MC3T3-E1 rakud — luubioloogia uurimistööde kuldstandardiks olev osteoblastide eelmudel

Sissejuhatus

MC3T3-E1 rakud, mida tuntakse ka sünonüümide Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1 ja MC 3T3-E1 all (Cellosaurus’e registreerimisnumber CVCL_0409), on üks kaasaegses luubioloogias enim kasutatavaid preosteoblastilisi rakuliine. Need spontaanselt surematuks muutunud rakud, mille Kodama ja kolleegid eraldasid 1981. aastal vastsündinud hiire koljuluust ning mida Sudo jt iseloomustasid täpsemalt 1983. aastal, valiti välja nende kõrge aluselise fosfataasi (ALP) aktiivsuse tõttu konfluentses seisundis. [1] Nende võime läbida selgelt määratletud proliferatsiooni- ja diferentseerumisstaadiumid – moodustades lõpuks in vitro mineraliseerunud luumatriksi – on muutnud need rakud asendamatuks vahendiks osteogeneesi, luu ümberkujundamise ning farmakoloogiliste ainete, biomaterjalide ja geneetiliste häirete mõju uurimisel osteoblastide funktsioonile. Tänapäeval mängivad MC3T3-E1 rakud olulist rolli uurimistöös, mis hõlmab osteoporoosi, implantaaditeadust, koetehnoloogiat ja kosmosebioloogiat.

Peamised järeldused

• MC3T3-E1 on spontaanselt surematuks muudetud hiire preosteoblastide rakuliin, mis on saadud vastsündinud hiire kolju luust.
• Rakud läbivad erinevad proliferatsiooni- ja diferentseerumisstaadiumid, mille tulemusena tekib in vitro mineraliseeritud maatriks.
• Kõrge ALP-aktiivsus ja osteoblastide markerite (RUNX2, OCN, OPN, Col1A1) ekspressioon muudavad need usaldusväärseks osteogeneesi mudeliks.
• Emaliinist on saadud mitmeid tuletatud subkloone, millel on erinev diferentseerumis- ja mineraliseerumisvõime.
• MC3T3-E1-rakke kasutatakse laialdaselt biomaterjalide katsetamisel, ravimite väljatöötamisel, osteoporoosi uurimisel ja luukoe inseneriteaduses.
• Rakuliini identiteeti tuleks rutiinselt kontrollida STR- või SNP-profiilide abil, et vältida valet identifitseerimist ja ristsaastumist. [2]

Mis on MC3T3-E1?

MC3T3-E1 on hiire päritolu klooniline, spontaanselt immortalisatsiooniga preosteoblastide rakuliin, millele on antud Cellosaurus’e registreerimisnumber CVCL_0409. See on saadud soost määratlemata vastsündinud hiire (alla ühe päeva vanune) kolju luukoesest. Doonorloomal ei täheldatud ühtegi haigust. Rakuliin valiti välja selle põhjal, et see näitas konfluentses olekus kõrget ALP-aktiivsust – omadus, mis viitas selle tugevale võimele in vitro osteogeneesiks. Kasvufaasis näitavad MC3T3-E1 rakud fibroblastilist morfoloogiat ja moodustavad mitmekihilisi kultuure. Induktsiooni järel diferentseeruvad need osteoblastideks, toodavad kollageenilist ekstratsellulaarset maatriksit ning tekitavad lõpuks mineraliseerunud sõlmed, mis sisaldavad luumaatriksisse sissekasvanud osteotsüütidele sarnaseid rakke. [1] Tavapärastes kasvatustingimustes on kahekordistumisaeg vahemikus 24–48 tundi.

SNP-maatriksi analüüs kinnitas MC3T3-E1-rakkude päritolu C57BL/6-tüvest ning seda on kasutatud pikaajalise passaažimisega seotud kariotüübiliste muutuste kindlakstegemiseks. [3] See rakuliin ekspresseerib peamisi osteoblastide markereid, sealhulgas RUNX2, luu-sialoproteiini, osteokalsiini ja osteopontiini, eriti mineraliseeruvates subkloonides. [4] Rida tuletatud alakloone — sealhulgas MC3T3-E1 alakloon 14 rakud ja subkloon 4 — eraldati emaliinist ning neil on in vitro ja in vivo erinev diferentseerumis- ja mineraliseerumisvõime.

Teave rakukultuuri kohta

MC3T3-E1 – kõrge konfluentsus

MC3T3-E1 rakkude eelised

MC3T3-E1-rakud pakuvad hästi määratletud ja korratavat mudelit kogu osteoblastide arengujärjekorra kohta. Erinevalt primaarsetest kolju osteoblastidest, mis on heterogeensed ja mida on raske kasvatada, on MC3T3-E1-rakud kloonitud ning neid on võimalik laboratooriumide vahel järjepidevalt paljundada. Nende võime areneda proliferatiivsetest preosteoblastidest maatriksit ladustavateks osteoblastideks ja lõpuks osteotsüütidesse sissekasvanud mineraliseerunud sõlmedeks teeb need rakud eriti sobivaks osteogeneesi ajaliste uuringute läbiviimiseks. Yohay jt teedrajav töö määratles MC3T3-E1-rakkude erinevad proliferatiivsed ja diferentseerunud staadiumid kultuuris, kehtestades need osteoblastide arengu kvantitatiivseks in vitro mudeliks. [5] See uuring näitas, et MC3T3-E1-rakkudes toimub etteaimatav järjekord, mis hõlmab kasvu peatumist, maatriksi küpsemist ja mineraliseerumist – need etapid peegeldavad väga täpselt osteoblastide ontogeneesi in vivo.

Veel üks eelis on hästi iseloomustatud subkloonide kättesaadavus, mis tagab eksperimendi paindlikkuse. Wang jt isoleerisid emaliinist MC3T3-E1 rea subkloone, näidates, et mineraliseerivad subkloonid ekspresseerivad selektiivselt luu-sialoproteiini, osteokalsiini, ja PTH/PTHrP retseptori mRNA-sid, samas kui aluseline fosfataasi ekspressioon ilmnes nii mineraliseeruvates kui ka mitte-mineraliseeruvates subkloonides. [4] See ressurss võimaldab teadlastel valida oma eksperimentaalsetele vajadustele sobivaid, kindla fenotüübiga subkloone. Lisaks reageerivad rakud tugevalt mitmesugustele osteogeensetele stiimulitele – sealhulgas askorbiinhappele, beeta-glütserofosfaadile, BMP-2-le, deksametasoonile ja arvukatele väikestele molekulidele –, mis teeb need ideaalseks farmakoloogilisteks ja mehhanistilisteks uuringuteks.

MC3T3-E1-rakud on ka molekulaarseks manipuleerimiseks väga hästi sobivad. Need taluvad transfektsiooni, viiruslikku transduktsiooni ja CRISPR-põhist geeniredigeerimist ning neis ekspresseeruvad endogeensed signaaliteed (Wnt/β-kateniin, BMP/SMAD, PI3K/AKT), mis on otseselt seotud luu patofüsioloogiaga. Nende hiirepäritolu hõlbustab integreerimist in vivo hiiremudelitega, mis uurivad osteoporoosi ja luumurdude paranemist, tugevdades in vitro saadud tulemuste rakenduslikku väärtust.

MC3T3-E1-rakkude piirangud

Hoolimata nende laialdasest kasutamisest on MC3T3-E1-rakkudega seotud olulised piirangud. Kuna tegemist on spontaanselt surematuks muudetud rakuliiniga, võivad neis pikaajalise passaažimise käigus koguneda kariotüübilised kõrvalekalded. SNP-maatriksi analüüs näitas MC3T3-E1-kultuurides laialt levinud aneuploidiat ning genoomiüleseid muutusi, mis võivad mõjutada diferentseerumiskatsete korratavust suure arvu passaažide korral. [3] Ka algsel emaliinil võib esineda mineraliseerimisvõime spontaanne kadu, nagu näitas Baba, kes isoleeris emapopulatsioonist MC3T3-E1 mineraliseerimata subklooni (MC3T3-NM4) – see avastus rõhutab vajadust diferentseerumisvõime hoolika jälgimise järele kultuuri edasikandmiste käigus. [6]

Kaubanduslikult kättesaadavate MC3T3-E1 subkloonide muutuv osteogeenne aktiivsus on veel üks eksperimentaalse varieeruvuse allikas. Uuringud on näidanud, et erinevad subkloonid (nt subkloon 4 võrreldes subklooniga 14) ilmutavad märkimisväärselt erinevat mineraliseerumise kineetikat ja markergeenide ekspressiooniprofiile, mistõttu tuleb erinevaid subkloone kasutavate laborite tulemuste otsest võrdlemist teha ettevaatusega. Ka kasvukeskkonna koostis mõjutab oluliselt osteogeenseid tulemusi: uuringutes, milles hinnati MC3T3-E1-rakke erinevates kasvukeskkondades, täheldati märkimisväärseid erinevusi ALP-aktiivsuses, kollageeni ladestumises ja kaltsifitseerumises – see rõhutab kasvukeskkonna standardimise tähtsust eksperimendi kavandamisel.

Lõpuks tuleb märkida, et MC3T3-E1 rakud on hiire päritolu, mis piirab nende otsest rakenduslikku asjakohasust inimese osteoblastide reaktsioonide ennustamisel. Liigispetsiifilised erinevused retseptorite farmakoloogias, tsütokiinide signaalimises ja geeniregulatsioonis tähendavad, et tulemused tuleks enne kliinilist ekstrapoleerimist valideerida inimese osteoblastide süsteemides. Enne katsete alustamist soovitatakse tungivalt teostada rakuliinide rutiinset autentsustõendamist STR-profiilide või järgmise põlvkonna sekveneerimisel põhinevate meetoditega, et välistada ristsaastumine. [2]

Rakendused

Osteoblastide diferentseerumise ja osteogeneesi modelleerimine

MC3T3-E1-rakkude kõige olulisem rakendus on osteoblastide diferentseerumise kvantitatiivne mudel. Yohay jt läbimurdeline uuring iseloomustas hiire MC3T3-E1 rakkude erinevaid proliferatiivseid ja diferentseerunud staadiumeid kultuuris, pakkudes ajalist raamistikku selle mõistmiseks, kuidas need preosteoblastid läbivad kasvu-, maatriksi küpsemise ja mineraliseerumise faase. [5] Selles töös määratleti rakuliin sobivaks osteogeneesi in vitro mudeliks ning kehtestati eksperimentaalsed võrdlusalused – nagu ALP-aktiivsus, kollageenimatriksi ladestumine ja sõlmede mineraliseerumine –, mida kasutatakse standardina tänapäevani. Nende arenguetappide selgus on teinud MC3T3-E1-st võrdlusstandardi, mille alusel hinnatakse uusi osteogeenseid protokolle ja diferentseerumiskeskkondi.

Signaaliteede uuringutes on MC3T3-E1 rakke kasutatud osteogeneesi molekulaarse mehhanismi analüüsimiseks. Wang jt näitasid, et apelin-13 aktiveerib oma retseptori APJ kaudu BMP4/SMAD1/5/8 signaaliteed, reguleerides ülespoole osteogeenseid markereid ALP, osteokalsiini, osteopontiini ja Col1A1 ning suurendades RUNX2 ekspressiooni nii mRNA kui ka valgu tasandil MC3T3-E1 rakkudes. [7] Uuritud on ka diferentseerumise mikroRNA-reguleerimist: Zhai jt näitasid, et miR-211-5p/FOXO3 telg soodustab MC3T3-E1-rakkude ja BMSC-de osteogeenset diferentseerumist, aktiveerides Wnt/β-kateniini signaaliteed, millel on tähtsus osteoporootiliste luumurdude paranemisel. [8] MC3T3-E1-rakkudel läbi viidud vedeliku nihkepinge uuringud näitasid lisaks, et AnnexinA6-vahendatud autofaagia reguleerib mehaaniliselt indutseeritud osteogeenset diferentseerumist, mis on oluline avastus koormust kandvate luude füsioloogia mõistmisel. [9]

MC3T3-E1-rakke on kasutatud kolmemõõtmeliste sfääride moodustamiseks, mis kajastavad paremini osteoblastide in vivo mikrokeskkonda. Wen jt. genereerisid spontaanseid MC3T3-E1 sfääre, kasutades madala adhesiooniga kultiveerimissüsteemi, ning näitasid, et võrreldes ühekihiliste kultuuridega oli ALP-aktiivsus ja osteogeenne geeniekspressioon märkimisväärselt kõrgem. [10] Need sfäärid soodustasid alveolaarse luu regenereerumist ja pärssisid põletikku hiire hammaste autotransplantatsiooni mudelis, rõhutades kolmemõõtmeliste MC3T3-E1 kultuurisüsteemide väärtust koetehnoloogia rakendustes.

Osteoporoosi uurimine ja ravimite väljatöötamine

MC3T3-E1 rakud on peamine in vitro platvorm osteoporoosi ravimikandidaatide hindamiseks. Näidati, et looduslikult esinev flavonoid kvertsetiin leevendas osteoporoosiga rottidel osteoblastide düsfunktsiooni, reguleerides ferroptootsi Nrf2/SLC7A11/GPX4 signaalitee kaudu; in vitro valideerimine MC3T3-E1 rakkude abil kinnitas selle signaalitee rolli osteoblastide ellujäämises ja funktsioneerimises. [11] Samamoodi soodustas pilose sarve valgu ekstrakt (PAE) MC3T3-E1-rakkude eluvõimelisust, proliferatsiooni ja osteogeenset diferentseerumist, aktiveerides samal ajal Wnt/β-kateniini signaaliteed, mis peegeldas selle soodsat mõju trabekulaarsele mikroarhitektuurile munasarjade eemaldatud rottidel. [12]

Traditsioonilistest ravimtaimedest saadud polüsahhariide on samuti hinnatud MC3T3-E1 rakkude abil laiemas osteoporoosivastase uurimistöö in vitro osana. Yang jt iseloomustasid kahte Psoralea corylifolia polüsahhariidi ja näitasid nende võimet stimuleerida osteogeenset aktiivsust MC3T3-E1 rakkudes, täiendades in vivo tulemusi, mis näitasid luu mineraaltiheduse paranemist glükokortikoidide poolt indutseeritud osteoporoosiga hiirtel. [13] Näidati, et kurkumiini nanokübemed koos narlumosbartiga suurendavad sünergistlikult osteoblastide diferentseerumist MC3T3-E1 rakkudes Wnt/β-kateniini signaalitee kaudu, pakkudes kombinatoorset nanokübemete strateegiat luutrauma taastamiseks. [14]

Osteomüeliiti, rasket luuinfektsiooni, on uuritud, kasutades stafülokokkide valgu A-ga (SPA) töödeldud MC3T3-E1 rakke in vitro infektsioonimudelina. Chen jt kasutasid Mendeli randomiseerimist koos nende in vitro katsetega, et näidata, et vereringes olev metaboliit p-kresoolsulfaat pärsib MC3T3-E1-rakkude proliferatsiooni ja osteogeenset diferentseerumist, pakkudes uusi mehhanistlikke teadmisi osteomüeliidi patogeneesi metaboolsetest teguritest. [15] MC3T3-E1-rakkudes on uuritud ka ferroptose pärssimist ferrostatiin-1 abil, mille tulemused viitavad sellele, et ferroptotilise rakusurma pärssimine suurendab osteoblastide eluvõimet ja luu moodustavat aktiivsust.

Biomaterjalid, implantaaditeadus ja luukoe inseneriteadus

MC3T3-E1-rakud on uute biomaterjalide bioloogilise sobivuse ja osteoinduktiivse potentsiaali hindamise etalon. Liu jt arendasid välja terbiumiga legeeritud 3D-prinditud karbonaathüdroksüapatiidi (Tb-CHA) raamistikku ning näitasid MC3T3-E1 rakkude abil, et materjal suurendas märkimisväärselt rakkude proliferatsiooni ja diferentseerumist in vitro; sellele järgnenud in vivo valideerimine rottide koljuluu defekti mudelis kinnitas selle osteogeenseid ja angiogeenseid võimeid. [16] Võime seostada MC3T3-E1 rakkude in vitro reaktsioone in vivo luuregeneratsiooni tulemustega muudab selle rakuliini eriti väärtuslikuks luuasendajate iteratiivsel disainimisel.

Titaanimplantaadi pinna modifitseerimisel on osseointegratsiooni potentsiaali kvantifitseerimiseks laialdaselt kasutatud MC3T3-E1 rakke. Liao ja Li valmistasid titaani pinnale komposiitkatte, mis sisaldas epigallokatehiin-3-gallaati (EGCG), hüdroksüapatiidist (HAP) ja hõbedananoosakestest (AgNPs) ning näitasid, et see EGCG/HAP/AgNPs-kate parandas üheaegselt antibakteriaalset toimet ja soodustas MC3T3-E1 rakkude adhesiiooni, proliferatsiooni ja osteogeenset diferentseerumist. [17] Need tulemused illustreerivad, kuidas MC3T3-E1-rakud aitavad optimeerida implantaatide katteid, mis peavad tasakaalustama antimikroobset tõhusust ja vastuvõtva raku ühilduvust.

Tsinkoksiidi nanokübemed (ZnO-NPs) moodustavad teise biomeditsiiniliste materjalide klassi, mida on hinnatud MC3T3-E1-rakkudes. Ryu jt hindasid süstemaatiliselt ZnO-NP ekstraktide kontsentratsioonist sõltuvaid mõjusid tsütokompatibiliteedile ja osteogeensele aktiivsusele, leides, et madalad kontsentratsioonid soodustasid osteoblastilisi reaktsioone, samas kui kõrgemad kontsentratsioonid olid tsütotoksilised. [18] See annusest sõltuv iseloomustus rõhutab standardiseeritud MC3T3-E1 analüüside kasutamise tähtsust nanomaterjalidel põhinevate luu taastamisstrateegiate ohutuse ja tõhususe vahemike kindlaksmääramisel. Samamoodi on hinnatud külma atmosfäärilise plasma (CAP) tehnoloogia võimet stimuleerida MC3T3-E1 osteogeenset diferentseerumist ajast sõltuvalt, avades potentsiaalseid rakendusi alveolaarse luu regenereerimisel. [19]

Mikrogravitatsioon ja mehaaniline bioloogia

MC3T3-E1-rakud on andnud olulisi teadmisi selle kohta, kuidas mehaaniline ja gravitatsiooniline koormuse vähenemine mõjutab osteoblastide bioloogiat. Hughes-Fulford ja Lewis viisid MC3T3-E1 osteoblastid kosmosesse STS-56 kosmosesüstiku missiooni raames ja näitasid, et mikrogravitatsioonis aktiveeritud rakkudel oli normaalse seerumistimulatsiooni juures häiritud kasv, muudetud tsütoskeleti korraldus ja vähenenud prostaglandiinide süntees võrreldes maapealsete kontrollrühmadega. [20] Need leiud andsid rakulise mehhanistliku aluse astronautidel pikaajalise kosmoselennu ajal esinevale hästi dokumenteeritud luu mineraaltiheduse vähenemisele.

Hughes-Fulfordi järgnevad uuringud laiendasid neid tähelepanekuid geeniekspressioonile ja signaaliülekandele, näidates, et mikrogravitatsioon muudab MC3T3-E1 osteoblastide transkriptsiooniprogrammi viisil, mis aitab selgitada luu moodustumise vähenemist gravitatsioonikoormuse puudumisel. [21] Kokkuvõttes kinnitasid need kosmosebioloogia uuringud MC3T3-E1 rakke peamise in vitro mudelina, mille abil uurida mikrogravitatsiooni rakulisi tagajärgi skelettile, millel on otsene tähtsus luukadu vastaste meetmete väljatöötamisel kosmosemeditsiinis.

Maal on mehaanilise bioloogia uuringutes kasutatud MC3T3-E1 süsteemi, et mõista, kuidas vedeliku nihkepinge – mis on luu lakuno-kanalikulaarsete võrgustike interstitiaalse voolu asendusnäitaja – reguleerib osteoblastide diferentseerumist. Uuringud näitasid, et AnnexinA6 poolt vahendatud autofaagia seob mehaanilise stimuleerimise osteogeense geeniekspressiooniga MC3T3-E1 rakkudes, pakkudes molekulaarset teavet selle kohta, kuidas luurakkud tajuvad füüsilist koormust ja sellele reageerivad. [9] Need mehaanilise bioloogia rakendused asetavad MC3T3-E1 rakud biofüüsika ja regeneratiivse meditsiini piirialale.

Parodontaalse ja alveolaarse luu regeneratsioon

Parodontiidiga seotud luukadu on suur kliiniline väljakutse ning MC3T3-E1-rakud on muutunud oluliseks in vitro vahendiks parodontaalse regeneratsiooni strateegiate testimisel. Kong jt arendasid välja aspiriinist ja alendronaatnaatriumist saadud multifunktsionaalse süsinikpunktide nanomaterjali (ASA-ALN-CDs), mis näitas tugevat antibiofilmi toimet parodontaalsete patogeenide vastu ja soodustas MC3T3-E1 osteogeenset diferentseerumist põletikulistes tingimustes. [22] Rottide periodontiidi mudelis vähendas materjal alveolaarse luu kadu ja põletikku, pärssides HIF-1α signaaliteed, kusjuures MC3T3-E1 in vitro andmed pakkusid otsest mehhanistlikku toetust täheldatud in vivo mõjudele.

Külma atmosfäärilise plasma uuringud keskendusid spetsiifiliselt alveolaarse luu regenereerimisele, eksponeerides MC3T3-E1 rakke spetsiaalselt valmistatud heelium-CAP allikale. Negrescu jt näitasid, et CAP-ravi mõjutas rakkude ellujäämist ja osteogeenset diferentseerumist ajast sõltuvalt, mida hinnati elus/surnud testide, CCK-8 eluvõimelisuse testide, ALP aktiivsuse mõõtmiste ja morfoloogilise iseloomustamise abil. [19] Need tulemused tõstsid CAPi kandidaadiks füüsilise lisaravina alveolaarsete luudefektide puhul, kusjuures MC3T3-E1 rakud pakuvad kvantitatiivseid diferentseerumise näitajaid, mis on vajalikud raviparameetrite optimeerimiseks.

MC3T3-E1-rakkudega välja töötatud kolmemõõtmeline sfääride kultiveerimise meetod on otseselt seotud hambaravi regeneratiivse meditsiiniga. Wen jt poolt hamba autotransplantatsiooni mudelis hinnatud sfääride-kollageeni kandja süsteem saavutas ülemäärase alveolaarse luu regenereerumise ja põletikuvastase geeniekspressiooni võrreldes ühekihiliste rakkude kontrollrühmadega, mis viitab sellele, et MC3T3-E1 sfääride tõhustatud parakriinne aktiivsus võib tähendada kliiniliselt olulist kasu hambapesa paranemisel. [10]

Järeldus

MC3T3-E1-rakud on endiselt asendamatu ja laialdaselt valideeritud mudel luubioloogia uuringutes. Alates nende esialgsest iseloomustamisest kui in vitro mineraliseerumisvõimelist kloonilist preosteoblastide liini kuni nende praeguse rakendamiseni tipptasemel valdkondades, sealhulgas 3D-bioprintimises, nanotükkidel põhinevas ravimite manustamises, parodontaalse koe regenereerimises ja kosmosemeditsiinis, on need rakud näidanud üles erakordset teaduslikku mitmekülgsust. Nende selgelt määratletud diferentseerumisstaadiumid, tugev markerite ekspressioon ja reageerimisvõime laiale valikule osteogeensetele stiimulitele teevad neist etalonrakuliini uute biomaterjalide hindamiseks, osteoporoosi ja osteomüeliidi ravisihte identifitseerimiseks ning luu moodustumist reguleerivate signaaliteede analüüsimiseks. Ükskõik, kas uurite ferroptootsi, mehaanilist bioloogiat või järgmise põlvkonna implantaatide katteid, pakuvad MC3T3-E1 rakud teie teadustööks vajalikku reprodutseeritavat ja bioloogiliselt asjakohast platvormi. Tutvuge täielike spetsifikatsioonidega või tellige MC3T3-E1 rakud otse veebilehelt cytion.com.

Olulisemad publikatsioonid

1. Sudo H, Kodama HA, Amagai Y (1983) In vitro diferentseerumine ja kaltsifikatsioon uues kloonitud osteogeenses rakuliinis, mis on saadud vastsündinud hiire koljuluust. The Journal of Cell Biology. PMID: 6826647
2. Chen YH, Connelly JP, Florian C (2023) Lühikeste tandemkorduste profiilide määramine järgmise põlvkonna sekveneerimise abil rakuliinide autentsuse kontrollimiseks. Disease Models & Mechanisms. PMID: 37712227
3. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) Hiire rakuliinide SNP-maatriksi profiilide koostamine tuvastab nende päritolutüved ning paljastab ristsaastumise ja laialt levinud aneuploidia. BMC Genomics. PMID: 25277546
4. Wang D, Christensen K, Chawla K (1999) MC3T3-E1 preosteoblastide subkloonide isoleerimine ja iseloomustamine, millel on erinev in vitro ja in vivo diferentseerumis-/mineraliseerumispotentsiaal. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 10352097
5. Quarles LD, Yohay DA, Lever LW (1992) Hiire MC3T3-E1 rakkude erinevad proliferatiivsed ja diferentseerunud staadiumid kultuuris: osteoblastide arengu in vitro mudel. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 1414487
6. Baba TT (2000) Mineraalide ladestumise taastamine deksametasooniga MC3T3-E1 rakkudest subkloonitud mittemineraliseeruvate osteoblastiliste rakkude maatriksis. Calcified Tissue International. PMID: 11136541
7. Wang C, Li Z, Yang H (2026) Apelin-13 aktiveerib BMP4/SMAD-signaaliteed APJ kaudu, et tugevdada osteoblastide diferentseerumist ja mineraliseerumist. Tissue & Cell. PMID: 42269418
8. Zhai H, Lin M, Lu C (2026) miR-211-5p/FOXO3 telg kiirendab osteogeenset diferentseerumist ja luumurdude paranemist, vahendades Wnt/β-kateniini signaaliteed. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. PMID: 42219493
9. Pei T, Su G, Yang J (2026) Parandus: Vedeliku nihkepinge reguleerib osteogeenset diferentseerumist AnnexinA6-vahendatud autofaagia kaudu MC3T3-E1-rakkudes. International Journal of Molecular Sciences. PMID: 42196630
10. Wen Z, Li X, Yue L (2026) Spontaanselt moodustunud mesenküümse tüvirakkude sfäärid parandavad alveolaarse luu regenereerumist ja pärsivad põletikku pärast hamba autotransplantatsiooni. Regenerative Therapy. PMID: 42199333
11. Gong J, Ma Y, Huang J (2026) Karvane sarvevalgu ekstrakt leevendab osteoporoosi ja on seotud Wnt/β-kateniini signaalitee aktiveerimisega. Pharmaceuticals (Basel, Šveits). PMID: 42198339
12. He L, Zheng Y, Zeng Z (2026) Kvertsetiini mõju osteoblastide düsfunktsioonile osteoporoosiga rottidel Nrf2/SLC7A11/GPX4 signaalitee vahendatud ferroptose reguleerimise kaudu. Cytotechnology. PMID: 42238059
13. Yang J, Tang Z, Chen C (2026) Kahe Psoralea corylifolia L. polüsahhariidi struktuuriline iseloomustus ning nende in vivo ja in vitro osteoporoosivastane potentsiaal. Carbohydrate Polymers. PMID: 42173575
14. Zhang H, Zhao Y (2026) Kurkumiini nanokübemed koos narlumosbartiga reguleerivad wingless-tüüpi MMTV integratsioonikoha (wnt)/β-kateniini signaaliteed osteoblastilaadsetes rakkudes. Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences. PMID: 42170973
15. Chen X, Mo R, Yang S (2026) Põletikulised tsütokiinid ja ainevahetusradad osteomüeliidis: Mendeli randomiseerimise tulemused ja eksperimentaalne valideerimine. Advances in Clinical and Experimental Medicine. PMID: 42200571
16. Liu P, Shen J, Bian Y (2026) Terbiumiga legeeritud 3D-prinditud karbonaathüdroksüapatiidist raamistik parandab luu regenereerumist. Journal of Translational Medicine. PMID: 42260646
17. Liao J, Li Z (2026) EGCG/HAP/AgNPs komposiitkatte antibakteriaalne ja osteogeenne toime titaani pinnal. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. PMID: 42216990
18. Ryu JH, Mangal U, Kim JH (2026) Tsinkoksiidi nanokübemete annusest sõltuvad mõjud preosteoblastide rakulise reaktsiooni suhtes. Scientific Reports. PMID: 42303653
19. Negrescu AM, Zampieri L, Martines E (2026) MC3T3-E1 preosteoblastide ajast sõltuv modulatsioon heeliumi külmplasma abil: eeluuring selle potentsiaalse tähtsuse kohta alveolaarse luu regenereerimisel. Biomedical Physics & Engineering Express. PMID: 42208566
20. Kong J, Li H, Guo X (2026) ASA-ALN-CD-de terapeutiline efektiivsus parodontiidi ravis: antibiofilmist ja põletikuvastasest toimest alveolaarse luu regenereerimiseni. ACS Biomaterials Science & Engineering. PMID: 42213513
21. Hughes-Fulford M, Lewis ML (1996) Mikrogravitatsiooni mõju osteoblastide kasvu aktiveerimisele. Experimental Cell Research. PMID: 8612673
22. Hughes-Fulford M (2001) Muutused geeniekspressioonis ja signaaliülekandes mikrogravitatsioonis. Journal of Gravitational Physiology. PMID: 12638602