RBL-2H3-solut – RBL-2H3:n merkitys allergisessa reaktiossa ja immunologisissa tutkimuksissa
RBL-2H3-solulinja on rotasta peräisin oleva basofiilinen leukemiasolulinja, jota käytetään immunologisessa tutkimuksessa. Se toimii mallijärjestelmänä syöttösolujen fysiologian, käyttäytymisen ja toimintojen tutkimuksessa. Näitä soluja käytetään myös allergisten reaktioiden ja immunologisten prosessien tutkimiseen sekä lääkkeiden testaamiseen ja kehittämiseen.
- Kasvatusväliaine
- RBL-2H3-solujen viljelyyn käytetään EMEM-kasvatusliuosta, joka sisältää 10 % FBS:ää, 2 mM L-glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO3:ta ja EBSS-suolaa. Kasvatusliuos on vaihdettava 2–3 kertaa viikossa.
- Kaksinkertaistumisaika
- RBL-2H3-syöttösolujen kaksinkertaistumisaika on noin 50–60 tuntia.
- Kasvutyyppi
- RBL-2H3 on adheesiivinen solulinja.
- Bioturvallisuustaso
- BSL-2
- Saatavana
- Cytion — Tilaa RBL-2H3
- RBL-2H3-solut: Alkuperä ja yleiset ominaisuudet
- RBL-2H3-solut: Viljelyohjeet
- RBL-2H3-basofiilisolulinjan edut ja rajoitukset
- RBL-2H3-solulinja: immunologisen tutkimuksen kulmakivi
- RBL-2H3-solulinja: tutkijoille välttämättömiä usein kysyttyjä kysymyksiä
- Viitteet
- RBL-2H3-solulinja edistyneeseen immunologiseen tutkimukseen
- RBL-2H3-solut: Tutkimusjulkaisut
- RBL-2H3-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
- Usein kysyttyjä kysymyksiä
RBL-2H3-solut: Alkuperä ja yleiset ominaisuudet
Ennen kuin käytät basofiilisolulinjaa tutkimuksessasi, sinun tulisi tuntea sen alkuperä ja yleiset ominaisuudet. Tässä artikkelin osiossa kerrotaan RBL-2H3-solujen perusasioista. Esimerkiksi: Mitä ovat RBL-2H3-syöttösolut? Miksi käyttää RBL-2H3-soluja? Mitä ovat RBL-2H3-solut rotan basofiilisessä leukemiassa? Millainen on RBL-2H3-solujen morfologia? Ovatko RBL-2H3-solut kuolemattomia?
- RBL-2H3-solut ovat basofiilisen leukemian soluja, jotka on eristetty Wistar-rotan basofiilisoluista vuonna 1978 National Institute of Dental Researchin immunologian laboratoriossa.
- RBL-2H3-soluilla on c-kit-reseptorityrosiinikinaasi- ja syöttösoluproteaasi II (RMCP-II) -reseptoreita, mikä tekee niistä potentiaalisen syöttösolumallin. Siksi niitä kutsutaan yleisesti syöttösoluiksi huolimatta siitä, että ne ovat peräisin rotan basofiileistä [1].
- Ne vapauttavat histamiinia ja muita välittäjäaineita aktivoituessaan ja ilmentävät korkean affiniteetin IgE-reseptoreita.
- RBL-2H3-soluilla on fibroblastien kaltainen morfologia.
RBL-2H3-solut: Viljelyohjeet
Tässä osiossa kerrotaan RBL-2H3-solulinjan viljelyn keskeisistä seikoista. Saat selville: Mikä on RBL-2H3-solujen kaksinkertaistumisaika? Mikä on RBL-2H3-solujen kylvötiheys? Mikä on RBL-2H3-solujen viljelyprotokolla? Mikä on RBL-2H3-solulinjan pakastusväliaine?
RBL-2H3-solujen viljelyn avainkohdat
Solupopulaation kaksinkertaistumisaika:
RBL-2H3-syöttösolujen kaksinkertaistumisaika on noin 50–60 tuntia.
Adheesio- vai suspensio-solulinja:
RBL-2H3 on kiinnittyvä solulinja.
Aliviljelysuhde:
RBL-2H3-solujen osalta jakosuhde pidetään välillä 1:2–1:4. Adheesiiviset solut pestään magnesium- ja kalsiumittomalla 1 x PBS-liuoksella. Passagointiliuokseen lisätään Accutasea, ja soluja pidetään huoneenlämmössä 10 minuuttia, jotta ne irtoavat viljelyastian pohjalta. Lisätään tuoretta elatusainetta, ja solut sentrifugoidaan. Kerätyt solut suspendoidaan varovasti tuoreeseen elatusaineeseen ja kaadetaan uusiin, kasvualustaa sisältäviin pulloihin.
Kasvatusväliaine:
RBL-2H3-solujen viljelyyn käytetään EMEM-kasvatusliuosta, joka sisältää 10 % FBS:ää, 2 mM L-glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO₃:ta ja EBSS-suolaa. Kasvatusliuos on vaihdettava 2–3 kertaa viikossa.
Kasvatusolosuhteet:
RBL-2H3-soluja viljellään kostutetussa inkubaattorissa, jonka lämpötila on asetettu 37 °C:een ja joka on kytketty 5 %:n CO₂-lähteeseen.
Säilytys:
Solut säilytetään nestemäisen typen höyryvaiheessa tai alle -150 °C:n lämpötilassa sähköpakastimessa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi pitkällä aikavälillä.
Jäädytysprosessi ja elatusaine:
RBL-2H3-solujen pakastamiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-pakastusväliainetta hitaassa pakastusprosessissa. Lyhyesti sanottuna tämä menetelmä mahdollistaa lämpötilan laskun 1 °C minuutissa ja suojaa soluja lämpöshokilta.
Sulatusprosessi:
RBL-2H3-solut sulatetaan ennalta asetetussa vesihauteessa (37 °C) noin 60 sekunnin ajan. Sen jälkeen solut lisätään tuoreeseen viljelyalustaan ja sentrifugoidaan. Tämä vaihe on välttämätön jäädytysaineen komponenttien poistamiseksi. Seuraavaksi solupelletti suspendoidaan uudelleen kasvualustaan, ja solut siirretään viljelypulloon.
Bioturvallisuustaso:
RBL-2H3-soluja tulee säilyttää bioturvallisuustason 1 laboratorioissa.
Julkaistu: 2023 | Viimeksi tarkistettu: toukokuu 2026
RBL-2H3-basofiilisolulinjan edut ja rajoitukset
RBL-2H3-soluja käytetään yleisesti immunologisessa tutkimuksessa. Tässä osiossa esitellään niiden tärkeimmät edut ja rajoitukset.
Edut
- Helppo viljellä: RBL-2H3-soluja on helppo viljellä ja ylläpitää laboratorio-olosuhteissa. Tämä mahdollistaa kustannustehokkaan ja toistettavan kokeilun, minkä vuoksi ne ovat suosittu valinta immunologian alkututkimuksissa.
Rajoitukset
- Ei-ihmisperäiset: RBL-2H3-solut ovat peräisin rotan basofiileistä, eivätkä ne välttämättä jäljittele tarkasti ihmisen biologisia prosesseja, mikä voi rajoittaa niiden sovellettavuutta ihmiskohtaisissa tutkimuksissa. Tämä edellyttää tietojen varovaista tulkintaa, kun tuloksia yleistetään ihmisen elimistöön.
- Yksinkertaistettu syöttösolumalli: Vaikka nämä solut tarjoavat perusmallin syöttösolujen toimintojen tutkimiseen, ne eivät täysin edusta syöttösolujen vuorovaikutusten monimutkaista luonnetta ihmisen immuunijärjestelmässä. Näin ollen ne eivät välttämättä mallinna riittävästi syöttösolujen monipuolisia rooleja immuunivasteissa tai sairaustiloissa in vivo.
RBL-2H3-solulinja: immunologisen tutkimuksen kulmakivi
Basofiilien ja syöttösolujen tutkimus RBL-2H3-solulinjan avulla
Rattus norvegicus -lajista peräisin oleva RBL-2H3-solulinja toimii keskeisenä mallina basofiilien ja syöttösolujen biologian tutkimuksessa. Nämä rotan syöttösolut tarjoavat olennaista tietoa syöttösolujen välittäjäaineiden vapautumisesta, mikä on ratkaisevan tärkeää allergisten sairauksien, kuten allergisen nuhan, ymmärtämiselle. Näiden solujen avulla tutkijat selvittävät solureseptorien dynamiikkaa ja immunologisten synapsien muodostumista, jotka ovat keskeisiä immuunijärjestelmän reagoidessa allergeeneihin. Vuonna 2019 julkaistussa mielenkiintoisessa tutkimuksessa käytettiin RBL-2H3-solulinjaa ja selvitettiin Qingkailing-injektion aiheuttamien pseudoallergisten reaktioiden taustalla olevia mekanismeja. Tutkimuksessa havaittiin, että PI3K-RAC1-signaalikaskadi laukaisee osittain tämän allergisen vasteen soluissa [2].
Immunologisten synapsien dynamiikka allergiatutkimuksessa
Immunologian tutkimuksessa laajasti käytetyt RBL-2H3-solut ovat erityisen tehokkaita immunologisten synapsien dynamiikan tutkimisessa. Tämä auttaa selvittämään immuunijärjestelmän viestintäprosesseja, ja menetelmää voidaan soveltaa sekä perifeerisen veren että vatsakalvon syöttösolujen tutkimiseen. Tällainen tutkimus on elintärkeää immuunivasteen kattavan ymmärtämisen kannalta sekä systeemisissä että paikallisissa yhteyksissä.
Lääkeaineiden seulonta ja toksisuustestaus
Lääkeaineiden seulonnassa ja testauksessa hyödynnetään RBL-solujen reagointikykyä erilaisiin ärsykkeisiin, mukaan lukien tutkimus siitä, kuinka H₂O₂ estää IgE-välitteisiä vasteita. Nämä solut ovat keskeisessä roolissa hoitojen kehittämisessä esimerkiksi streptokokki-infektioiden hoidossa, joissa mitis-ryhmän streptokokit estävät syöttösolujen aktivaatiota. Tämän lisäksi tutkijat arvioivat tämän RBL 2H3 mc -mallin avulla erilaisten aineiden, kuten kemikaalien, lääkkeiden ja nanohiukkasten, toksisia vaikutuksia. Esimerkiksi äskettäisessä tutkimuksessa (2022) arvioitiin polystyreenimikromuovien sytotoksisuutta RBL-2H3-soluille. Tutkijat havaitsivat, että mikromuovit vahingoittavat RBL-2H3-solujen organelleja ja edistävät solukuolemaa [3]. Toisessa, vuonna 2021 tehdyssä tutkimuksessa arvioitiin luonnontuotteen, neferiinin, antiallergista ja tulehdusta estävää potentiaalia RBL 2H3 mc -mallin avulla. Tutkimus paljasti yhdisteen hyvät antiallergiset ja tulehdusta estävät ominaisuudet [4].
Kehittyneet menetelmät immunologisissa mittauksissa
RBL-2H3-soluista tapahtuva johdonmukainen ja mitattavissa oleva välittäjäaineiden vapautuminen tekee niistä ihanteellisia kätevään fluorimetriaan, mikä helpottaa tarkkoja ja luotettavia mittauksia, jotka ovat ratkaisevan tärkeitä tautitutkimuksessa ja hoitokeinojen arvioinnissa.
Rattus norvegicus -lajista peräisin oleva RBL-2H3-solulinja on korvaamaton apuväline sekä immunologian perustutkimuksessa että soveltavassa tutkimuksessa. Se tarjoaa laajoja mahdollisuuksia syventää tietämystämme immunologisista sairauksista ja niiden hoidosta.
RBL-2H3-solulinja edistyneeseen immunologiseen tutkimukseen
RBL-2H3-solut: Tutkimusjulkaisut
Seuraavassa on esitetty joitakin mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja, joissa käsitellään RBL-2H3-syöttösoluja:
Narirutiinin estävä vaikutus RBL-2H3-solujen degranulaatioon
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Immunopharmacology and Immunotoxicology -lehdessä (2021). Tutkimuksessa esitettiin, että luonnollinen yhdiste narirutiini estää RBL-2H3-solujen degranulaatiota säätelemällä NF-κB-, MAPK- ja tyrosiinikinaasi-signalointireittejä.
Tässä International Journal of Molecular Sciences -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa esitettiin, että apigeniini-yhdiste hillitsee merkittävästi RBL-2H3- ja RAW264.7-solujen allergisia ja tulehdusreaktioita. Siksi se voi toimia potentiaalisena aineena immuunijärjestelmään liittyvien sairauksien torjumisessa.
Tässä International Journal of Molecular Sciences -lehdessä (2021) julkaistussa tutkimusartikkelissa arvioitiin luonnontuotteen, saponariinin, antiallergisia ja tulehdusta hillitseviä vaikutuksia käyttäen erilaisia solulinjoja, mukaan lukien RBL-2H3.
Tässä Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine -lehdessä (2014) julkaistussa tutkimuksessa havaittiin, että Benchalokawichian-uutteilla ja joillakin sen aktiivisilla ainesosilla on potentiaalisia estäviä vaikutuksia RBL-2H3-solujen β-heksosaminidaasin vapautumiseen.
Tämä artikkeli julkaistiin vuonna 2018 International Journal of Biological Macromolecules -lehdessä. Tutkimuksessa todettiin, että luonnontuote Spirulina maxima estää RBL 2H3 -solujen degranulaatiota estämällä MAPK- ja AKT-proteiinien fosforylaatiota.
RBL-2H3-solulinjan resurssit: protokollat, videot ja muuta
RBL-2H3 on laajalti käytetty syöttösolulinja. Tässä mainitaan saatavilla olevat resurssit, jotka kattavat RBL-2H3-viljely- ja transfektioprotokollat:
- RBL-2H3-syöttösolulinjamalli: Tämä tutkimusartikkeli sisältää protokollat RBL-2H3-viljelmien ylläpitoon ja RBL-2H3-transfektioon.
Seuraavassa on joitakin lähteitä, joissa selitetään RBL-2H3-soluviljelyprotokollaa:
- RBL-2H3-solut: Tältä verkkosivustolta löydät hyödyllistä tietoa RBL-2H3-solulinjan viljelyprotokollista. Lisäksi sivusto sisältää tietoa RBL-2H3-soluviljelyalustoista ja viljelyolosuhteista.
RBL-2H3-solulinja: tutkijoille tärkeät usein kysytyt kysymykset
Lähteet
- Passante, E. ja N. Frankish, RBL-2H3-solulinja: sen alkuperä ja sopivuus syöttösolujen malliksi. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737–45.
- Li, Q. ym., Qingkailing-injektion aiheuttama pseudoallerginen reaktio osittain PI3K-Rac1-signalointireitin välityksellä RBL-2H3-soluissa. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353–360.
- Liu, L. ym., Polystyreenimikro- (nano-)muovit vahingoittavat RBL-2H3-solujen organelleja ja edistävät MOAP-1:n apoptoosia indusoivaa vaikutusta. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M. ym., Neferiinin antiallergiset ja anti-inflammatoriset vaikutukset RBL-2H3-soluissa. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.