HROG06 T0 M2 rakud

800,00 €*

Tooted saadetakse külmutatuna kuivjääs krüotubides. Iga krüotub sisaldab tavaliselt 3 × 10 ⁶ rakku adhesiivsetele liinidele või 5 × 10⁶ rakku suspensiooniliinidele (üksikasjad on esitatud partii CoA-s).

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300883

Ohutuskaart

Toote leht

Kolmanda osapoole leping

Kirjeldus	HROG06 T0 M2 on primaarne inimese glioblastoma multiforme (GBM) rakuliin, mis on loodud WHO IV astme glioblastomaga diagnoositud täiskasvanud patsiendi värskelt eemaldatud kasvajakoest. Tähis „T0” näitab, et kasvajaproov võeti esialgse kirurgilise sekkumise käigus, samas kui „M2” viitab teisele iseseisvalt loodud in vitro mudelile, mis on saadud samast esmasest kasvajast. Rakuliin arendati HROG (Hansestadt Rostock Glioma) platvormi raames, mis keskendub ultra-madala passaažiga glioomikultuuride loomisele, mis säilitavad patsiendi algse kasvaja bioloogilised ja molekulaarsed omadused. HROG06 T0 M2 kasvab standardiseeritud kultiveerimistingimustes adhesiivselt ja näitab esmasele GBM-kultuurile tüüpilist spindlikujulist, fibroblastidele sarnast morfoloogiat. HROG-seeria immunofenotüübilised analüüsid näitavad närvi- ja gliaalsete markerite, nagu gliaalsete fibrillaarse happelise valgu (GFAP), nestini ja vimentiini ekspressiooni, mis toetab astrotsüütide kasvaja päritolu. HROG platvormi molekulaarne iseloomustus hõlmab kliiniliselt oluliste biomarkkerite hindamist, nagu MGMT promootori metülatsioonistaatus, EGFR amplifikatsioon ja geenide mutatsiooniprofiil, sealhulgas TP53, IDH1/2, KRAS ja BRAF, mis kinnitab kasvajaga seotud genoomiliste muutuste säilimist varajastes kultuurides. HROG06 T0 M2 on kasutatud in vitro hindamiseks ravivastustele glioblastoomi standardravile, sealhulgas alküülivate kemoteraapiavahendite ja sihtinhibiitorite puhul. HROG-kogumiku võrdlevad analüüsid näitavad stabiilset morfoloogiat, reprodutseeritavat kasvukineetikat ja järjepidevaid ravimite tundlikkuse profiile varastes passaažides, mis toetab selle sobivust translatsioonilise uurimismudelina. Patsiendilt saadud madala passaažiga GBM-rakuliinina pakub HROG06 T0 M2 kliiniliselt olulist platvormi glioblastoomi bioloogia, kasvaja heterogeensuse ja ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks.
Organism	Inimene
Kude	Aju
Haigus	Glioblastoom

Etniline kuuluvus	Kaukaasia
Kasvuomadused	Kinnipeetav

Tsitaat	HROG06 T0 M2 (Cytioni katalooginumber 300883)
Bioturvalisuse tase	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_B7FP

Kultuurikeskkond	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Täiendused	Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv	Accutase
Subkultuuride kasvatamine	Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külmutage keskkond	Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Rakkude sulatamine ja kultiveerimine	Veenduge, et viaal jääb tarnimisel sügavkülmutatud, sest rakud transporditakse kuiva jääga, et säilitada optimaalne temperatuur transpordi ajal. Pärast kättesaamist säilitage krüoviaal kas kohe temperatuuril alla -150 °C, et tagada rakkude terviklikkuse säilimine, või jätkake sammuga 3, kui on vaja koheselt kultiveerida. Kohese kultiveerimise korral sulatage viaali kiiresti, kastes selle 37 °C veevanni puhta vee ja antimikroobse ainega, segades seda õrnalt 40-60 sekundit, kuni alles jääb väike jääklomp. Tehke kõik järgmised toimingud steriilsetes tingimustes vooluhoodis, desinfitseerides krüoviaal enne avamist 70% etanooliga. Avage desinfitseeritud viaali ettevaatlikult ja viige rakususpensioon ettevaatlikult segades 15 ml tsentrifuugitorusse, mis sisaldab 8 ml toatemperatuuril olevat kasvukeskkonda. Rakkude eraldamiseks tsentrifuugige segu 300 x g juures 3 minutit ja visake ülejäänud külmutusvedelikku sisaldav supernatant ettevaatlikult ära. Resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult 10 ml värskes kasvukeskkonnas. Adhereeruvate rakkude puhul jagage suspensioon kahe T25 kultuurkolvi vahel; suspensioonikultuuride puhul kandke kogu söötmekeskkond ühte T25 kolbi, et soodustada rakkude tõhusat koostoimet ja kasvu. Järgige kehtestatud subkultuuriprotokolle rakuliini jätkuvaks kasvuks ja säilitamiseks, tagades usaldusväärsed katsetulemused.
Inkubatsiooni atmosfäär	37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.
Kolvi katmine	Puudub
Külmutamise protseduur	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Veotingimused	Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
Ladustamistingimused	Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Steriilsus	Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil. Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pange tähele, et see rakuliin ei ole saadaval Cytioni standardse MTA raames, kuna selleks on vaja kolmanda osapoole lepingut ja/või selle üle tuleb pidada läbirääkimisi algse litsentsiandjaga.

HROG06 T0 M2 rakud

Üldine teave

Omadused

Regulatiivsed andmed

Biomolekulaarsed andmed

Töötlemine

Kvaliteedikontroll / Geneetiline profiil / HLA

Kolmanda osapoole leping