia, 1,5 g/l NaHCO3:ta ja 1,0 mM natriumpyruvaattia. Kasvatusliuos on vaihdettava kaksi kertaa viikossa.
- Kaksinkertaistumisaika
- SW-620-solujen kaksinkertaistumisaika on 20–26 tuntia.
- Kasvutyyppi
- SW-620-solulinja on adheesiivinen. Solut muodostavat yksikerroksia viljelyastian pinnalle.
- Bioturvallisuustaso
- BSL-1
- Saatavana
- Cytion — Tilaa SW-620
SW-620-solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet
Alkuperä ja yleiset ominaisuudet ovat solulinjan tärkeimmät tiedot. Näiden tietojen ennakkotuntemus on välttämätöntä tutkijoille, jotka harkitsevat solulinjan käyttöä tutkimuksessaan. Tässä artikkelin osiossa selitetään SW-620-solulinjan keskeiset ominaisuudet ja alkuperä. Tästä osiosta opit pääasiassa seuraavaa: Mikä on SW620-solulinja? Mitkä ovat SW-620-solulinjan ominaisuudet? Mikä on SW-620:n alkuperä? Mikä on SW-640-solujen koko? Ja mikä on ero SW-620:n ja SW-480:n välillä?
- SW-620 on kolorektaalisen karsinooman solulinja, joka on peräisin 51-vuotiaan valkoihoisen miehen, jolla oli paksusuolen adenokarsinooma, mediatoidusta imusolmukeleesiosta [1]. Tämän solulinjan talletti A. Leibovitz ja hänen kollegansa.
- SW-620-soluilla on epiteelinen morfologia. Ne koostuvat pienistä pyöreistä ja bipolaarisista soluista, jotka muistuttavat mikrovilluksia.
- SW-620-solujen halkaisija on 14,4 ± 0,3 μm.
- Näillä paksusuolisyöpäsoluilla on hyperdiploidinen karyotyyppi. SW-620-solujen modaalinen kromosomiluku on 50, ja se voi vaihdella välillä 45–53.
SW-480 vs. SW-620
SW480 ja SW620 ovat paksusuolisyöpäsolulinjoja. SW-480 on peräisin primaarikasvaimesta, kun taas SW-620 on peräisin metastaasoituneesta imusolmukkeesta. Lisäksi näistä solulinjoista kehitetyt ksenotransplantaatit eroavat toisistaan. SW620-ksenotransplantaatit tuottavat kasvainsolukerroksia, kun taas SW480-ksenotransplantaatit muodostavat rauhasmaisia rakenteita [2]. Molemmilla solulinjoilla on identtiset mutaatioprofiilit.
SW-620-solut: Viljelyohjeet
Solulinjan viljelyn peruskonseptin ymmärtäminen on välttämätöntä, sillä se mahdollistaa asianmukaisen käsittelyn ja ylläpidon. Tässä osiossa mainitaan joitakin SW-620-solujen viljelyn avainkohteita, jotka auttavat sinua ymmärtämään: Mikä on SW-620-viljelyalusta? Mikä on SW-620-solujen kaksinkertaistumisaika? Miten SW-620-soluja viljellään?
SW-620-solujen viljelyn avainkohdat
Kaksinkertaistumisaika:
SW-620-solujen kaksinkertaistumisaika on 20–26 tuntia.
Adheesio vai suspensio:
SW-620-solulinja on kiinnittyvä. Solut muodostavat yksikerroksisia solupinnoitteita viljelyastian pinnalle.
Aliviljelysuhde:
SW-620-soluja subkultivoidaan jakosuhteella 1:3. Adherenttiset solut huuhdellaan fosfaattisalmiinipuskurilla (1X), josta on poistettu magnesium ja kalsium. Seuraavaksi lisätään siirto-liuos, Accutase, ja soluja inkuboidaan huoneenlämmössä 8–10 minuuttia. Lisätään tuoretta kasvualustaa, ja solut sentrifugoidaan. Sen jälkeen kerätyt solut suspendoidaan varovasti kasvualustaan ja siirretään uusiin pulloihin kasvattamista varten.
Kasvatusliuos:
SW-620-solujen ihanteelliseen kasvatukseen käytetään DMEM-kasvatusliuosta, johon on lisätty 10 % naudan sikiöseerumia, 4,5 g/l glukoosia, 4 mM L-glutamiinia, 1,5 g/l NaHCO3:ta ja 1,0 mM natriumpyruvaattia. Kasvatusliuos on vaihdettava kaksi kertaa viikossa.
Kasvatusolosuhteet:
SW-620-paksusuolisyöpäsoluja viljellään kostutetussa inkubaattorissa 37 °C:n lämpötilassa ja 5 %:n CO₂-pitoisuudessa.
Säilytys:
Jäädytettyinä SW-620-soluja säilytetään alle -150 °C:n lämpötilassa erittäin matalan lämpötilan pakastimissa tai nestemäisen typen höyryvaiheessa.
Jäädytysprosessi ja väliaine:
CM-1 tai CM-ACF on ihanteellinen pakkausväliaine SW-620-soluille. SW-620-solujen pakkaamiseen käytetään hidasta pakkausprosessia. Siinä lämpötila laskee vain 1 °C minuutissa, mikä suojaa solujen elinkelpoisuutta.
Sulatusprosessi:
Jäädytetyt SW-620-solut sulatetaan 37 °C:seen esiasetetussa vesihauteessa 40–60 sekunnin ajan. Sulatuksen jälkeen lisätään viljelyväliainetta ja solut sentrifugoidaan jäädytysaineen poistamiseksi. Sen jälkeen saatu solupelletti suspendoidaan uudelleen kasvualustaan ja solut kaadetaan uuteen pulloon kasvattamista varten.
Bioturvallisuustaso:
SW-620-viljelmien käsittelyyn tarvitaan bioturvallisuustason 1 (BSL-1) laboratorio.
SW-620-kennojen edut
Edut
- Paksusuolisyövän mallintaminen: SW-620-solut toimivat tärkeänä mallina paksusuolisyövälle, mikä mahdollistaa syövän ja etäpesäkkeiden mekanismien perusteellisen tutkimuksen erityisesti ksenotransplantaattimalleissa.
- Syöpätutkimus ja -hoito: Nämä solut helpottavat syöpäbiologian, kemoterapian tehokkuuden ja solukuoleman mekanismien, mukaan lukien anoikis, tutkimista.
- CD133-ilmentyminen: CD133:n ilmentyminen SW-620-soluissa tarjoaa tietoa syöpäsolujen biologiasta ja sen merkityksestä kasvaimen syntymiselle ja hoidon vastustuskyvylle.
- Virtaussytometrian sovellukset: Näiden solujen virtaussytometrianalyysi mahdollistaa solupopulaatioiden, apoptoositasojen ja proliferaation arvioinnin.
SW-620-solulinjan tutkimussovellukset
Seuraavassa käsitellään tutkimusaloja, joilla SW-620-soluilla on lupaavia käyttömahdollisuuksia:
- Syöpätutkimus: SW-620 on korvaamaton solumalli kolorektaalisyövän biologian tutkimiseen. Tutkijat käyttävät tätä in vitro -mallia syöpäsolujen kasvua, invaasiota ja migraatiota ohjaavien molekyylimekanismien selvittämiseen. Lisäksi sitä voidaan käyttää SW620-solulinjan mutaatioiden, kuten p53-, APC- ja KRAS-mutaatioiden, tutkimiseen. Vuonna 2021 tehdyssä tutkimuksessa tarkasteltiin SW620-solulinjan KRAS-mutaation vaikutusta uuden FL118-lääkkeen herkkyyteen. Tutkijat havaitsivat, että KRAS-geenin yli-ilmentyminen lisää FL118:n aiheuttamaa paksusuolisolujen apoptoosia, kun taas sen vaimentaminen vähentää sitä. Nämä tulokset voivat auttaa ennustamaan FL118:n käyttöä KRAS-mutaatioista kärsivillä paksusuolisyöpäpotilailla [3].
- Lääkkeiden seulonta ja kehittäminen: SW-620-solulinjaa käytetään laajalti paksusuolisyöpää vastaan tarkoitettujen potentiaalisten lääkeaineiden seulontaan ja testaamiseen. Tutkijat käyttävät näitä soluja arvioidakseen lääkkeiden sytotoksisuutta ja tehoa, mikä voi johtaa kohdennettujen hoitomenetelmien kehittämiseen. Eräässä tutkimuksessa selvitettiin esimerkiksi kanelin ja neilikan yksittäisten eteeristen öljyjen yhdisteiden paksusuolisyöpää estäviä vaikutuksia käyttäen SW-620-solulinjaa [4].
- Metastaasitutkimukset: Suuren metastaasipotentiaalinsa ansiosta SW-620-soluja voidaan käyttää syöpäsolujen metastaasien taustalla olevien molekyylireittien tutkimiseen. Esimerkiksi Zhou Yang ja hänen kollegansa selvittivät Grainy-head-like 2 (GRHL2) -geenin roolin paksusuolisyövän etenemisessä ja etäpesäkkeiden muodostumisessa. He esittivät, että GRHL2-geenin ilmentyminen estää paksusuolisyövän etenemistä ja etäpesäkkeiden muodostumista tukahduttamalla epiteeli-mesenkymaalisia siirtymiä (EMT) [5].
Suojaa SW620-solulinjasi
SW-620-solut: Julkaisut
Tässä osiossa esitellään joitakin mielenkiintoisia ja eniten siteerattuja tutkimusjulkaisuja SW-620-soluista.
Tässä Molecular Carcinogenesis -lehdessä (2017) julkaistussa tutkimuksessa esitettiin, että polyfenoli urolitiini A:n antaminen indusoi autofagiaa paksusuolisyöpäsolulinjassa SW620. Se myös esti syöpäsolujen etäpesäkkeiden muodostumista.
Tässä Oncology Letters -lehdessä (2018) julkaistussa artikkelissa tutkittiin bis-bentsyylisokinoliinialkaloidin, tetrandriinin, metastaasien estämispotentiaalia SW-620-soluilla.
Tämä artikkeli on julkaistu Biochemical and Biophysical Research Communications -lehdessä (2018). Siinä esitettiin, että CDCA3-geenin (Cell division cycle associated 3) ilmentyminen on lisääntynyt paksusuolisyöpäsoluissa ja että se edistää solujen proliferaatiota aktivoimalla NF-κB-signalointia.
International Journal of Molecular Sciences -lehdessä (2021) julkaistussa tutkimuksessa selvitettiin bispesifisen vasta-aineen (ABL001) ja kemoterapeuttisten lääkkeiden synergististä vaikutusta kasvaimen etenemiseen SW620-kudossiirto-mallissa.
Tämä artikkeli on julkaistu Cells-lehdessä (2018). Siinä tutkittiin Bacopa monnieri -kasvista peräisin olevan Bacopaside II -uutteen antituumorivaikutuksia SW-620- ja muissa paksusuolisyöpäsoluissa.
SW-620-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
Seuraavassa on muutamia SW-620-paksusuolisyöpäsoluja käsitteleviä verkkolähteitä.
- SW-620-transfektio: Tässä artikkelissa kuvataan lyhyesti SW-620-solulinjan stabiilin transfektion protokolla.
Seuraava linkki sisältää SW-620-soluviljelyprotokollan.
- SW-620-soluviljelyprotokolla: Tästä linkistä löydät perustietoa SW-620-solulinjasta. Se auttaa sinua myös oppimaan SW-620-solujen subkultivointiprotokollan sekä kryosäilytettyjen ja proliferoituvien SW-620-viljelmien käsittelyn.
- Soluviljelyohjeet: Tämä video on erinomainen lähde kiinnittyvien solujen siirto-, pakastus- ja sulatusohjeiden oppimiseen.
Usein kysytyt kysymykset SW620-kennoista
SW620-solut ovat ihmisen paksusuolen adenokarsinoomasoluja, jotka on saatu paksusuolen syöpää sairastavan potilaan imusolmukemetastaasista, mikä tekee niistä merkittäviä syöpätutkimuksen kannalta.
SW620-solujen halkaisija on yleensä 15-30 mikrometriä, mutta se voi vaihdella viljelyolosuhteiden mukaan.
SW620-soluissa on useita mutaatioita, muun muassa TP53-geenissä. Nämä mutaatiot voivat vaikuttaa solujen morfologiaan, mikä johtaa populaation sisällä erilaisiin muotoihin ja kokoihin.
SW620- ja SW480-solut ovat molemmat peräisin paksusuolen adenokarsinoomista, mutta SW620-solut ovat peräisin etäpesäkkeestä, kun taas SW480-solut ovat peräisin primaarikasvaimesta. Tämä ero voi vaikuttaa niiden geneettiseen rakenteeseen, käyttäytymiseen viljelyssä ja vasteeseen hoitoihin.
SW620-solut ovat tärkeitä kasvainten synnyn tutkimisessa, erityisesti koska ne kykenevät muodostamaan kasvaimia ksenograft-hiirimalleissa ja koska ne ilmentävät syöpäkantasolujen merkkiaineita, kuten CD133:a.
Kyllä, SW620-soluja käytetään solukuolemapolkujen, kuten apoptoosin ja anoikiksen, tutkimiseen, kun ne reagoivat erilaisiin syöpähoitoihin ja ympäristöolosuhteisiin.
SW620-solujen suuri etäpesäkepotentiaali ja niiden alkuperä etäpesäkkeitä tuottavasta imusolmukkeesta tekevät niistä asianmukaisen mallin paksusuolisyövän leviämisen tutkimiseen.
Virtaussytometrian avulla tutkijat voivat analysoida SW620-solujen ominaisuuksia, mukaan lukien CD133:n ilmentymismalleja ja apoptoosin laajuutta tai herkkyyttä anoikikselle.
SW620-soluilla on suuri kasvainpotentiaali, kun ne viedään immuunipuutteisiin ksenograft-hiirimalleihin, mikä tekee niistä arvokkaita syövän etenemisen in vivo -tutkimuksissa.
Lähteet
- Siekmann, W. ym., Lidokaiinin ja ropivakaiinin vaikutus primaarisiin (SW480) ja metastaattisiin (SW620) paksusuolisyöpäsolulinjoihin. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395–401.
- Hewitt, R.E. ym., Paksusuolisyövän etenemismallin validointi. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446–54.
- Thangaiyan, R. ym., Kras-mutaatioiden alatyypit vaikuttavat selvästi paksusuolisyöpäsolujen herkkyyteen FL118:lle, joka on uusi survivinin, Mcl-1:n, XIAP:n, cIAP2:n ja MdmX:n estäjä. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
- Petrocelli, G. ym., Kasvien eteerisissä öljyissä esiintyvät molekyylit paksusuolisyövän (CRC) ennaltaehkäisyyn ja hoitoon. Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
- Yang, Z. ym., GRHL2 estää paksusuoli- ja peräsuolisyövän etenemistä ja etäpesäkkeiden muodostumista hillitsemällä epiteeli-mesenkymaalisia siirtymiä. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195–1205.