MG-63-solulinja: Yksityiskohtainen opas MG-63-solujen käyttöön osteosarkooman tutkimuksessa
MG-63-solut ovat fibroblastien kaltaisia ihmisen osteosarkoomasoluja, joilla on laaja valikoima tutkimussovelluksia biolääketieteen alalla. Tähän voi kuulua luuhun liittyvien prosessien, kuten luun kehityksen ja erilaistumisen, tutkiminen. Lisäksi MG-63-solulinja toimii sopivana in vitro -mallina luusolujen elinkelpoisuuden, proliferaation ja adheesion tutkimiseen.
MG-63-solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Tässä artikkelin osiossa käsitellään MG-63-solulinjan alkuperää ja yleisiä ominaisuuksia. Opit seuraavaa: Mikä on MG-63-solulinja? Mikä on MG-63-solulinjan alkuperä? Millainen on MG-63-solujen morfologia? Mikä on MG-63-solujen koko?
- MG-63 on osteoblastisolulinja, joka on peräisin 14-vuotiaan (valkoihoisen) osteosarkoomapotilaan luusta. A. Billiau ja kollegat tallettivat tämän solulinjan vuonna 1977.
- MG-63-solulinjalla on fibroblastien kaltainen morfologia.
- Ihmisen osteosarkoomasolut (MG-63) ovat hypotriploideja. Näiden solujen modaalinen kromosomiluku on 66, jota esiintyy noin 44 prosentissa solupopulaatiosta. Myös korkeampia ploidioita on raportoitu lähes 2 %:ssa solupopulaatiosta. Lisäksi 18–19 merkkikromosomia esiintyy runsaasti kaikissa soluissa.
MG-63-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
Tärkeät tiedot solulinjan viljelyvaatimuksista voivat helpottaa työtäsi. Tässä artikkelin osiossa luetellaan kaikki MG-63-solujen viljelyyn ja ylläpitoon liittyvät keskeiset seikat. Täältä saat selville: Mikä on MG-63-solujen kaksinkertaistumisaika? Mitä kasvualustoja käytetään MG-63-soluille? Mikä on MG-63-solujen kylvötiheys?
MG-63-solujen viljelyn avainkohdat
Kaksinkertaistumisaika
MG-63-solujen populaation kaksinkertaistumisaika on 28–38 tuntia viljelyolosuhteista riippuen.
Kasvuominaisuudet
MG-63 on adheesiivinen solulinja.
Kylvötiheys
MG-63-soluille suositellaan solutiheyttä 1 x 104 solua/cm2. Adheesiiviset solut pestään 1 x fosfaattipuskuriliuoksella (PBS), josta on poistettu magnesium ja kalsium. Solut inkuboidaan sitten irrotusliuoksessa (Accutase), niihin lisätään tuoretta elatusainetta ja ne sentrifugoidaan. Kerätty solupelletti suspendoidaan uudelleen tuoreeseen elatusaineeseen ja annostellaan uuteen pulloon kasvattamista varten.
Kasvatusväliaine
MG-63-solujen viljelyyn käytetään DMEM- tai Ham's F12 -kasvatusliuoksia. Näitä elatusaineita voidaan täydentää 5 %:lla naudan sikiöseerumia (FBS), 3,0 g/l glukoosilla, 2,5 mM L-glutamiinilla ja 1,2 g/l NaHCO3:lla optimaalisen solukasvun saavuttamiseksi. Elatusaineet tulisi vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.
Kasvatusolosuhteet
MG-63-solujen viljelyyn tarvitaan kostutettu inkubaattori, jonka lämpötila on 37 °C ja CO₂-pitoisuus 5 %.
Säilytys
Näitä osteoblastien kaltaisia soluja voidaan säilyttää nestemäisen typen höyryvaiheessa tai alle -150 °C:n lämpötilassa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi.
Jäädytysprosessi ja elatusaine
MG-63-solujen pakastamiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-kasvatusväliaineita. Yleensä suositellaan hidasta pakastusprosessia, jotta solut eivät kärsisi pakkassokista ja niiden elinkelpoisuus säilyy.
Sulatusprosessi
Jäädytetyt solut inkuboidaan 40–60 sekuntia esilämmitetyssä vesihauteessa (37 astetta). Solut suspendoidaan uudelleen tuoreeseen kasvualustaan ja kaadetaan uuteen pulloon. 24 tunnin inkuboinnin jälkeen kasvualusta vaihdetaan jäädytysaineiden poistamiseksi.
Bioturvallisuustaso
MG-63-viljelmien käsittelyyn ja ylläpitoon tarvitaan bioturvallisuustason 1 laboratorio-olosuhteet.
MG-63-solulinja: edut ja haitat
MG-63 on laajalti käytetty osteoblastisolulinja. Siihen liittyy useita etuja ja haittoja. Tässä esitellään muutamia MG-63-solulinjan tärkeimpiä etuja ja haittoja.
Edut
MG-63-solujen edut ovat:
-
Osteoblastien kaltaiset ominaisuudet
MG-63-solulinjalla on osteoblastien kaltaisia ominaisuuksia, minkä vuoksi se sopii luuhun liittyvien prosessien ja sairauksien tutkimiseen. Sitä voidaan käyttää myös solujen adheesion, proliferaation ja elinkelpoisuuden tutkimiseen titaanipinnoilla [1].
-
Soveltuvuus transfektioon
MG-63-soluja käytetään laajasti transfektiotutkimuksissa, mikä mahdollistaa geenien ilmentymisen, toiminnan ja soluprosessien tutkimuksen.
-
Korkea interferonituotanto
MG-63-solut kykenevät tuottamaan suuria määriä interferonia. Ne tuottavat 3,7-kertaisen interferonisaannon cm²:tä kohti verrattuna diploidisiin fibroblasteihin, kun niitä indusoidaan sykloheksimidillä, polyinosiinihappo-polysytidiinihapolla ja aktinomysiinillä [2].
Haitat
MG-63-B-soluille ominaiset haitat ovat:
-
Heterogeenisyys
MG-63-soluissa esiintyy heterogeenisyyttä solupopulaation sisällä, mikä voi vaikuttaa toistettavuuteen.
-
Kasvainsolulinja
MG-63 on syöpäsolulinja, joka ei välttämättä edusta täysin normaalien solujen käyttäytymistä ja fysiologiaa, mikä rajoittaa sen käyttöä tietyissä laboratoriokokeissa.
Tilaa MG-63-kennot jo tänään
MG-63-solujen käyttökohteet
MG-63-solut ovat erinomainen tutkimusväline. Ne tarjoavat monia lupaavia sovelluksia tutkimusalalla. Tässä luetellaan muutamia MG-63-solujen tärkeimpiä tutkimussovelluksia.
- Luuhun liittyvien prosessien ja sairauksien tutkimus: MG-63-solut ovat osteoblastien kaltaisia (luuta muodostavia) soluja. Siksi näitä soluja käytetään laajasti luusairauksien ja soluprosessien, kuten kehityksen, erilaistumisen ja mineralisoitumisen, tutkimiseen. Lisäksi soluja käytetään laajasti luun paranemista edistävien lääkkeiden seulonnassa. Eräässä tutkimuksessa käytettiin MG-63-soluja tutkimaan Scutellaria baicalensis -kasvista vihreällä menetelmällä syntetisoitujen sinkkioksidin nanopartikkelien terapeuttista potentiaalia luusolujen proliferaatiossa, mineralisoitumisessa ja erilaistumisessa [3].
- Syöpätutkimus: MG-63-soluja käytetään laajalti syöpätutkimuksessa. Useissa tutkimuksissa on hyödynnetty näitä osteosarkoomasoluja syövän signalointireittien ymmärtämiseksi sekä lääkkeiden sytotoksisen ja terapeuttisen potentiaalin arvioimiseksi. Vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa selvitettiin luonnollisen yhdisteen, tomentosinin, kasvainten vastaisia ominaisuuksia MG-63-solujen avulla. Tulokset osoittivat, että tomentosini vaikuttaa syöpää estävästi laukaisemalla solunsisäisten reaktiivisten happiyhdisteiden (ROS) tuotantoa [4].
MG-63-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut
Seuraavassa on esitetty joitakin tutkimusjulkaisuja, joissa käsitellään osteoblastien kaltaista MG-63-solulinjaa.
miR-192 lisää metotreksaatin herkkyyttä MG-63-osteosarkoomasoluissa
Tämä artikkeli julkaistiin Pathology – Research and Practice -lehdessä vuonna 2020. Tutkimuksessa käytettiin MG-63-soluja osteosarkooman syöpäsolujen (MG-63) lääkeresistenssiin liittyvien molekyylimekanismien tutkimiseen. Tulokset osoittivat, että miRNA-192 voisi olla hyödyllinen kohde osteosarkooman metotreksaattiresistenssin voittamisessa.
Tämä tutkimus on julkaistu Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology -lehdessä (2020). Tutkimuksessa raportoitiin Rehmanniae Radix -kasvista vihreällä menetelmällä syntetisoitujen sinkkioksidin nanopartikkelien (ZnONPs) syöpälääkinnällisestä potentiaalista luusyöpäsoluja (MG-63) vastaan.
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin vuonna 2021 Materials Science and Engineering -lehdessä. Tutkimuksessa esitettiin Scutellaria baicalensis -kasvista biosynteettisesti valmistettujen sinkkioksidin nanopartikkelien luunparantavia ominaisuuksia MG-63-solulinjalla.
Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2021 Onco Targets and Therapy -lehdessä. Tutkimuksessa esitettiin kurkumiiniyhdisteen antituumorivaikutuksia osteosarkoomasoluja vastaan. Yhdiste sai aikaan nämä terapeuttiset vaikutukset inaktivoimalla p-JAK2/p-STAT3-syöpäsignaalireitin.
Tämä tutkimus julkaistiin vuonna 2018 International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science -lehdessä. Tutkimuksessa havaittiin, että bioenergiakäsitelty D3-vitamiini vaikuttaa myönteisesti luusolujen proliferaatioon, kypsymiseen ja erilaistumiseen sekä parantaa luun terveyttä kuvaavia parametrejä.
MG-63-solulinjaan liittyviä resursseja: protokollat, videot ja muuta
MG-63-solulinjasta on saatavilla useita resursseja, joissa selitetään sen soluviljely- ja transfektioprotokollat.
- MG-63-solujen transfektio: Tässä videossa selitetään kattavasti MG-63-solujen transfektioprotokolla.
- Adheesiivisten solujen siirto: Tämä video opastaa adheesiivisten solulinjojen aliviljelyssä tai siirrossa. Se auttaa sinua oppimaan soluviljelyn perusprotokollat.
Seuraavasta linkistä löydät MG-63-solujen viljelyohjeet.
- MG-63-solujen viljely: Tällä verkkosivustolla on helppokäyttöinen ja yksityiskohtainen ohje MG-63-solulinjan aliviljelyyn tai jakamiseen.
Usein kysyttyjä kysymyksiä MG-63-soluista
MG-63-solut ovat ihmisen osteosarkoomasolulinja, jota käytetään yleisesti tutkimuksessa luubiologian, syöpäbiologian ja lääketestien tutkimiseen. Ne on saatu 14-vuotiaan miehen osteosarkoomasta, ja niillä on osteoblastisoluille tyypillisiä ominaisuuksia.
MG-63-solut ovat peräisin ihmisen osteosarkoomasta, joka on eräs luusyöpätyyppi. Erityisesti ne ovat peräisin ihmispotilaan pahanlaatuisesta luukudoksesta.
MG-63-solujen kaksinkertaistumisaika on tyypillisesti 24-36 tuntia riippuen viljelyolosuhteista ja käytetystä elatusaineesta.
MG-63-soluilla on epänormaali karyotyyppi, jossa on useita kromosomipoikkeavuuksia. Tähän sisältyy sekä numeerisia että rakenteellisia poikkeavuuksia, jotka ovat tyypillisiä syöpäsoluille.
MG-63-solut ovat osteosarkoomasoluja, kun taas ihmisen fibroblastit ovat peräisin sidekudoksesta ja osallistuvat haavojen paranemiseen ja solunulkoisen matriisin muodostumiseen. Molempia solutyyppejä käytetään solujen vuorovaikutusta koskevissa tutkimuksissa, erityisesti luun ja kudostekniikan yhteydessä.
MG-63-soluilla on vahvat solujen kiinnittymisominaisuudet, joten ne soveltuvat tutkimuksiin, joissa tutkitaan solujen tarttumista, leviämistä ja vuorovaikutusta erilaisten biomateriaalien kanssa. Nämä ominaisuudet ovat ratkaisevan tärkeitä osteoblastien toimintojen ymmärtämisessä ja luuimplanttien optimoinnissa.
MG-63-soluja käytetään tutkimuksessa, jossa tutkitaan adenosiinin roolia luun aineenvaihdunnassa. Näiden solujen adenosiinireseptorit välittävät erilaisia toimintoja, kuten luun muodostumista ja resorptiota, mikä tekee niistä arvokkaita luun aineenvaihdunnan molekyylimekanismien tutkimisessa.
Hampaiden kiilteenmuodostukselle välttämätöntä proteiinia, amelogeniinia, voidaan tutkia myös MG-63-solujen avulla, jotta voidaan tutkia sen vaikutuksia luusoluihin ja sen mahdollista roolia luukudosrakentamisessa ja -regeneraatiossa.
MG-63-solut ovat tärkeitä tutkittaessa osseointegraation optimointia, eli luukudoksen integroitumista implantteihin. Tutkijat käyttävät näitä soluja testatakseen uusia materiaaleja ja pintamodifikaatioita, jotka voivat parantaa implanttien integroitumista ja vakautta.
Fenotyyppisellä stabiilisuudella tarkoitetaan solujen ominaisuuksien pysyvyyttä ajan mittaan ja useiden läpikäyntien aikana. MG-63-solujen fenotyyppisen vakauden säilyttäminen on tärkeää, jotta voidaan varmistaa luotettavat ja toistettavat tulokset kokeissa.
MG-63-solut toimivat mallina osteoblastien toimintojen, kuten luun muodostumisen ja mineralisaation, sekä osteosarkooman patofysiologian tutkimiseen, mikä antaa tietoa syövän etenemisestä ja mahdollisista terapeuttisista kohteista.
Kyllä, MG-63-soluja voidaan käyttää ihmisen interferonien vaikutusten tutkimiseen luusyöpäsoluihin, mukaan lukien niiden antiviraaliset, antiproliferatiiviset ja immunomodulatoriset ominaisuudet, mikä edistää syövän immunoterapian ymmärtämistä.
Lähteet
- Wandiyanto, J.V. ym., Osteoblastien kaltaisten MG-63-solujen kohtalo esikäsitellyillä bakteereja tuhoavilla nanorakenteisilla titaanipinnoilla. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A. ym., Ihmisen interferoni: massatuotanto äskettäin perustetussa MG-63-solulinjassa. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): s. 11–5.
- Tang, Y., ym., Scutellaria baicalensis -kasvista peräisin olevien sinkkioksidin nanopartikkelien osteogeeninen erilaistuminen ja mineralisaatiopotentiaali ihmisen osteoblastien kaltaisissa MG-63-soluissa. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: s. 111656.
- Lee, C.M. ym., Tomentosinilla on syöpää estävä vaikutus ihmisen osteosarkooma-MG-63-soluissa solunsisäisten reaktiivisten happiyhdisteiden induktion kautta. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): s. 1508.