HROG17 T1 M1 rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300875

Ohutuskaart

Toote leht

Analüüsisertifikaat (CoA)

Kolmanda osapoole leping

Kirjeldus	HROG17 T1 M1 on primaarne inimese glioblastoma multiforme (GBM) rakuliin, mis on loodud WHO IV astme glioblastoma diagnoosiga täiskasvanud patsiendilt eemaldatud kasvajaproovist. Tähis „T1” näitab, et proov võeti esimese operatsiooni ajal, „M1” tähistab aga sellest kasvajast saadud vastavat in vitro mudelit. Rakuliin loodi HROG (Hansestadt Rostock Glioma) platvormil, mis keskendub patsiendispetsiifilisi molekulaarseid ja fenotüüpilisi omadusi säilitavate ultra-madala passaažiga glioomikultuuride loomisele. HROG17 T1 M1 kasvab standardse kultuuri tingimustes adhesiivselt ja näitab fibroblastide morfoloogiat, mis on tüüpiline primaarse GBM kultuuride puhul. HROG-st saadud liinide immunofenotüübiline iseloomustus näitab gliaalsete ja närvirakkude liiniga seotud markerite, nagu gliaalne fibrillaarne happeline valk (GFAP), nestin ja vimentiin, ekspressiooni, mis on kooskõlas kõrge astme astrotsütaarse kasvaja päritoluga. HROG-kogu molekulaarne profiilimine hõlmab kliiniliselt oluliste parameetrite hindamist, nagu MGMT-promootori metülatsioon, EGFR amplifikatsiooni staatus ja võtmegeenide, sealhulgas TP53, IDH1/2, KRAS ja BRAF mutatsioonianalüüs, mis toetab kasvajaspetsiifiliste genoomimuutuste säilitamist kultuuris. HROG17 T1 M1 on kasutatud glioblastoomi standardravi ravimite, sealhulgas alküülivate kemoteraapiate ja täiendavate sihtravimite tundlikkuse hindamiseks. HROG-mudelite võrdlev analüüs näitab, et madala passaažiga kultuurid säilitavad varajastes passaažides stabiilse morfoloogia, kasvukineetika ja ravimireaktsiooni profiilid. Patsiendilt saadud madala passaažiga glioblastoomi mudelina pakub HROG17 T1 M1 kliiniliselt olulist in vitro platvormi kõrge astme glioomi kasvajabioloogia, ravivastuse ja kasvajatevahelise heterogeensuse uurimiseks.
Organism	Inimene
Kude	Aju
Haigus	Glioblastoom

Vanus	70 aastat
Sugu	Mees
Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	HROG17 T1 M1 (Cytioni katalooginumber 300875)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_B7FQ

Kultuurikeskkond	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Täiendused	Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv	TrypLE Express, 37°C, 10 min,
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külmutage keskkond	Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
HLA alleles	A: '11:01:01, '66:01:01 B: '14:02:01, '40:02:01 C: '01:02:01, '08:02:01 DRB1: '01:02:01, '12:01:01 DQA1: '01:01:02, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '05:01:01 DPA1: 0,04375, 0,084027778 DPB1: '04:01:01, '11:01:01 E: '01:01, '01:03

Partii number	Sertifikaadi tüüp	Kuupäev	Kataloogi number
300875-041224	Analüüsitunnistus	23. May. 2025	300875

Pange tähele, et see rakuliin ei ole saadaval Cytioni standardse MTA raames, kuna selleks on vaja kolmanda osapoole lepingut ja/või selle üle tuleb pidada läbirääkimisi algse litsentsiandjaga.

HROG17 T1 M1 rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Analüüsisertifikaat (CoA)

Kolmanda osapoole leping