NCH421K rakud
800,00 €*
Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 6 rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 106 rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).
Üldine teave
| Kirjeldus | NCH421K on inimese glioblastoomi tüvirakkudele sarnane rakuliin, mis on saadud täiskasvanud patsiendilt võetud esmasest glioblastoomi kasvajast. See rakuliin kuulub kasvajate algatajate rühma, mis säilitavad närvitüvirakkude peamised omadused, sealhulgas eneseuuenemisvõime, multipotentsuse ja võime jäljendada kasvaja heterogeensust. NCH421K rakke kasvatatakse tavaliselt seerumivabades tingimustes ja need kasvavad mittekinnitunud neurosfääridena, mis on tüvirakkudele sarnaste glioomikultuuride tunnuseks. Need ekspresseerivad kanonilisi tüvirakkude markereid, nagu CD133 ja nestin, mis toetab nende klassifitseerimist glioblastoomi tüvirakkudele sarnase mudelina. NCH421K kasv ja ellujäämine sõltuvad tugevalt põhilisest fibroblastide kasvufaktorist (bFGF), mis soodustab proliferatsiooni ja tüvirakkudele omaste omaduste säilitamist, samas kui epidermaalne kasvufaktor (EGF) avaldab selle laienemisele minimaalset mõju. Rakud säilitavad bFGF-stimulatsiooni all tüvirakkude markerite kõrge ekspressiooni ja näitavad võimet moodustada kasvajaid in vivo, rõhutades nende kasvajate tekitamise potentsiaali. Nende omaduste tõttu kasutatakse NCH421K laialdaselt glioblastoomi tüvirakkude bioloogia, raviresistentsuse, diferentseerumisstrateegiate uuringutes ning kasvajate algatajarakkude populatsioonide hävitamisele suunatud sihtotstarbeliste ravimeetodite hindamisel. Selle rakuliini lõi Christel Herold-Mende glioblastoomi koest. |
|---|---|
| Organism | Inimene |
| Kude | Aju |
| Haigus | Glioblastoom |
| Sünonüümid | NCH421k |
Omadused
| Vanus | 66 aastat |
|---|---|
| Sugu | Mees |
| Etniline kuuluvus | Kaukaasia |
| Kasvuomadused | Sfääriline kultuur |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | NCH421K (Cytioni katalooginumber 300118) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_x910 |
Biomolekulaarsed andmed
| Tumorigeeniline | Jah |
|---|
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a) |
|---|---|
| Täiendused | Keskkonda täiendatakse 10% FBS, 5 mg/L hepariini, 20 ng/ml bFGF, 20 mikrogrammi/L EGF, 5 mg/L insuliini, 100 mg/L transferriini, 5,2 mikrogrammi/L Na-seleniit, 6,3 mikrogrammi/L progesteroon, 161,1 mikrogrammi/L putresiin, 50 mg/L hüdrokortinson |
| Aja kahekordistamine | 35-40 tundi |
| Subkultuuride kasvatamine | Sferoidikultuuride subkultuurimiseks alustage sferoidide mehaanilise dissotsiatsiooniga, kasutades Eppendorfi pipetti, millel on 1000 μl filtriotsikud, 5-10 korda üles-alla pipetiga. Pärast seda tsentrifuugige segu 300 g juures 5 minutit toatemperatuuril, et rakud pelleteerida. Visake supernatant ära ja resuspenseerige rakupellet värskes kultuurkeskkonnas. Lõpuks kandke resuspendeeritud rakud uutesse kasvatusanumatesse, et soodustada edasist sferoidide moodustumist. Selline lähenemine tagab sferoidide tõhusa lagunemise ja valmistab neid ette jätkuvaks kasvuks uues keskkonnas |
| Külvi tihedus | 1 kuni 2 x 105 rakku/ml |
| Vedeliku uuendamine | 2 kuni 3 korda nädalas |
| Taastumisjärgne taastumine | Laske rakkudel külmutusprotsessist taastuda vähemalt 24-48 tundi. |
| Külmutage keskkond | Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Kolvi katmine | Puudub |
| Külmutamise protseduur | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|---|
| HLA alleles |
A*: '24:02:01, '24:03:01
B*: '07:02:01, '18:01:01
C*: '05:01:01, '07:02:01
DRB1*: '03:01:01, '15:02:01G
DQA1*: '01:03:01, '05:01:01
DQB1*: '02:01:01, '06:01:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:01:01
|
Analüüsisertifikaat (CoA)
| Partii number | Sertifikaadi tüüp | Kuupäev | Kataloogi number |
|---|---|---|---|
| 300118-516SF | Analüüsitunnistus | 23. Apr. 2026 | 300118 |