KLE rakud
550,00 €*
Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 6 rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 106 rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).
Üldine teave
| Kirjeldus | KLE rakuliin on valge naissoost patsiendi adenokartsinoomiga endomeetriumist saadud adherentne rakuliin. See rakuliin loodi 64 päeva vanuselt patsiendilt ja sellest on saanud oluline vahend endomeetriumivähi uurimisel. KLE rakud deponeeris GR Richardson ja need on tuntud oma tumorigeensete omaduste poolest, kuna nad moodustavad 21 päeva jooksul 100% sagedusega kasvajaid, kui neid süstitakse subkutaanselt alasti hiirtele. Need kasvajad ei moodusta näärmeid, kuid neil on mikrovillid, ühenduskompleksid ja tuumakanalite süsteemid, mis on sarnased normaalses endomeetriumis esinevate süsteemidega progestageense stimulatsiooni korral. KLE rakud ekspresseerivad veregruppi O ja on Rh-positiivsed, mis võib olla oluline antigeeni ekspressiooniga seotud spetsiifilistes uuringutes. Seda rakuliini kasutatakse tavaliselt endomeetriumi kartsinoomi patofüsioloogia uurimiseks, kusjuures erilist huvi pakub selle östrogeeniretseptor-negatiivne ja progesterooniretseptor-positiivne staatus. See retseptoriprofiil muudab KLE rakud väga sobivaks progesterooni rolli uurimiseks endomeetriumi vähi progresseerumisel. KLE rakkudest saadud kasvajate elektronmikroskoopilised uuringud on andnud üksikasjaliku ülevaate raku ultrastruktuurist, mis muudab selle rakuliini oluliseks ressursiks endomeetriumi adenokartsinoomi morfoloogiliste aspektide mõistmiseks. |
|---|---|
| Organism | Inimene |
| Kude | Emakas, emakas, endomeetrium |
| Haigus | Endomeetriumi adenokartsinoom |
Omadused
| Vanus | 64 aastat |
|---|---|
| Sugu | Naised |
| Etniline kuuluvus | Euroopa |
| Morfoloogia | Epiteel |
| Kasvuomadused | Kinnipeetav |
Regulatiivsed andmed
| Tsitaat | KLE (Cytioni katalooginumber 305051) |
|---|---|
| Bioturvalisuse tase | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1329 |
Biomolekulaarsed andmed
| Antigeeni ekspressioon | Veregrupp O, Rh+ |
|---|---|
| Tumorigeeniline | Jah, kasvajad tekkisid 21 päeva jooksul 100% sagedusega (5/5) alasti hiirtel, kellele süstiti naha alla 1×107 rakku. |
Töötlemine
| Kultuurikeskkond | DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a) |
|---|---|
| Täiendused | Täiendada söötme 10% FBS-ga |
| Dissotsiatsioonireaktiiv | Accutase |
| Aja kahekordistamine | 114 tundi |
| Subkultuuride kasvatamine | Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda. |
| Vedeliku uuendamine | 2 korda nädalas |
| Külmutage keskkond | Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi. |
| Rakkude sulatamine ja kultiveerimine |
|
| Inkubatsiooni atmosfäär | 37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär. |
| Kolvi katmine | Optimaalse kinnitumise ja elujõulisuse tagamiseks pärast sulatamist soovitame kasutada kollageeniga kaetud koldeid või plaate. |
| Külmutamise protseduur | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Veotingimused | Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi. |
| Ladustamistingimused | Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist. |
Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA
| Steriilsus | Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt. |
|---|
Materjali üleandmise leping
Kui kavatsete Cytioni rakuliine kasutada ainult ühe uurimisasutuse sisemisteks uuringuteks, täitke ja allkirjastage meie materjalide üleandmise leping (MTA) ning saatke see koos tellimusega.
Kõigi kommertsrakenduste puhul – sealhulgas, kuid mitte ainult tasuliste teenuste osutamine, kvaliteedikontrolli testid, toote turuleviimine, diagnostiline kasutamine või regulatiivsed uuringud – täitke palun kavandatud kasutusvorm, et saaksime koostada teie projektile sobiva lepingu.
Pange tähele: MTA kehtib ainult teatud rakuliinide puhul. Kui see teade ja MTA dokument on toote lehel, kehtib leping. Rakuliinide puhul, mis ei ole MTAga hõlmatud, ei näidata viidet lepingule. MTA ei kehti Ameerika, Hiina ega Taiwani klientide puhul. Palun võtke ühendust meie Ameerika Ühendriikide üksusega, et saada sobiv leping.