EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiinia, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) on yksi yleisimmin käytetyistä perusviljelyalustoista monenlaisten nisäkässolujen, erityisesti kiinnittyvien solulinjojen, viljelyyn. Alun perin Harry Eaglen kehittämä tämä klassinen koostumus sisältää välttämättömät aminohapot, vitamiinit ja epäorgaaniset suolat, joita tarvitaan sekä primaarisolujen että vakiintuneiden solulinjojen kasvun tukemiseen tavanomaisissa viljelyolosuhteissa.
Tämä käyttövalmis, steriilisti suodatettu nestemäinen formulaatio on täydennetty Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS) -liuoksella, 2 mM L-glutamiinilla, D-glukoosilla (1,0 g/l) ja 2,2 g/l natriumbikarbonaatilla (NaHCO3), minkä ansiosta se sopii käytettäväksi CO2-säädellyssä inkubaattoriympäristössä (tyypillisesti 5 % CO2). Mukana oleva fenolipunainen toimii pH-indikaattorina, mikä mahdollistaa väliaineen tilan kätevän visuaalisen seurannan soluviljelyn aikana.
Tärkeimmät ominaisuudet
- Klassinen Eagle’s MEM -koostumus, jossa on Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS)
- Sisältää 2 mM L-glutamiinia – valmis välittömään käyttöön
- 2,2 g/l natriumbikarbonaattia – puskuroitu 5 %:n CO2-inkubaatiota varten
- Pääasiallisena hiilen lähteenä D-glukoosi (1,0 g/l)
- Fenolipunainen pH-indikaattorina
- Ilman HEPES:ää ja ilman natriumpyruvaattia
- Steriilisuodatettu nestemäinen elatusaine, käyttövalmis
- pH 7,0 – 7,6
Tyypillisiä sovelluksia
EMEM tukee monenlaisten nisäkässolulinjojen viljelyä, mukaan lukien HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 ja monet primaarisolut. Yleisiä käyttökohteita ovat:
- Adherenttien solulinjojen rutiinihoito ja laajentaminen
- Virusten lisääminen ja rokotetuotannon työnkulut
- Sytotoksisuus- ja bioassay-sovellukset
- Transfektio- ja proteiini-ilmentymistutkimukset
- Solubiologian ja molekyylibiologian perustutkimus
Optimaalisen solujen kasvun saavuttamiseksi EMEM-alustaan lisätään tyypillisesti 5–10 % naudan sikiöseerumia (FBS) ja, solulinjasta riippuen, ei-välttämättömiä aminohappoja (NEAA) sekä antibiootteja, kuten penisilliiniä/streptomysiiniä.
Käsittely ja säilytys
Säilytä avaamaton pullo +2 °C – +8 °C:ssa, valolta suojattuna. Avaamisen jälkeen käytä aseptisissa olosuhteissa. L-glutamiini liuoksessa hajoaa vähitellen – suosittelemme käyttämään väliainetta 4 viikon kuluessa avaamisesta parhaan suorituskyvyn saavuttamiseksi tai lisäämään tuoretta L-glutamiinia ennen käyttöä, jos sitä säilytetään pidempään. Anna väliaineen lämmetä 37 °C:seen ennen sen lisäämistä soluihin.
Laatu
Valmistettu tiukkojen laatustandardien mukaisesti. Jokainen erä testataan steriilisyyden, pH:n, osmolaliteetin ja endotoksiinipitoisuuden osalta, jotta varmistetaan tasainen suorituskyky soluviljelykäytöissä.
Tuotetiedot
| Tekniset tiedot | Yksityiskohdat |
|---|---|
| Tuotetyyppi | MEM |
| Tuoteryhmä | Soluviljelyalustat |
| Muoto | Nestemäinen |
| Steriili | Kyllä |
| Koko | 500 ml |
| L-glutamiini | Sisältää L-glutamiinia (2 mM) |
| Glukoosi | Sisältää glukoosia (1,0 g/l) |
| Natriumbikarbonaatti | NaHCO3:lla (2,2 g/l) |
| HEPES | Ilman HEPES:ää |
| Natrium-pyruvaatti | Ilman natriumpyruvaattia |
| Fenolipunainen | Fenolipunalla |
| Suolaliuos | Earlen tasapainotettu suolaliuos (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Endotoksiinipitoisuus | Ei määritelty |
| Säilytys | +2 °C – +8 °C |
Koostumus (litraa kohti)
| Ainesosa | Pitoisuus (mg/l) |
|---|---|
| Epäorgaaniset suolat | |
| Kalsiumkloridi · 2H2O | 265,00 |
| Magnesiumsulfaatti | 97,72 |
| Kaliumkloridi | 400,00 |
| Natriumkloridi | 6 800,00 |
| Natriumdihydrogeenifosfaatti, vedetön | 122,00 |
| Natriumbikarbonaatti (NaHCO3) | 2 200,00 |
| Aminohapot | |
| L-arginiini · HCl | 126,00 |
| L-kystiini · 2HCl | 31,30 |
| L-glutamiini | 292,00 |
| L-histidiini · HCl · H2O | 42,00 |
| L-isoleusiini | 52,00 |
| L-leusiini | 52,00 |
| L-lysiini · HCl | 72,50 |
| L-metioniini | 15,00 |
| L-fenyylialaniini | 32,00 |
| L-treoniini | 48,00 |
| L-tryptofaani | 10,00 |
| L-tyrosiini · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valiini | 46,00 |
| Vitamiinit | |
| D-kalsiumpantotenaatti | 1,00 |
| Koliinikloridi | 1,00 |
| Foolihappo | 1,00 |
| myo-inositoli | 2,00 |
| Nikotiiniamidi | 1,00 |
| Pyridoksaali · HCl | 1,00 |
| Riboflaviini | 0,10 |
| Tiamiini · HCl | 1,00 |
| Muut komponentit | |
| D(+)-glukoosi | 1 000,00 |
| Fenolipunainen | 10,00 |