KC-solut
Yleisiä tietoja
| Kuvaus | KC (Kc167) on Drosophila melanogaster -alkion solulinja, joka on peräisin selkäpuolen sulkeutumisvaiheessa olevasta naarasalkiosta. Linja perustettiin alun perin, ja sitä on käytetty laajalti Drosophila-solubiologiassa, geneettisissä seulonnoissa ja funktionaalisessa genomiikassa. Kc167-solut on immortalisoitu SV40-viruksella, ja ne kasvavat puolikiinnittyneinä muodostaen sekapopulaation, jossa on sekä kiinnittyneitä että löyhästi kelluvia soluja. Ne kuuluvat parhaiten karakterisoituihin Drosophila-solulinjoihin ja soveltuvat erinomaisesti RNAi-välitteiseen geenien vaimentamiseen, mikä tekee niistä kulmakivimallin koko genomin kattaville RNAi-seulonnoille selkärangattomien biologiassa. KC-soluja voidaan käyttää Drosophila-solubiologiassa, koko genomin kattavissa RNAi- ja CRISPR-seulonnoissa, signaalinsiirtoreittien tutkimuksissa (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), luontaisen immuniteetin tutkimuksessa sekä evoluutiossa säilyneiden reittien vertailututkimuksissa. Täysin sekvensoitu ja annotoitu Drosophila-genomi yhdistettynä laajoihin julkisiin RNAi-reagenssien tietokantoihin (esim. DRSC/TRiP) tekee KC-soluista erityisen tehokkaita puolueettomaan funktionaalisen genomiikan tutkimukseen. SV40-immortalisoinnin vuoksi soluihin sovelletaan BSL-2-luokitusta. |
|---|---|
| Organismi | Drosophila melanogaster (hedelmäkärpänen) |
| Kudos | Alkio |
| Tauti | Normaali |
| Metastaattinen paikka | Alkio (selkäpuolen sulkeutumisvaihe) |
| Sovellukset | Drosophila-solubiologia; koko genomin kattavat RNAi-seulonnat; CRISPR-seulonnat; signaalinsiirto (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); luontainen immuunivaste; selkärangattomien funktionaalinen genomiikka |
| Synonyymit | KC, K C |
Ominaisuudet
| Ikä | Selkäpuolen sulkeutumisvaihe |
|---|---|
| Sukupuoli | Nainen |
| Morfologia | Osittain kiinnittynyt, epiteelin kaltainen |
| Solutyyppi | Alkion solut |
| Kasvuominaisuudet | osittain kiinnittynyt |
Sääntelytiedot
| Viittaus | KC (Cytion-tuotenumero 300604) |
|---|---|
| Bioturvallisuustaso | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| CellosaurusLiittyminen | CVCL_Z833 |
| GMO:n asema | GMO-S2: Tämä Drosophila-solulinja sisältää vakaasti integroidun SV40-immortalisaatiokasetin. BSL-2-turvaluokitus vaaditaan. Tämä luokitus koskee ainoastaan Saksaa, ja se voi olla erilainen muissa maissa. |
Biomolekyylitiedot
| Virusherkkyys | SV40:n ikuistaminen |
|---|
Käsittely
| Viljelyalusta | Schneiderin Drosophila-kasvatusliuos + 2 mM glutamiinia + 10 % sikiön naudan seerumia (FBS). |
|---|---|
| Lisäravinteet | Lisää elatusaineeseen 2 mM glutamiinia ja 10 % FBS:ää |
| Dissosiaatioreagenssi | Ei vaadita (puolikiinnittynyt; sekoita varovasti uudelleen) |
| Kaksinkertaistumisaika | noin 24–48 tuntia |
| Alakulttuuri | Pipetoi viljelmää varovasti, jotta puolikiinnittyneet solut irtoavat. Siirrä sopiva tilavuus uuteen pulloon ja lisää tuoretta, esilämmitettyä Schneiderin elatusainetta. Laimenna tiheyteen 5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ solua/ml. Inkuboi 25 °C:ssa ilmakehän ilmassa ilman CO₂:ta. |
| Jakosuhde | 1–3 |
| Kylvötiheys | 5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ solua/ml |
| Nesteen uusiminen | 2-3 päivän välein |
| Jäädytä väliaine | Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä. |
| Solujen sulattaminen ja viljely |
|
| Inkubaatioilmapiiri | 25 °C, ympäröivä ilma (ei vaadi CO₂:ta). |
| Toimitusehdot | Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon. |
| Varastointiolosuhteet | Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen. |
Laadunvalvonta ja molekyylianalyysi
Materiaalin siirtosopimus
Jos aiot käyttää Cytion-solulinjoja yksinomaan sisäiseen tutkimukseen yhdellä tutkimuspaikalla, täytä ja allekirjoita materiaalinsiirtosopimus (MTA) ja lähetä se tilauksesi mukana.
Kaikissa kaupallisissa sovelluksissa – mukaan lukien mutta ei rajoittuen maksullisiin palveluihin, laadunvalvontatestaukseen, tuotteiden julkaisemiseen, diagnostiseen käyttöön tai sääntelytutkimuksiin – täytä käyttötarkoituksen lomake, jotta voimme laatia projektiisi sopivan sopimuksen.
Huomaa: MTA koskee vain tiettyjä solulinjoja. Jos tämä ilmoitus ja MTA-asiakirja näkyvät tuotesivulla, sopimus on voimassa. Solulinjoille, joita MTA ei koske, sopimusta ei mainita. MTA ei ole voimassa asiakkaille Amerikassa, Kiinassa tai Taiwanissa. Ota yhteyttä Yhdysvaltain yksikköömme saadaksesi sopivan sopimuksen.
-
Tarvittavat tuotteet
Tarvittavat tuotteet
FBS, sikiön naudan seerumi, alkuperämaa Yhdysvallat, 50 mlTämä Yhdysvalloista peräisin oleva, steriilisti suodatettu naudan sikiöseerumi (FBS) tarjoaa tasalaatuisen perustan soluviljelykäyttöön. Jokainen erä käy läpi laadunvalvontatarkastuksen, jossa tutkitaan steriiliys, mykoplasma ja naudanvirukset. Lisäksi jokainen erä on biologisesti validoitu sen varmistamiseksi, että se tukee CHO
- ja HEK293-solulinjojen kasvua. Seerumi on pakattu 50 ml:n ja 500 ml:n pakkauksissa. Eräkohtaiset analyysitodistukset (CoA) ovat saatavilla pyynnöstä.
Tuotetiedot
Ulkonäkö
Kirkas, keltaisenruskea neste
Säilytys ja säilyvyysaika
Säilytä ≤-15 °C:ssa.Vältä toistuvia jäädytys-sulatusjaksoja. Suositellaan alikvoottien valmistamista.Avaamisen jälkeen säilytä 4 °C:ssa ja käytä 4–6 viikon kuluessa.
Kuljetusolosuhteet
Jäädytettynä (kuivajää)
Sulatus
Yön yli +2 °C – +8 °C:ssa. Sekoita varovasti, jotta sisältö homogenisoituu.52,00 €*