SiHa-solut – valoa kohdunkaulansyövän tutkimukseen

SiHa-solut ovat kohdunkaulasyöpäsoluja, joita käytetään laajalti biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Ne ovat erinomaisia transfektiovastaanottajia ja sopivat siten geeniekspressiotutkimuksiin. Koska solut ovat peräisin ihmisestä ja liittyvät kohdunkaulasyöpään, niitä käytetään pääasiassa syöpäbiologian, virologian ja lääkekehitystutkimuksissa.

📋 SiHa-solulinja — lyhyesti

Kasvatusväliaine: SiHa-solujen ihanteelliseen kasvatukseen käytetään Eagle's minimum essential medium (EMEM) -kasvatusliuosta, joka sisältää 10 % FBS:ää, 2 mM L-glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO3:ta ja Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) -suolaliuosta. Kasvatusliuos vaihdetaan 2–3 kertaa viikossa.
Kaksinkertaistumisaika: SiHa-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 17 tuntia.
Kasvutyyppi: SiHa on adheesiivinen solulinja.
Bioturvallisuustaso: BSL-1
Saatavana: Cytion — Tilaa SiHa

SiHa-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä

Solulinjan alkuperän ja yleisten ominaisuuksien ymmärtäminen on ratkaisevan tärkeää, sillä se vaikuttaa sen käyttöön tutkimuksessasi. Tässä artikkeliosassa opit SiHa-solulinjan alkuperästä, sen erityispiirteistä ja paljon muuta: Mikä on SiHa-syöpäsolulinja? Mitä ovat SiHa-solut ja HPV? Mikä on SiHa-solulinjan alkuperä? Millainen on SiHa:n morfologia?

SiHa, kohdunkaulasyöpäsolulinja, on peräisin aasialaisen naisen (55-vuotias), jolla oli levyepiteelisyöpä, primaarisen kohdun biopsian näytteistä [1].
SiHa-solulinjalla on hypertriploidinen karyotyyppi. Suurimmalla osalla soluista kromosomien keskimääräinen lukumäärä on 69–72. Noin 24 prosentilla soluista kromosomien modaaliluku on kuitenkin 71.
SiHa-solut ovat ihmisen papilloomaviruksen tyypin 16 (HPV-16) positiivisia. Niissä on integroitunut noin 1–2 kopiota HPV-genomia solua kohti [2].
Näillä kohdunkaulansyöpäsoluilla on epiteelinen morfologia.

HeLa-kohdunkaulasyöpäsolujen jakautuminen mikroskoopin alla.

SiHa-solulinja: Viljelyohjeet

Solulinjan viljelyn ylläpitäminen ei ole helppoa, ennen kuin tunnet kaikki viljelyn avainkohdat. Sinun tulisi tietää: Mikä on SiHa-solulinjan kaksinkertaistumisaika? Mikä on SiHa-soluviljelyalusta? Miten SiHa-solulinjaa viljellään?

SiHa-solujen viljelyn avainkohdat

Kaksinkertaistumisaika:: SiHa-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 17 tuntia.
Adherenssi- vai suspensiokulttuuri:: SiHa on kiinnittyvä solulinja.
Aliviljelysuhde:: SiHa-solujen aliviljelysuhde on 1:2–1:4. Solujen siirron yhteydessä adheesiiviset solut huuhdellaan 1x PBS:llä. Lisätään Accutase-liuosta, ja soluja inkuboidaan 8–10 minuuttia huoneenlämmössä. Seuraavaksi lisätään viljelyväliainetta, ja solut sentrifugoidaan. Solupelletti suspendoidaan uudelleen, ja solut kaadetaan uuteen pulloon viljelyä varten.
Kasvatusväliaine:: SiHa-solujen ihanteelliseen kasvatukseen käytetään Eagle's minimum essential medium (EMEM) -kasvatusliuosta, joka sisältää 10 % FBS:ää, 2 mM L-glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO3:ta ja Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) -liuosta. Kasvatusliuos vaihdetaan 2–3 kertaa viikossa.
Kasvatusolosuhteet:: SiHa-soluja pidetään 37 °C:n kostutetussa inkubaattorissa, johon syötetään 5 % CO₂.
Säilytys:: Jäädytetyt SiHa-kohdunkaulasyöpäsolulinjan pullot säilytetään alle -150 °C:n lämpötilassa sähköpakastimessa tai nestemäisen typen höyryvaiheessa pidempiaikaista säilytystä varten.
Jäädytysprosessi ja väliaine:: SiHa-solujen pakastamiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-pakastusväliainetta. Solut pakastetaan hitaalla pakastusmenetelmällä, jossa lämpötila laskee vain 1 °C minuutissa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi.
Sulatusprosessi:: Jäädytettyjä soluja pidetään 40–60 sekuntia 37 °C:n vesihauteessa, kunnes jäljellä on pieni jääpalas. Sen jälkeen lisätään tuoretta kasvualustaa, ja solut sentrifugoidaan jäädytysaineen komponenttien poistamiseksi. Solupelletti suspendoidaan uudelleen, ja solut siirretään viljelypulloon kasvattamista varten.
Bioturvallisuustaso:: SiHa-soluviljelmien käsittelyyn ja ylläpitoon vaaditaan bioturvallisuustason 1 laboratorio.

Siha cells

SiHa-solujen kiinnittynyt kerros 10- ja 20-kertaisella suurennuksella.

SiHa-solulinjan edut ja haitat

Muiden ihmisen karsinoomasolulinjojen tavoin myös SiHa:lla on joitakin erityispiirteitä, joihin liittyy tiettyjä etuja ja haittoja. Tässä olemme käsitelleet muutamia merkittävimpiä niistä.

SiHa-kohdunkaulansyöpäsolulinjan edut

Kohdunkaulansyövän malli
- Peräisin kohdunkaulan levyepiteelikarsinoomasta.
- Kohdunkaulasyövän mekanismien, kasvun ja kehityksen tutkimiseen.
- Ilmentää p53+ ja pRB+ -geenejä, jotka liittyvät DNA:n korjaukseen, solusyklin säätelyyn ja kasvaimen estämiseen.
Kasvaimia aiheuttava potentiaali
- SiHa-solut ovat tuumorigeenisiä ja voivat indusoida huonosti erilaistuneita III-luokan epidermoidituumoreita alastomissa hiirissä.
- Käytetään in vivo -syöpätutkimuksessa ja syöpähoitojen testaamisessa.

SiHa-solujen haitat

Lisääntymisnopeus
- SiHa-solut lisääntyvät nopeasti, mikä johtaa liialliseen kasvuun.
- Vaatii tiheää siirrostamista, mikä lisää geneettisen epävakauden riskiä, mikä puolestaan voi vaikuttaa solujen käyttäytymiseen ajan myötä.

SiHa-solujen käyttö tutkimuksessa

SiHa-solulinjaa käytetään laajasti kohdunkaulansyövän tutkimuksessa. Tässä käsitellään muutamia tämän solulinjan erityisiä sovelluksia.

Ihmisen papilloomavirukseen (HPV) liittyvät tutkimukset: SiHa-solut ovat HPV 16 -positiivisia, joten ne ovat arvokkaita kohteita ihmisen papilloomavirusinfektion, sen molekyylimekanismien sekä sen roolin kohdunkaulasyövän kehittymisessä ja etenemisessä tutkimisessa. Tutkijat käyttävät näitä soluja myös viruksen replikaation, integraation ja sen vaikutuksen isäntäsolun prosesseihin tutkimiseen. Vuonna 2020 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin SiHa-solulinjaa HPV:n E6/E7-onkoproteiinien roolin selvittämiseen kohdunkaulasyövän kehittymisessä kohdentamalla niihin CRISPR-tekniikkaa. Tulokset osoittivat, että E6/E7-geenien ilmentymisen estäminen johti SiHa-solujen kasvun hidastumiseen ja apoptoosiin. Siksi nämä virusgeenit voivat toimia tärkeinä lääkekohteina HPV:hen liittyvän kohdunkaulasyövän hoitojen kehittämisessä [3].
Syöpäbiologia: SiHa-solut toimivat korvaamattomana mallina kohdunkaulansyövän biologian tutkimuksessa, mukaan lukien syövän kehittyminen, eteneminen, etäpesäkkeiden muodostuminen ja invaasio. Tutkijat käyttävät näitä soluja selvittääkseen kohdunkaulasyövän kehittymiseen ja kasvuun vaikuttavia geneettisiä mutaatioita ja taustalla olevia molekyylireittejä. Eräässä tutkimuksessa käytettiin SiHa-soluja ja havaittiin, että SEC61G:n (SEC61-translokonin gamma-alayksikkö) ilmentymisen lisääntyminen edistää kohdunkaulasyöpäsolujen proliferaatiota aktivoimalla MAPK-kaskadia [4].
Lääkeaineiden seulonta ja testaus: SiHa on laajalti käytetty kohdunkaulasyöpäsolulinja, jolla arvioidaan HPV-peräiseen kohdunkaulasyöpään kohdistuvien potentiaalisten syöpälääkkeiden tehoa. Tutkijat selvittävät näiden solujen avulla lääkkeiden solujen lisääntymistä estävää, apoptoosia aiheuttavaa ja etäpesäkkeiden muodostumista estävää potentiaalia. Esimerkiksi vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa selvitettiin Vatica diospyroides Symington Type SS -hedelmäuutteiden sytotoksista potentiaalia SiHa-kohdunkaulasyöpäsolulinjalla [5].

SiHa-soluja tutkimukseesi!

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 305023

SiHa-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut

Jotkut merkittävät ja usein siteeratut tutkimusjulkaisut käsittelevät SiHa-kohdunkaulan levyepiteelikarsinoomasolulinjaa.

Aloe-emodiinin kohdunkaulasyöpäsoluja vastaan kohdistuva vaikutus liittyi ihmisen papilloomaviruksen E6/E7-proteiineihin ja glukoosiaineenvaihduntaan

Tässä OncoTargets and Therapy -lehdessä (2019) julkaistussa artikkelissa esitettiin, että luonnollinen yhdiste aloe-emodiini aiheuttaa HPV:n E6/E7-proteiineihin ja glukoosiaineenvaihduntaan liittyviä apoptoottisia vaikutuksia SiHa-kohdunkaulasyöpäsoluissa.

Excoecaria agallocha (L.) -lehtiuutteen syöpälääkinnällisen potentiaalin arviointi ihmisen kohdunkaulasyöpäsolulinjalla (SiHa) ja sen vaikutusmekanismin selvittäminen

Tämä artikkeli julkaistiin Future Journal of Pharmaceutical Sciences -lehdessä vuonna 2022. Tutkimuksessa selvitettiin Excoecaria agallocha (L.) -kasvin lehtiuutteen kasvainten vastaisia vaikutuksia SiHa-kohdunkaulasyöpäsolulinjassa.

Sulfatoituihin ZnO-nanopartikkeleihin kytketyn 1,10-fenantrolinin antiproliferatiivinen vaikutus SiHa-kohdunkaulansyöpäsolulinjassa

Tässä Journal of Sol-Gel Science and Technology -lehdessä (2022) julkaistussa tutkimuksessa esitettiin, että 1,10-fenantrolinimolekyyli, kun se on kytketty sinkkisulfaattinanopartikkeleihin, aiheuttaa merkittäviä solujen lisääntymistä estäviä vaikutuksia SiHa-soluissa.

Astragalosidi IV estää SiHa-kohdunkaulasyöpäsolujen invaasiota ja etäpesäkkeiden muodostumista TGF-β1:n välittämien PI3K- ja MAPK-signalointireittien kautta

Tämä tutkimus julkaistiin Oncology Reports -lehdessä vuonna 2019. Tutkimus paljasti, että luonnontuote astragalosidi IV estää SiHa-solujen siirtymistä ja invaasiota moduloimalla TGF-β1-välitteisiä PI3K- ja MAPK-signaalireittejä.

IFI16 edistää kohdunkaulasyövän etenemistä säätelemällä PD-L1:n ilmentymistä ylöspäin immuunimikroympäristössä STING-TBK1-NF-kB-signaalireitin kautta

Tämä Biomedicine & Pharmacotherapy -lehdessä (2020) julkaistu tutkimus paljasti, että IFI16 (interferoni-gammainduktioitu proteiini 16) säätelee PD-L1-geeniä aktivoimalla STING-TBK1-NF-kB-signaalireitin edistääkseen SiHa-kohdunkaulasyöpäsolujen kasvua.

SiHa-solulinjan resurssit: ohjeet, videot ja muuta

Tässä on joitakin SiHa-soluja käsitteleviä verkkolähteitä.

SiHa-solujen transfektio: Tämä tutkimusartikkeli sisältää protokollan SiHa-kohdunkaulasyöpäsolujen ylläpitoon ja SiHa-solujen transfektioon.

Seuraava linkki sisältää SiHa-solujen viljelyä koskevia tietoja.

SiHa-solulinja: Tämä verkkosivusto sisältää paljon arvokasta tietoa SiHa-solulinjasta. Tähän sisältyy tietoa kasvualustoista, viljelyolosuhteista, SiHa-solujen aliviljelyprotokollista sekä niiden proliferaatio- ja kryokonservoitujen viljelmien käsittelystä.

SiHa-kohdunkaulasyöpäsolujen usein kysytyt kysymykset

Lähteet

Melzer, C., J. von der Ohe ja R. Hass, Tiivistelmä: mesenkymaalisen stroman/kantasolujen kaltaisten solujen ja syöpäsolujen välinen vuorovaikutus tarjoaa terapeuttista potentiaalia. Stem cells, 2018. 36(7): s. 951–968.
Ostrowska, K.M. ym., Tutkimus korkean riskin ihmisen papilloomaviruksen vaikutuksesta kohdunkaulasyöpäsolujen biokemialliseen koostumukseen värähtelyspektroskopian avulla. Analyst, 2010. 135(12): s. 3087–3093.
Chen, Y. ym., Ihmisen kohdunkaulasyöpäsolujen kasvun estäminen in vitro ja in vivo ihmisen papilloomaviruksen E6/E7-mRNA:iden katkaisemisella CRISPR/Cas13a-järjestelmän avulla. Antiviral Research, 2020. 178: s. 104794.
Fan, Y. ym., SEC61G edistää kohdunkaulasyövän proliferaatiota aktivoimalla MAPK-signalointireitin. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A. ym., Vatica diospyroides symington -lajin SS-tyypin hedelmäuutteiden syöpälääkkeiden potentiaali ja niiden vaikutus kohdunkaulasyöpäsolulinjojen ohjelmoituun solukuolemaan. The Scientific World Journal, 2019. 2019.