DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 on bioloogilistes uuringutes rakukultuurides laialdaselt tunnustatud ja laialdaselt kasutatav baaskeskkond. See on erinevate imetajate rakuliinide kasvu jaoks oluline toitainete allikas, eriti kui seda täiendatakse loote veise seerumiga (FBS).
See ainulaadne koostis ühendab Dulbecco modifitseeritud Eagle'i keskkonna (DMEM) ja Ham'i F-12 (Ham'i toitainete segu F-12) täpses 1:1 suhtes. L-glutamiini lisamine täiustab selle koostist veelgi.
DMEM, mis on tuletatud Eagle’i minimaalse essentsiaalse keskkonna (EMEM) alusel, pakub võrreldes oma eelkäijaga suuremat aminohapete ja vitamiinide kontsentratsiooni. Seevastu Ham’i F-12 põhineb Ham’i F-10 keskkonnal, pakkudes täiendavat komplekti olulisi komponente.
Optimaalse rakkude kasvu toetamiseks on tavaline lisada DMEM:Hami F-12-le FBS-i, mille tüüpiline kontsentratsioon on 5–10%. See lisand on vajalik, kuna keskkonnas puuduvad rakkude arenguks olulised kasvuhormoonid, lipiidid ja valgud.
DMEM:Ham's F12 sisaldab pH-puhversüsteemi ja seda täiendatakse sageli pH-indikaatoriga fenoolpunasega. DMEM:Ham's F12-s või mis tahes bikarbonaatpuhversüsteemi kasutavas keskkonnas kasvatatavad rakud vajavad sobiva pH-taseme säilitamiseks kontrollitud 5–10% CO₂-keskkonda.
Kvaliteedikontroll
- Steriilselt filtreeritud
Säilitamine ja kõlblikkusaeg
- Säilitada temperatuuril +2 °C kuni +8 °C, valguse eest kaitstult.
- Pärast avamist hoida temperatuuril 4 °C ja kasutada 6–8 nädala jooksul.
Transporditingimused
- Ümbritseva õhu temperatuur
Hooldus
- Hoida külmikus temperatuuril +2 °C kuni +8 °C pimedas kohas. Vältida külmutamist ja sagedast soojendamist temperatuurini +37 °C, kuna see halvendab toote kvaliteeti.
- Ärge kuumutage keskkonda üle 37 °C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid, nagu mikrolaineahjud.
- Kui kasutatakse vaid osa kasvukeskkonnast, võtke välja vajalik kogus ja soojendage see enne kasutamist toatemperatuurini.
Koostis
| Kategooria | Komponendid | Kontsentratsioon (mg/l) |
| Aminohapped | Glütsiin | 18,75 |
| L-alaniin | 4,45 | |
| L-arginiin HCl | 147,50 | |
| L-asparagiin H₂O | 7,50 | |
| L-asparagiinhape | 6,65 | |
| L-tsüsteiin HCl H₂O | 17,56 | |
| L-tsüstiin 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutamiinhape | 7,35 | |
| L-glutamiin | 365,00 | |
| L-histidiin HCl H₂O | 31,48 | |
| L-isoleutsiin | 54,47 | |
| L-leutsiin | 59,05 | |
| L-lüsiin HCl | 91,25 | |
| L-metioniin | 17,24 | |
| L-fenüülalaniin | 35,48 | |
| L-proliin | 17,25 | |
| L-seriin | 26,25 | |
| L-treoniin | 53,45 | |
| L-trüptofaan | 9,02 | |
| L-türosiin 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valiin | 52,85 | |
| Vitamiinid | D-biotiin | 0,0035 |
| Koliinkloriid | 8,98 | |
| D-kaltsiumpantotenaat | 2,24 | |
| Foolhape | 2,66 | |
| müo-inositool | 12,60 | |
| Nikotinaamid | 2,02 | |
| Püridoksiini HCl | 0,031 | |
| Püridoksaal-HCl | 2,00 | |
| Riboflaviin | 0,219 | |
| Tiamiin HCl | 2,17 | |
| B12-vitamiin | 0,68 | |
| Anorgaanilised soolad | CaCl₂·2H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄·7H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Muud koostisosad | D-glükoos | 3151,00 |
| Hüpoksantiin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linoolhape | 0,042 | |
| Lipoehape | 0,105 | |
| Fenoolpunase naatriumsool | 8,63 | |
| Putreskiin-2-HCl | 0,081 | |
| Na-püruvaat | 55,00 | |
| Tümidiin | 0,365 |