MC3T3-E1-rakud — luubioloogia uurimistööde kuldstandardiks olev osteoblastide eellaste mudel

Sissejuhatus

MC3T3-E1 rakud, mida tuntakse ka sünonüümide Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1 ja MC 3T3-E1 all (Cellosaurus’e registreerimisnumber CVCL_0409), on üks kaasaegses luubioloogias enim kasutatavaid preosteoblastilisi rakuliine. Need spontaanselt surematuks muutunud rakud, mille Kodama ja kolleegid eraldasid 1981. aastal vastsündinud hiire kolju luust ning mida Sudo jt iseloomustasid täpsemalt 1983. aastal, valiti välja nende kõrge aluselise fosfataasi (ALP) aktiivsuse tõttu konfluentses seisundis. [1] Nende võime läbida selgelt määratletud proliferatsiooni- ja diferentseerumisstaadiumid – moodustades lõpuks in vitro mineraliseerunud luumatriksi – on muutnud need rakud asendamatuks vahendiks osteogeneesi, luu ümberkujundamise ning farmakoloogiliste ainete, biomaterjalide ja geneetiliste häirete mõju uurimisel osteoblastide funktsioonile. Tänapäeval mängivad MC3T3-E1 rakud olulist rolli uurimistöös, mis hõlmab osteoporoosi, implantaaditeadust, koetehnoloogiat ja kosmosebioloogiat.

Peamised järeldused

• MC3T3-E1 on spontaanselt surematuks muudetud hiire preosteoblastide rakuliin, mis on saadud vastsündinud hiire koljuluust.
• Rakud läbivad erinevad proliferatsiooni- ja diferentseerumisstaadiumid, mille tulemusena tekib in vitro mineraliseerunud maatriks.
• Kõrge ALP-aktiivsus ja osteoblastide markerite (RUNX2, OCN, OPN, Col1A1) ekspressioon muudavad need usaldusväärseks osteogeneesi mudeliks.
• Emaliinist on saadud mitu tuletatud subklooni, millel on erinev diferentseerumis- ja mineraliseerumisvõime.
• MC3T3-E1-rakke kasutatakse laialdaselt biomaterjalide katsetamisel, ravimite väljatöötamisel, osteoporoosi uurimisel ja luukoe inseneriteaduses.
• Rakuliini identiteeti tuleks rutiinselt kontrollida STR- või SNP-profiilide abil, et vältida valet identifitseerimist ja ristsaastumist. [2]

Mis on MC3T3-E1?

MC3T3-E1 on hiire päritolu klooniline, spontaanselt surematuks muudetud preosteoblastide rakuliin, millele on antud Cellosaurus-registrinumber CVCL_0409. See on saadud soost määratlemata vastsündinud hiire (alla ühe päeva vanune) kolju luukoesest. Doonorloomaga ei olnud seotud ühtegi haigust. Rakuliin valiti välja selle põhjal, et see näitas konfluentses olekus kõrget ALP-aktiivsust – omadus, mis ennustas selle tugevat võimet in vitro osteogeneesiks. Kasvufaasis näitavad MC3T3-E1 rakud fibroblastilist morfoloogiat ja moodustavad mitmekihilisi kultuure. Induktsiooni järel diferentseeruvad need osteoblastideks, toodavad kollageenilist ekstratsellulaarset maatriksit ning tekitavad lõpuks mineraliseerunud sõlmed, mis sisaldavad luumaatriksisse sissekasvanud osteotsüütidele sarnaseid rakke. [1] Tavapärastes kasvatustingimustes on kahekordistumisaeg vahemikus 24–48 tundi.

SNP-maatriksi analüüs kinnitas MC3T3-E1-rakkude päritolu C57BL/6-tüvest ning seda on kasutatud pikaajalise passaažimisega seotud kariotüübiliste muutuste kindlakstegemiseks. [3] See rakuliin ekspresseerib peamisi osteoblastide markereid, sealhulgas RUNX2, luu-sialoproteiini, osteokalsiini ja osteopontiini, eriti mineraliseeruvates subkloonides. [4] Rida tuletatud subkloone — sealhulgas MC3T3-E1 alakloon 14 rakud ja subkloon 4 — eraldati emaliinist ning neil on in vitro ja in vivo erinev diferentseerumis- ja mineraliseerumisvõime.

Teave rakukultuuri kohta

MC3T3-E1 – kõrge konfluentsus

MC3T3-E1 rakkude eelised

MC3T3-E1-rakud pakuvad hästi määratletud ja korratavat mudelit kogu osteoblastide arengujärjekorra kohta. Erinevalt primaarsetest kolju osteoblastidest, mis on heterogeensed ja mida on raske kasvatada, on MC3T3-E1-rakud kloonitud ning neid on võimalik laboratooriumide vahel järjepidevalt paljundada. Nende võime areneda paljunevatest preosteoblastidest maatriksit ladustavateks osteoblastideks ja lõpuks osteotsüütidesse sissekasvanud mineraliseerunud sõlmedeks teeb need rakud eriti sobivaks osteogeneesi ajaliste uuringute läbiviimiseks. Yohay jt teedrajav töö määratles MC3T3-E1-rakkude erinevad proliferatiivsed ja diferentseerunud staadiumid kultuuris, kinnitades neid osteoblastide arengu kvantitatiivse in vitro mudelina. [5] See uuring näitas, et MC3T3-E1-rakkudes toimub etteaimatav järjekord, mis hõlmab kasvu peatumist, maatriksi küpsemist ja mineraliseerumist – need etapid peegeldavad täpselt osteoblastide ontogeneesi in vivo.

Veel üheks eeliseks on hästi iseloomustatud subkloonide kättesaadavus, mis tagab eksperimendi paindlikkuse. Wang jt isoleerisid emaliinist MC3T3-E1 rea subkloone, näidates, et mineraliseerivad subkloonid ekspresseerivad selektiivselt luu-sialoproteiini, osteokalsiini, ja PTH/PTHrP retseptori mRNA-sid, samas kui aluseline fosfataasi ekspressioon ilmnes nii mineraliseeruvates kui ka mitte-mineraliseeruvates subkloonides. [4] See ressurss võimaldab teadlastel valida oma eksperimentaalsetele vajadustele sobivaid, kindla fenotüübiga subkloone. Lisaks reageerivad rakud tugevalt mitmesugustele osteogeensetele stiimulitele – sealhulgas askorbiinhappele, beeta-glütserofosfaadile, BMP-2-le, deksametasoonile ja arvukatele väikestele molekulidele –, mistõttu sobivad need ideaalselt farmakoloogilisteks ja mehhanistilisteks uuringuteks.

MC3T3-E1 rakud on ka molekulaarseks manipuleerimiseks väga hästi sobivad. Need taluvad transfektsiooni, viiruslikku transduktsiooni ja CRISPR-põhist geeniredigeerimist ning neis ekspresseeruvad endogeensed signaaliteed (Wnt/β-kateniin, BMP/SMAD, PI3K/AKT), mis on otseselt seotud luu patofüsioloogiaga. Nende hiirepäritolu hõlbustab integreerimist in vivo hiiremudelitega, mis uurivad osteoporoosi ja luumurdude paranemist, tugevdades in vitro saadud tulemuste rakenduslikku väärtust.

MC3T3-E1-rakkude piirangud

Hoolimata nende laialdasest kasutamisest on MC3T3-E1 rakkudel olulised piirangud. Kuna tegemist on spontaanselt surematuks muudetud rakuliiniga, võivad neis pikaajalise passaažimise käigus koguneda kariotüübilised kõrvalekalded. SNP-maatriksi analüüs näitas MC3T3-E1 kultuurides laialt levinud aneuploidiat ning genoomiüleseid muutusi, mis võivad mõjutada diferentseerumiskatsete korratavust suure arvu passaažide korral. [3] Ka algsel emaliinil võib esineda mineraliseerimisvõime spontaanne kadu, nagu näitas Baba, kes isoleeris emapopulatsioonist MC3T3-E1 mineraliseerimata subklooni (MC3T3-NM4) – see avastus rõhutab vajadust diferentseerumisvõime hoolika jälgimise järele kultuuri edasikandmiste käigus. [6]

Kaubanduslikult kättesaadavate MC3T3-E1 subkloonide muutuv osteogeenne aktiivsus on veel üks eksperimentaalse varieeruvuse allikas. Uuringud on näidanud, et erinevad subkloonid (nt subkloon 4 võrreldes subklooniga 14) näitavad märkimisväärselt erinevat mineraliseerumise kineetikat ja markergeenide ekspressiooniprofiile, mistõttu tuleb erinevaid subkloone kasutavate laborite tulemuste otsest võrdlemist teha ettevaatusega. Ka kasvukeskkonna koostis mõjutab oluliselt osteogeenseid tulemusi: uuringutes, milles hinnati MC3T3-E1-rakke erinevates kasvukeskkondades, täheldati märkimisväärseid erinevusi ALP-aktiivsuses, kollageeni ladestumises ja kaltsifitseerumises – see rõhutab kasvukeskkonna standardimise tähtsust eksperimendi kavandamisel.

Lõpuks tuleb märkida, et MC3T3-E1 rakud on hiire päritolu, mis piirab nende otsest rakenduslikku asjakohasust inimese osteoblastide reaktsioonide ennustamisel. Liigispetsiifilised erinevused retseptorite farmakoloogias, tsütokiinide signaalimises ja geeniregulatsioonis tähendavad, et tulemused tuleks enne kliinilist ekstrapoleerimist valideerida inimese osteoblastide süsteemides. Enne katsete alustamist soovitatakse tungivalt teostada rakuliinide rutiinset autentimist STR-profiilide või järgmise põlvkonna sekveneerimisel põhinevate meetoditega, et välistada ristsaastumine. [2]

Rakendused

Osteoblastide diferentseerumise ja osteogeneesi modelleerimine

MC3T3-E1-rakkude kõige olulisem rakendus on osteoblastide diferentseerumise kvantitatiivne mudel. Yohay jt läbimurdeline uuring iseloomustas hiire MC3T3-E1-rakkude erinevaid proliferatiivseid ja diferentseerumisetappe kultuuris, pakkudes ajalist raamistikku selle mõistmiseks, kuidas need preosteoblastid läbivad kasvu-, maatriksi küpsemise ja mineraliseerumise faase. [5] Selles töös määratleti rakuliin sobiva osteogeneesi in vitro mudelina ning kehtestati eksperimentaalsed võrdlusalused – nagu ALP-aktiivsus, kollageenimatriksi ladestumine ja sõlmede mineraliseerumine –, mida kasutatakse standardina tänapäevani. Nende arenguetappide selgus on teinud MC3T3-E1-st võrdlusstandardi, mille alusel hinnatakse uusi osteogeenseid protokolle ja diferentseerumiskeskkondi.

Signaaliteede uuringutes on kasutatud MC3T3-E1 rakke, et analüüsida osteogeneesi molekulaarset mehhanismi. Wang jt näitasid, et apelin-13 aktiveerib oma retseptori APJ kaudu BMP4/SMAD1/5/8 signaaliteed, reguleerides ülespoole osteogeenseid markereid ALP, osteokalsiini, osteopontiini ja Col1A1 ning suurendades RUNX2 ekspressiooni nii mRNA kui ka valgu tasandil MC3T3-E1 rakkudes. [7] Uuritud on ka mikroRNA rolli diferentseerumise reguleerimisel: Zhai jt näitasid, et miR-211-5p/FOXO3 telg soodustab MC3T3-E1-rakkude ja BMSC-de osteogeenset diferentseerumist, aktiveerides Wnt/β-kateniini signaaliteed, millel on tähtsus osteoporoosist tingitud luumurdude paranemisel. [8] MC3T3-E1 rakke kasutades läbi viidud vedeliku nihkepinge uuringud näitasid lisaks, et AnnexinA6-vahendatud autofaagia reguleerib mehaaniliselt indutseeritud osteogeenset diferentseerumist – see avastus on oluline koormust kandvate luude füsioloogia mõistmisel. [9]

MC3T3-E1 rakke on kasutatud kolmemõõtmeliste sfääride moodustamiseks, mis jäljendavad paremini osteoblastide in vivo mikrokeskkonda. Wen jt. tekitasid madala adhesiivsusega kultiveerimissüsteemi abil spontaanseid MC3T3-E1-sfääreid ja näitasid, et võrreldes ühekihiliste kultuuridega oli ALP-aktiivsus ja osteogeenne geeniekspressioon märkimisväärselt kõrgem. [10] Need sfäärid soodustasid alveolaarset luu regenereerumist ja pärssisid põletikku hiire hammaste autotransplantatsiooni mudelis, rõhutades kolmemõõtmeliste MC3T3-E1 kultuurisüsteemide väärtust koetehnoloogia rakendustes.

Osteoporoosi uurimine ja ravimite väljatöötamine

MC3T3-E1 rakud on peamine in vitro platvorm osteoporoosi ravimikandidaatide hindamiseks. Näidati, et looduslikult esinev flavonoid kvertsetiin leevendab osteoporoosiga rottidel osteoblastide funktsioonihäireid, reguleerides ferroptootsi Nrf2/SLC7A11/GPX4 signaalitee kaudu; in vitro valideerimine MC3T3-E1 rakkude abil kinnitas selle signaalitee rolli osteoblastide ellujäämises ja funktsioneerimises. [11] Samamoodi soodustas pilose sarve valgu ekstrakt (PAE) MC3T3-E1 rakkude eluvõimelisust, proliferatsiooni ja osteogeenset diferentseerumist, aktiveerides samal ajal Wnt/β-kateniini signaaliteed, mis peegeldas selle soodsat mõju trabekulaarsele mikroarhitektuurile munasarjade eemaldatud rottidel. [12]

Traditsioonilistest ravimtaimedest saadud polüsahhariide on samuti uuritud, kasutades MC3T3-E1 rakke laiemas osteoporoosi vastase uurimistöö in vitro osana. Yang jt iseloomustasid kahte Psoralea corylifolia polüsahhariidi ja näitasid nende võimet stimuleerida osteogeenset aktiivsust MC3T3-E1 rakkudes, täiendades in vivo tulemusi, mille kohaselt paranes luu mineraaltihedus glükokortikoidide poolt indutseeritud osteoporoosiga hiirtel. [13] On näidatud, et kurkumiini nanokübemed koos narlumosbartiga suurendavad sünergistlikult osteoblastide diferentseerumist MC3T3-E1-rakkudes Wnt/β-kateniini signaalitee kaudu, pakkudes kombineeritud nanokübemete strateegiat luutrauma taastumiseks. [14]

Osteomüeliiti, rasket luuinfektsiooni, on uuritud, kasutades stafülokokkide valgu A-ga (SPA) töödeldud MC3T3-E1 rakke in vitro infektsioonimudelina. Chen jt kasutasid Mendeli randomiseerimist koos nimetatud in vitro katsetega, et näidata, et vereringes ringlev metaboliit p-kresoolsulfaat pärsib MC3T3-E1-rakkude proliferatsiooni ja osteogeenset diferentseerumist, pakkudes uusi mehhanistlikke teadmisi osteomüeliidi patogeneesi metaboolsete tegurite kohta. [15] MC3T3-E1 rakkudes on uuritud ka ferroptose pärssimist ferrostatiin-1 abil, kusjuures tulemused viitavad sellele, et ferroptotilise rakusurma pärssimine suurendab osteoblastide eluvõimet ja luu moodustavat aktiivsust.

Biomaterjalid, implantaaditeadus ja luukoe inseneriteadus

MC3T3-E1 rakud on võrdlusstandard uute biomaterjalide bioloogilise sobivuse ja osteoinduktiivse potentsiaali hindamiseks. Liu jt töötasid välja terbiumiga legeeritud 3D-prinditud karbonaathüdroksüapatiidi (Tb-CHA) raamistikku ning näitasid MC3T3-E1 rakkude abil, et materjal suurendas märkimisväärselt rakkude proliferatsiooni ja diferentseerumist in vitro; sellele järgnenud in vivo valideerimine rottide koljuluu defekti mudelis kinnitas selle osteogeenseid ja angiogeenseid omadusi. [16] Võimalus seostada MC3T3-E1 in vitro reaktsioone in vivo luuregeneratsiooni tulemustega muudab selle rakuliini eriti väärtuslikuks luuasendusmaterjalide iteratiivsel väljatöötamisel.

Titaanimplantaadi pinna töötlemisel on osseointegratsiooni potentsiaali kvantifitseerimiseks laialdaselt kasutatud MC3T3-E1 rakke. Liao ja Li valmistasid titaanipinnale komposiitkatte, mis sisaldas epigallokatehiin-3-gallaati (EGCG), hüdroksüapatiidist (HAP) ja hõbedananoosakestest (AgNPs) ning näitasid, et see EGCG/HAP/AgNPs-kate parandas üheaegselt antibakteriaalset toimet ning soodustas MC3T3-E1-rakkude adhesiiooni, proliferatsiooni ja osteogeenset diferentseerumist. [17] Need tulemused näitavad, kuidas MC3T3-E1-rakud aitavad optimeerida implantaatide katteid, mille puhul tuleb leida tasakaal antimikroobse toime ja pererakkudega ühilduvuse vahel.

Tsinkoksiidi nanokübemed (ZnO-NPs) moodustavad veel ühe biomeditsiiniliste materjalide klassi, mida on uuritud MC3T3-E1 rakkudes. Ryu jt hindasid süstemaatiliselt ZnO-NP ekstraktide kontsentratsioonist sõltuvaid mõjusid rakkudega ühilduvusele ja osteogeensele aktiivsusele ning leidsid, et madalad kontsentratsioonid soodustasid osteoblastide reaktsioone, samas kui kõrgemad kontsentratsioonid olid tsütotoksilised. [18] See annusest sõltuv iseloomustus rõhutab standardiseeritud MC3T3-E1-analüüside kasutamise tähtsust nanomaterjalidel põhinevate luu taastamisstrateegiate ohutuse ja tõhususe vahemike kindlaksmääramisel. Samamoodi on hinnatud külma atmosfäärilise plasma (CAP) tehnoloogia võimet stimuleerida MC3T3-E1 osteogeenset diferentseerumist ajast sõltuvalt, avades sellega potentsiaalseid rakendusi alveolaarse luu regenereerimisel. [19]

Mikrogravitatsioon ja mehaaniline bioloogia

MC3T3-E1 rakud on andnud olulisi teadmisi selle kohta, kuidas mehaaniline ja gravitatsiooniline koormuse vähenemine mõjutab osteoblastide bioloogiat. Hughes-Fulford ja Lewis viisid MC3T3-E1 osteoblastid kosmosesõiduki STS-56 missiooni raames kosmosesse ja näitasid, et mikrogravitatsioonis aktiveeritud rakkudel oli normaalse seerumistimulatsiooni juures häiritud kasv, muutunud tsütoskeleti struktuur ja vähenenud prostaglandiini süntees võrreldes maapealsete kontrollrakkudega. [20] Need tulemused andsid rakulise mehhanistliku aluse astronautidel pikaajaliste kosmoselendude ajal esinevale hästi dokumenteeritud luu mineraaltiheduse vähenemisele.

Hughes-Fulfordi hilisemad uuringud laiendasid neid tähelepanekuid geeniekspressioonile ja signaaliülekandele, näidates, et mikrogravitatsioon muudab MC3T3-E1 osteoblastide transkriptsiooniprogrammi viisil, mis aitab selgitada luu moodustumise vähenemist gravitatsioonikoormuse puudumisel. [21] Nende kosmosebioloogia uuringute tulemusena kinnistusid MC3T3-E1 rakud peamise in vitro mudelina, mille abil uuritakse mikrogravitatsiooni mõju luustikule, mis on otseselt seotud kosmosemeditsiinis luukadu vastu võitlemise meetmete väljatöötamisega.

Maal on mehaanilise bioloogia uuringutes kasutatud MC3T3-E1 süsteemi, et mõista, kuidas vedeliku nihkepinge – mis on luu lakuno-kanalikulaarsete võrgustike interstitiaalse voolu asendusnäitaja – reguleerib osteoblastide diferentseerumist. Uuringud on näidanud, et AnnexinA6 poolt vahendatud autofaagia seob mehaanilise stimulatsiooni osteogeense geeniekspressiooniga MC3T3-E1 rakkudes, pakkudes molekulaarset teavet selle kohta, kuidas luurakkud tajuvad füüsilist koormust ja sellele reageerivad. [9] Need mehaanilise bioloogia rakendused asetavad MC3T3-E1 rakud biofüüsika ja regeneratiivse meditsiini piirialale.

Parodontaalse ja alveolaarse luu regenereerimine

Parodontiidiga seotud luukadu on suur kliiniline väljakutse ning MC3T3-E1-rakud on muutunud oluliseks in vitro vahendiks parodontaalse regeneratsiooni strateegiate testimisel. Kong jt arendasid välja aspiriinist ja alendronaatnaatriumist saadud multifunktsionaalse süsinikpunktide nanomaterjali (ASA-ALN-CDs), mis näitas tugevat antibiofilmi toimet parodontiidi patogeenide vastu ja soodustas MC3T3-E1-rakkude osteogeenset diferentseerumist põletikulistes tingimustes. [22] Rottide parodontiidi mudelis vähendas see materjal alveolaarse luu kadu ja põletikku, pärssides HIF-1α signaaliteed, kusjuures MC3T3-E1 rakkudel in vitro saadud andmed kinnitasid otseselt in vivo täheldatud mõjude mehhanismi.

Külma atmosfäärilise plasma uuringutes keskenduti konkreetselt alveolaarse luu regenereerimisele, eksponeerides MC3T3-E1 rakke spetsiaalselt valmistatud heeliumi CAP-allikale. Negrescu jt näitasid, et CAP-ravi mõjutas rakkude ellujäämist ja osteogeenset diferentseerumist ajast sõltuvalt, mida hinnati elusate/surnud rakkude analüüside, CCK-8 eluvõimelisuse testide, ALP-aktiivsuse mõõtmiste ja morfoloogilise iseloomustamise abil. [19] Need tulemused tõstsid CAP-i alveolaarsete luudefektide füüsilise täiendravi kandidaadiks, kusjuures MC3T3-E1-rakud pakuvad kvantitatiivseid diferentseerumisnäitajaid, mis on vajalikud ravi parameetrite optimeerimiseks.

MC3T3-E1 rakkudega välja töötatud kolmemõõtmeline sfäärkultuuri meetod on otseselt seotud hambaravi regeneratiivse meditsiiniga. Wen jt poolt hamba autotransplantatsiooni mudelis hinnatud sfääride-kollageeni kandja süsteem saavutas võrreldes ühekihiliste rakukontrollidega parema alveolaarse luu regenereerumise ja põletikuvastase geeniekspressiooni, mis viitab sellele, et MC3T3-E1 sfääride tugevnenud parakriinne aktiivsus võib tähendada kliiniliselt olulist kasu hambapesa paranemisel. [10]

Kokkuvõte

MC3T3-E1-rakud on endiselt asendamatu ja laialdaselt valideeritud mudel luubioloogia uurimiseks. Alates nende esialgsest iseloomustamisest kui in vitro mineraliseerumisvõimelistest kloonilistest preosteoblastide liinidest kuni nende praeguse rakendamiseni tipptasemel valdkondades, sealhulgas 3D-bioprintimises, nanotükkidel põhinevas ravimite manustamises, parodontaalse koe regenereerimises ja kosmosemeditsiinis, on need rakud näidanud üles erakordset teaduslikku mitmekülgsust. Nende selgelt määratletud diferentseerumisstaadiumid, tugev markerite ekspressioon ja reageerimisvõime laiale valikule osteogeensetele stiimulitele teevad neist etalonrakuliini uute biomaterjalide hindamiseks, osteoporoosi ja osteomüeliidi ravisihte identifitseerimiseks ning luu moodustumist reguleerivate signaaliteede analüüsimiseks. Ükskõik, kas uurite ferroptootsi, mehaanilist bioloogiat või järgmise põlvkonna implantaatide katteid, pakuvad MC3T3-E1 rakud teie teadustööks vajalikku reprodutseeritavat ja bioloogiliselt asjakohast platvormi. Tutvuge täielike spetsifikatsioonidega või tellige MC3T3-E1 rakud otse cytion.com.

Olulisemad väljaanded

1. Sudo H, Kodama HA, Amagai Y (1983) Vastsündinud hiire kolju luust pärineva uue kloonilise osteogeense rakuliini in vitro diferentseerumine ja kaltsifitseerumine. The Journal of Cell Biology. PMID: 6826647
2. Chen YH, Connelly JP, Florian C (2023) Lühikeste tandemkorduste profiili koostamine järgmise põlvkonna sekveneerimise abil rakuliinide autentsuse kontrollimiseks. Disease Models & Mechanisms. PMID: 37712227
3. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) Hiire rakuliinide SNP-maatriksi profiilide analüüs võimaldab kindlaks teha nende päritolutüved ning toob esile ristsaastumise ja laialt levinud aneuploidia. BMC Genomics. PMID: 25277546
4. Wang D, Christensen K, Chawla K (1999) Erineva in vitro ja in vivo diferentseerumis- ja mineraliseerumisvõimega MC3T3-E1 preosteoblastide subkloonide isoleerimine ja iseloomustamine. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 10352097
5. Quarles LD, Yohay DA, Lever LW (1992) Hiire MC3T3-E1-rakkude erinevad proliferatiivsed ja diferentseerunud staadiumid kultuuris: osteoblastide arengu in vitro mudel. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 1414487
6. Baba TT (2000) Deksametasoni poolt indutseeritud mineraalide ladestumise taastumine MC3T3-E1 rakkudest subkloonitud, mitte-mineraliseeruvate osteoblastirakkude maatriksis. Calcified Tissue International. PMID: 11136541
7. Wang C, Li Z, Yang H (2026) Apelin-13 aktiveerib APJ kaudu BMP4/SMAD-signaaliteed, et soodustada osteoblastide diferentseerumist ja mineraliseerumist. Tissue & Cell. PMID: 42269418
8. Zhai H, Lin M, Lu C (2026) miR-211-5p/FOXO3 telg kiirendab luu teket ja luumurdude paranemist, mõjutades Wnt/β-kateniini signaaliteed. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. PMID: 42219493
9. Pei T, Su G, Yang J (2026) Parandus: Vedeliku nihkepinge reguleerib osteogeenset diferentseerumist AnnexinA6-vahendatud autofaagia kaudu MC3T3-E1 rakkudes. International Journal of Molecular Sciences. PMID: 42196630
10. Wen Z, Li X, Yue L (2026) Spontaanselt moodustunud mesenküümse tüvirakkude sfäärid soodustavad alveolaarse luu regenereerumist ja pärsivad põletikku pärast hamba autotransplantatsiooni. Regenerative Therapy. PMID: 42199333
11. Gong J, Ma Y, Huang J (2026) Karvase sarve valgu ekstrakt leevendab osteoporoosi ja on seotud Wnt/β-kateniini signaalitee aktiveerimisega. Pharmaceuticals (Basel, Šveits). PMID: 42198339
12. He L, Zheng Y, Zeng Z (2026) Kvertsetiini mõju osteoblastide funktsioonihäirele osteoporoosiga rottidel Nrf2/SLC7A11/GPX4 signaalitee kaudu vahendatud ferroptose reguleerimise kaudu. Cytotechnology. PMID: 42238059
13. Yang J, Tang Z, Chen C (2026) Kahe Psoralea corylifolia L. polüsahhariidi struktuuriline iseloomustus ning nende in vivo ja in vitro osteoporoosivastane toime. Carbohydrate Polymers. PMID: 42173575
14. Zhang H, Zhao Y (2026) Kurkumiini nanokübemed koos narlumosbartiga reguleerivad wingless-tüüpi MMTV integratsioonikoha (wnt)/β-kateniini signaaliteed osteoblastilaadsetes rakkudes. Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences. PMID: 42170973
15. Chen X, Mo R, Yang S (2026) Põletikulised tsütokiinid ja ainevahetusprotsessid osteomüeliidi korral: Mendeli randomiseerimise tulemused ja eksperimentaalne kinnitus. Advances in Clinical and Experimental Medicine. PMID: 42200571
16. Liu P, Shen J, Bian Y (2026) Terbiumiga legeeritud 3D-prinditud karbonaathüdroksüapatiidist raamistik soodustab luu regenereerumist. Journal of Translational Medicine. PMID: 42260646
17. Liao J, Li Z (2026) EGCG/HAP/AgNPs komposiitkatte antibakteriaalne ja osteogeenne toime titaanipinnal. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. PMID: 42216990
18. Ryu JH, Mangal U, Kim JH (2026) Tsinkoksiidi nanokübemete annusest sõltuvad mõjud preosteoblastide rakulise reaktsioonile. Scientific Reports. PMID: 42303653
19. Negrescu AM, Zampieri L, Martines E (2026) MC3T3-E1 preosteoblastide ajasõltuv modulatsioon heeliumi külmplasma abil: esialgne uuring selle potentsiaalse tähtsuse kohta alveolaarse luu regenereerimisel. Biomedical Physics & Engineering Express. PMID: 42208566
20. Kong J, Li H, Guo X (2026) ASA-ALN-CD-de terapeutiline tõhusus parodontiidi ravis: antibiofilmist ja põletikuvastasest toimest alveolaarse luu regenereerimiseni. ACS Biomaterials Science & Engineering. PMID: 42213513
21. Hughes-Fulford M, Lewis ML (1996) Mikrogravitatsiooni mõju osteoblastide kasvu aktiveerimisele. Experimental Cell Research. PMID: 8612673
22. Hughes-Fulford M (2001) Geeni ekspressiooni ja signaaliülekande muutused mikrogravitatsioonis. Journal of Gravitational Physiology. PMID: 12638602