HT55-solut

430,00 €*

Tuotteet toimitetaan jäädytettyinä kuivajäässä kryoputkissa. Jokainen kryoputki sisältää tyypillisesti 3 × 10 ⁶ solua adheesiivisille soluille tai 5 × 10⁶ solua suspensiosoluille (katso lisätietoja erän CoA-todistuksesta).

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 305018

Käyttöturvallisuustiedote

Tuoteseloste

Materiaalin siirtosopimus

Kuvaus	HT55 on ihmisen peräsuolen adenokarsinooman solulinja, joka on peräisin 54-vuotiaan valkoihoisen naisen primaarisesta peräsuolikasvaimesta. Solulinja kasvaa kiinnittyvänä yksikerroksena, jolla on epiteelinomainen morfologia, ja se on rekisteröity Cellosaurus-tietokantaan tunnuksella CVCL_1294. HT55:ssä on useita heterotsygoottisia ja homotsygoottisia toiminnanmenetysmutaatioita APC-kasvainsuppressorigeenissä (adenomatoottinen polypoosi coli), mukaan lukien p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ja p.Lys241Ter (kaikki heterotsygoottisia) sekä homotsygoottinen p.Arg213Leu-substituutio. Tämä mutaatioprofiili tekee HT55:stä biologisesti merkittävän mallin APC:n välittämästä kolorektaalisen syövän synnystä, mikä heijastaa kanonisen WNT-signalointireitin säätelyhäiriötä, joka on suurimman osan ihmisen kolorektaalisista syövistä taustalla. HT55-solulinjaa käytetään laajalti kolorektaalisyövän tutkimuksessa WNT/β-kateniini-signaloinnin, APC-kasvainsuppressorin toiminnan, lääkeherkkyyden ja -resistenssin tutkimiseen sekä WNT-signalointireitin komponentteihin kohdistuvien lääkeaineiden prekliiniseen arviointiin. Kanta soveltuu in vitro -farmakologisiin määrityksiin ja ksenotransplantaattitutkimuksiin immuunipuutteisissa hiirimalleissa, ja se tarjoaa kiinnittyvän, helposti käsiteltävän in vitro -alustan kolorektaalisyövän mekanistiseen ja translaationaaliseen tutkimukseen. Useiden APC-trunkaatiomutaatioiden läsnäolo tekee HT55:stä edustavan esimerkin mikrosatelliittivakaasta, kromosomaalisesti epävakaasta paksusuolisyövän alatyypistä, jota yleisesti ajaa APC:n toimintahäiriö. HT55-solulinjaa ylläpidetään EMEM-elatusliuoksessa (MEM Eagle, pitoisuus: 2 mM L-glutamiinia, pitoisuus: 2,2 g/l NaHCO₃, pitoisuus: EBSS; Cytion-tuotenumero 820100a), johon on lisätty 10 % FBS:ää, 37 °C:ssa kostutetussa ilmakehässä, jossa on 5 % CO₂. Solut siirrostetaan Accutase-entsyymillä, kun ne ovat noin 80–90-prosenttisesti konfluentteja. Suositeltu jakosuhde on 1:3–1:5 ja kylvötiheys 1–3 × 10⁴ solua/cm². Elatusaine uusitaan 2–3 päivän välein. Kaksinkertaistumisaika on noin 28 tuntia.
Organismi	Ihminen
Kudos	Peräsuoli
Tauti	Adenokarsinooma
Sovellukset	Paksusuolen ja peräsuolen syövän tutkimus; WNT/APC-signaalireitin tutkimukset; lääkeherkkyys- ja resistenssitestaus; prekliininen onkologia; ksenotransplantaattimallit; kohdennetun hoidon arviointi
Synonyymit	HT55

Ikä	54 vuotta
Sukupuoli	Nainen
Etnisyys	Kaukasialainen
Morfologia	Epiteelin kaltainen
Solutyyppi	Epiteelisolut
Kasvuominaisuudet	Tarttuva

Viittaus	HT55 (Cytion-tuotenumero 305018)
Bioturvallisuustaso	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusLiittyminen	CVCL_1294

Mutaatioprofiili	Mutaatio: p.Gln1131Ter, heterotsygootti; Mutaatio: p.Gln1303Ter, heterotsygootti; Mutaatio: p.Arg1463Ser, heterotsygootti; Mutaatio: p.Asn581Tyr, heterotsygootti; Mutaatio: p.Lys241Ter, heterotsygootti; Mutaatio: p.Arg213Leu, homotsygootti

Viljelyalusta	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Lisäravinteet	Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi	Accutase
Kaksinkertaistumisaika	28 tuntia
Alakulttuuri	Poista vanha elatusaine kiinnittyneistä soluista ja huuhtele ne kalsiumia ja magnesiumia sisältämättömällä PBS-liuoksella. Käytä T25-pulloihin 3–5 ml PBS-liuosta ja T75-pulloihin 5–10 ml. Peitä solut sitten kokonaan Accutase-liuoksella; käytä 1–2 ml T25-pulloihin ja 2,5 ml T75-pulloihin. Anna solujen inkuboida huoneenlämmössä 8–10 minuuttia, jotta ne irtoavat. Inkuboinnin jälkeen sekoita soluja varovasti 10 ml:n kanssa elatusainetta niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoi sitten 300×g:ssa 3 minuuttia. Hävitä supernatantti, resuspendoi solut tuoreeseen elatusaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, joissa on jo tuoretta elatusainetta.
Jakosuhde	1–5
Kylvötiheys	1–3 x 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen	2-3 päivän välein
Jäädytä väliaine	Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Solujen sulattaminen ja viljely	Varmista, että injektiopullo pysyy syväjäädytettynä toimitettaessa, sillä solut kuljetetaan kuivajäässä, jotta optimaalinen lämpötila säilyy kuljetuksen aikana. Vastaanotettaessa kryopullo joko säilytetään välittömästi alle -150 °C:n lämpötilassa solujen eheyden säilyttämiseksi tai edetään vaiheeseen 3, jos tarvitaan välitöntä viljelyä. Välitöntä viljelyä varten sulata injektiopullo nopeasti upottamalla se 37 °C:n vesihauteeseen, jossa on puhdasta vettä ja antimikrobista ainetta, ja sekoittamalla sitä varovasti 40-60 sekunnin ajan, kunnes jäästä on jäljellä pieni jäämöhkäle. Suorita kaikki seuraavat vaiheet steriileissä olosuhteissa virtaushupussa ja desinfioi kryopullo 70-prosenttisella etanolilla ennen avaamista. Avaa desinfioitu injektiopullo varovasti ja siirrä solususpensio 15 ml:n sentrifugiputkeen, joka sisältää 8 ml huoneenlämpöistä elatusainetta, varovasti sekoittaen. Sentrifugoi seosta 300 x g:n voimakkuudella 3 minuutin ajan solujen erottamiseksi ja hävitä varovasti supernatantti, joka sisältää jäännöspakastusmediumia. Suspendoidaan solupelletti varovasti uudelleen 10 ml:aan tuoretta elatusainetta. Jos solut ovat tarttuvia, jaa suspensio kahden T25-kolvin kesken; jos kyseessä ovat suspensioviljelmät, siirrä kaikki väliaine yhteen T25-kolviin solujen tehokkaan vuorovaikutuksen ja kasvun edistämiseksi. Noudata vakiintuneita aliviljelyprotokollia solulinjan jatkuvan kasvun ja ylläpidon varmistamiseksi ja luotettavien kokeellisten tulosten varmistamiseksi.
Inkubaatioilmapiiri	37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.
Toimitusehdot	Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
Varastointiolosuhteet	Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Jos aiot käyttää Cytion-solulinjoja yksinomaan sisäiseen tutkimukseen yhdellä tutkimuspaikalla, täytä ja allekirjoita materiaalinsiirtosopimus (MTA) ja lähetä se tilauksesi mukana.

Kaikissa kaupallisissa sovelluksissa – mukaan lukien mutta ei rajoittuen maksullisiin palveluihin, laadunvalvontatestaukseen, tuotteiden julkaisemiseen, diagnostiseen käyttöön tai sääntelytutkimuksiin – täytä käyttötarkoituksen lomake, jotta voimme laatia projektiisi sopivan sopimuksen.

Huomaa: MTA koskee vain tiettyjä solulinjoja. Jos tämä ilmoitus ja MTA-asiakirja näkyvät tuotesivulla, sopimus on voimassa. Solulinjoille, joita MTA ei koske, sopimusta ei mainita. MTA ei ole voimassa asiakkaille Amerikassa, Kiinassa tai Taiwanissa. Ota yhteyttä Yhdysvaltain yksikköömme saadaksesi sopivan sopimuksen.

HT55-solut

Yleisiä tietoja

Ominaisuudet

Sääntelytiedot

Biomolekyylitiedot

Käsittely

Laadunvalvonta ja molekyylianalyysi

Materiaalin siirtosopimus