DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 on bioloogilistes uuringutes rakukultuurides laialdaselt tunnustatud ja laialdaselt kasutatav baaskeskkond. See on erinevate imetajate rakuliinide kasvu jaoks oluline toitainete allikas, eriti kui seda täiendatakse loote veise seerumiga (FBS).
See unikaalne koostis ühendab Dulbecco modifitseeritud Eagle'i keskkonna (DMEM) ja Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) täpses 1:1 suhtes. L-glutamiini lisamine täiustab selle koostist veelgi.
DMEM, mis on tuletatud Eagle'i minimaalse essentsiaalse keskkonna (EMEM) baasil, pakub võrreldes oma eelkäijaga suuremat aminohapete ja vitamiinide kontsentratsiooni. Seevastu Ham's F-12 põhineb Ham's F-10 keskkonnal, pakkudes täiendavat komplekti olulisi komponente.
Optimaalse rakkude kasvu toetamiseks on tavaline lisada DMEM:Ham's F12-le FBS-i tüüpilises kontsentratsioonis 5–10%. See lisand on vajalik, kuna keskkonnas puuduvad rakkude arenguks olulised kasvuhormoonid, lipiidid ja valgud.
DMEM:Ham's F12 sisaldab pH-puhversüsteemi ja seda täiendatakse sageli fenoolpunasega, mis on pH-indikaator. DMEM:Ham's F12-s või mis tahes bikarbonaatpuhversüsteemi kasutavas keskkonnas kasvatatavad rakud vajavad sobiva pH-taseme säilitamiseks kontrollitud CO2-keskkonda (5–10%).
Kvaliteedikontroll
- Steriilselt filtreeritud
Ladustamine ja kõlblikkusaeg
- Hoida +2 °C kuni +8 °C juures, valguse eest kaitstult.
- Pärast avamist säilitada temperatuuril 4 °C ja kasutada 6–8 nädala jooksul.
Transporditingimused
- Ümbritseva õhu temperatuur
Hooldus
- Hoida pimedas kohas temperatuuril +2 °C kuni +8 °C. Vältida külmutamist ja sagedast soojendamist temperatuurini +37 °C, kuna see vähendab toote kvaliteeti.
- Ärge kuumutage keskkonda üle 37 °C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid, nagu mikrolaineahjud.
- Kui kasutatakse ainult osa keskkonnast, võtke vajalik kogus välja ja soojendage see enne kasutamist toatemperatuurini.
Koostis
| Kategooria | Komponendid | Kontsentratsioon (mg/l) |
| Aminohapped | Glütsiin | 18,75 |
| L-alaniin | 4,45 | |
| L-arginiin HCl | 147,50 | |
| L-asparagiin H₂O | 7,50 | |
| L-asparagiinhape | 6,65 | |
| L-tsüsteiin HCl H₂O | 17,56 | |
| L-tsüstiin 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutamiinhape | 7,35 | |
| L-glutamiin | 365,00 | |
| L-histidiin HCl H₂O | 31,48 | |
| L-isoleutsiin | 54,47 | |
| L-leutsiin | 59,05 | |
| L-lüsiin HCl | 91,25 | |
| L-metioniin | 17,24 | |
| L-fenüülalaniin | 35,48 | |
| L-proliin | 17,25 | |
| L-seriin | 26,25 | |
| L-treoniin | 53,45 | |
| L-trüptofaan | 9,02 | |
| L-türosiin 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valiin | 52,85 | |
| Vitamiinid | D-biotiin | 0,0035 |
| Koliinkloriid | 8,98 | |
| D-kaltsiumpantotenaat | 2,24 | |
| Foolhape | 2,66 | |
| Müo-inositool | 12,60 | |
| Nikotiinamiid | 2,02 | |
| Püridoksiin-HCl | 0,031 | |
| Püridoksaal-HCl | 2,00 | |
| Riboflaviin | 0,219 | |
| Tiamiin HCl | 2,17 | |
| B12-vitamiin | 0,68 | |
| Anorgaanilised soolad | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Muud koostisosad | D-glükoos | 3151,00 |
| Hüpoksantiin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linoolhape | 0,042 | |
| Lipoiinhape | 0,105 | |
| Fenoolpunase naatriumsool | 8,63 | |
| Putreskiin-2-HCl | 0,081 | |
| Na-püruvaat | 55,00 | |
| Tümidiin | 0,365 |