KC-solut

777,00 €*

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 300604

Käyttöturvallisuustiedote

Tuoteseloste

Materiaalin siirtosopimus

Kuvaus	KC (Kc167) on Drosophila melanogaster -alkion solulinja, joka on peräisin selkäpuolen sulkeutumisvaiheessa olevasta naarasalkiosta ja rekisteröity Cellosaurus-tietokantaan tunnuksella CVCL_Z833. Linja perustettiin alun perin, ja sitä on käytetty laajasti Drosophila-solubiologiassa, geneettisissä seulonnoissa ja funktionaalisessa genomiikassa. Kc167-solut on immortalisoitu SV40:llä, ja ne kasvavat puolikiinnittyneinä muodostaen sekapopulaation, jossa on kiinnittyneitä ja löyhästi kelluvia soluja. Ne kuuluvat parhaiten karakterisoituihin Drosophila-solulinjoihin ja soveltuvat erinomaisesti RNAi-välitteiseen geenien vaimentamiseen, mikä tekee niistä kulmakivimallin koko genomin kattaville RNAi-seulonnoille selkärangattomien biologiassa. KC-soluja voidaan käyttää Drosophila-solubiologiassa, genominlaajuisissa RNAi- ja CRISPR-seuloissa, signaalinsiirtoreittien tutkimuksissa (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), luontaisen immuniteetin tutkimuksessa sekä evoluutiossa säilyneiden reittien vertailututkimuksissa. Täysin sekvensoitu ja annotoitu Drosophila-genomi yhdistettynä laajoihin julkisiin RNAi-reagenssien tietokantoihin (esim. DRSC/TRiP) tekee KC-soluista erityisen tehokkaita puolueettomaan funktionaalisen genomiikan tutkimukseen. SV40-immortalisaation vuoksi soluihin sovelletaan BSL-2-luokitusta. KC-soluja viljellään Schneiderin Drosophila-kasvatusliuoksessa, johon on lisätty 2 mM glutamiinia ja 10 % FBS:ää. On tärkeää huomata, että Drosophila-solulinjoja viljellään 25 °C:ssa ilmakehän ilmassa ilman CO₂:ta (ei 37 °C:ssa / 5 % CO₂:ssa kuten nisäkkäiden solujen tapauksessa). Solut siirretään varovasti resuspendoimalla ja laimentamalla (puoliadherentti kasvu). Elatusaine uusitaan tai soluja laimennetaan 2–3 päivän välein.
Organismi	Drosophila melanogaster (hedelmäkärpänen)
Kudos	Alkio
Tauti	Normaali
Metastaattinen paikka	Alkio (selkäpuolen sulkeutumisvaihe)
Sovellukset	Drosophila-solubiologia; koko genomin kattavat RNAi-seulonnat; CRISPR-seulonnat; signaalinsiirto (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); luontainen immuunivaste; selkärangattomien funktionaalinen genomiikka
Synonyymit	KC, K C

Ikä	Selkäpuolen sulkeutumisvaihe
Sukupuoli	Nainen
Morfologia	Osittain kiinnittynyt, epiteelin kaltainen
Solutyyppi	Alkion solut
Kasvuominaisuudet	osittain kiinnittynyt

Viittaus	KC (Cytion-tuotenumero 300604)
Bioturvallisuustaso	2
NCBI_TaxID	7227
CellosaurusLiittyminen	CVCL_Z833
GMO:n asema	GMO-S2: Tämä Drosophila-solulinja sisältää vakaasti integroidun SV40-immortalisaatiokasetin. BSL-2-turvaluokitus vaaditaan. Tämä luokitus koskee ainoastaan Saksaa, ja se voi olla erilainen muissa maissa.

Virusherkkyys	SV40:n ikuistaminen

Viljelyalusta	Schneiderin Drosophila-kasvatusliuos + 2 mM glutamiinia + 10 % sikiön naudan seerumia (FBS).
Lisäravinteet	Lisää elatusaineeseen 2 mM glutamiinia ja 10 % FBS:ää
Dissosiaatioreagenssi	Ei vaadita (puolikiinnittynyt; sekoita varovasti uudelleen)
Kaksinkertaistumisaika	noin 24–48 tuntia
Alakulttuuri	Pipetoi viljelmää varovasti, jotta puolikiinnittyneet solut irtoavat. Siirrä sopiva tilavuus uuteen pulloon ja lisää tuoretta, esilämmitettyä Schneiderin elatusainetta. Laimenna tiheyteen 5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ solua/ml. Inkuboi 25 °C:ssa ilman CO₂:ta.
Jakosuhde	1–3
Kylvötiheys	5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ solua/ml
Nesteen uusiminen	2-3 päivän välein
Jäädytä väliaine	Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Solujen sulattaminen ja viljely	Varmista, että injektiopullo pysyy syväjäädytettynä toimitettaessa, sillä solut kuljetetaan kuivajäässä, jotta optimaalinen lämpötila säilyy kuljetuksen aikana. Vastaanotettaessa kryopullo joko säilytetään välittömästi alle -150 °C:n lämpötilassa solujen eheyden säilyttämiseksi tai edetään vaiheeseen 3, jos tarvitaan välitöntä viljelyä. Välitöntä viljelyä varten sulata injektiopullo nopeasti upottamalla se 37 °C:n vesihauteeseen, jossa on puhdasta vettä ja antimikrobista ainetta, ja sekoittamalla sitä varovasti 40-60 sekunnin ajan, kunnes jäästä on jäljellä pieni jäämöhkäle. Suorita kaikki seuraavat vaiheet steriileissä olosuhteissa virtaushupussa ja desinfioi kryopullo 70-prosenttisella etanolilla ennen avaamista. Avaa desinfioitu injektiopullo varovasti ja siirrä solususpensio 15 ml:n sentrifugiputkeen, joka sisältää 8 ml huoneenlämpöistä elatusainetta, varovasti sekoittaen. Sentrifugoi seosta 300 x g:n voimakkuudella 3 minuutin ajan solujen erottamiseksi ja hävitä varovasti supernatantti, joka sisältää jäännöspakastusmediumia. Suspendoidaan solupelletti varovasti uudelleen 10 ml:aan tuoretta elatusainetta. Jos solut ovat tarttuvia, jaa suspensio kahden T25-kolvin kesken; jos kyseessä ovat suspensioviljelmät, siirrä kaikki väliaine yhteen T25-kolviin solujen tehokkaan vuorovaikutuksen ja kasvun edistämiseksi. Noudata vakiintuneita aliviljelyprotokollia solulinjan jatkuvan kasvun ja ylläpidon varmistamiseksi ja luotettavien kokeellisten tulosten varmistamiseksi.
Inkubaatioilmapiiri	25 °C, ympäröivä ilma (ei vaadi CO₂:ta).
Toimitusehdot	Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
Varastointiolosuhteet	Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Jos aiot käyttää Cytion-solulinjoja yksinomaan sisäiseen tutkimukseen yhdellä tutkimuspaikalla, täytä ja allekirjoita materiaalinsiirtosopimus (MTA) ja lähetä se tilauksesi mukana.

Kaikissa kaupallisissa sovelluksissa – mukaan lukien mutta ei rajoittuen maksullisiin palveluihin, laadunvalvontatestaukseen, tuotteiden julkaisemiseen, diagnostiseen käyttöön tai sääntelytutkimuksiin – täytä käyttötarkoituksen lomake, jotta voimme laatia projektiisi sopivan sopimuksen.

Huomaa: MTA koskee vain tiettyjä solulinjoja. Jos tämä ilmoitus ja MTA-asiakirja näkyvät tuotesivulla, sopimus on voimassa. Solulinjoille, joita MTA ei koske, sopimusta ei mainita. MTA ei ole voimassa asiakkaille Amerikassa, Kiinassa tai Taiwanissa. Ota yhteyttä Yhdysvaltain yksikköömme saadaksesi sopivan sopimuksen.

KC-solut

Yleisiä tietoja

Ominaisuudet

Sääntelytiedot

Biomolekyylitiedot

Käsittely

Laadunvalvonta ja molekyylianalyysi

Materiaalin siirtosopimus