BC-3C Cells

McCoy's 5A Medium on väga soovitatav ja spetsialiseeritud keskkond, mis on loodud viiruste kasvu ja paljunemise soodustamiseks esmaste rakukultuurides. See on saavutanud märkimisväärse tunnustuse oma erakordse toimivuse poolest mitmesugustes bioloogilistes uurimistöödes. McCoy's 5A Mediumi üks silmapaistev rakendus on selle kasutamine inimese käärsoole kartsinoomi rakuliinide kultiveerimisel. Täpsemalt on seda kasutatud leutsiinirikka korduva G-valgu-seotud retseptori (LGR5) ja selle rolli uurimisel käärsoolevähi metastaasides. Seda keskkonda on tõhusalt kasutatud mitmete käärsoole kartsinoomi rakuliinide, sealhulgas HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ja TENN, kasvatamisel, võimaldades teadlastel süveneda käärsoolevähi metastaaside aluseks olevatesse mehhanismidesse. Lisaks rakendamisele vähiuuringutes on McCoy's 5A Medium osutunud asendamatuks osteoblastide uurimisel. Teadlased, kes uurivad kaltsiumivaeguse hüdroksüapatiidi ioonide reaktsioonivõimet standardse rakukultuuri keskkonnas, on kasutanud seda keskkonda osteoblastide kasvatamiseks. See rakendus on aidanud paremini mõista osteoblastide ja kaltsiumivaeguse hüdroksüapatiidi vahelisi vastasmõjusid, aidates kaasa edusammudele luu-uuringute valdkonnas. McCoy 5A keskkonna koostis on hoolikalt välja töötatud, muutes Basal Medium Eagle'is leiduvaid aminohappeid, et pakkuda maksavähirakkudele optimaalset toetust. See rikastatud koostis muudab keskkonna sobivaks mitmesugustele väljakujunenud rakuliinidele, samuti esmasrakkudele, suurendades veelgi selle mitmekülgsust ja rakendatavust erinevates uurimistingimustes. McCoy's 5A Mediumi biokeemilised ja füsioloogilised mõjud ulatuvad kaugemale maksavähirakkudest. Seda on edukalt kasutatud luuüdi, naha, igeme, neeru, omentumi, neerupealise, kopsu, põrna, roti embrüo ja muude rakutüüpide esmaste kultuuride kasvu toetamiseks. See lai kasutusala tõestab McCoy's 5A Mediumi laia kasulikkust erinevate rakutüüpide kasvu ja säilitamise toetamisel tervikliku bioloogilise uurimistöö jaoks. Koostis See McCoy's 5A keskmine (modifitseeritud) sisaldab 3,0 g/l glükoosi, stabiilset glutamiini, 2,0 mM naatrium-püruvaati ja 2,2 g/l NaHCO3. Kvaliteedikontroll pH = 7,2 +/
- 0,02 temperatuuril 20–25 °C.  Iga partii on testitud steriilsuse ning mükoplasma ja bakterite puudumise suhtes. Hooldus Hoida külmikus +2 °C kuni +8 °C pimedas kohas. Külmutamine ja soojendamine kuni +37 °C vähendab toote kvaliteeti.  Ärge kuumutage keskkonda üle 37 °C ega kasutage kontrollimatuid soojusallikaid (nt mikrolaineahjusid).  Kui kasutatakse ainult osa keskkonnast, võtke see kogus pudelist välja ja soojendage toatemperatuuril. Kõigi keskkonna, välja arvatud baaskeskkonna, kõlblikkusaeg on 6–8 nädalat alates avamiskuupäevast. Koostis Komponendid mg/L Anorgaanilised sooladKaltsiumkloriid x 2H2O132,0 Magneesiumsulfaat97,67 Kaaliumkloriid400 Naatriumkloriid6460 Dinatriumvesinikfosfaat (veevaba)504,00 Muud komponendidD(+)-glükoos (veevaba)3000 Glutatioon (redutseeritud)0 Lihapepton600 Fenoolpunane naatriumsool11 AminohappedL-alaniin13,36 L-arginiin x HCl42,14 L-asparagiin x H2O45,03 L-asparagiinhape19,97 L-tsüsteiin x HCl x H2O31,75 L-glutamiin (stabiilne)219,15 L-glutamiinhape22,07 Glütsiin7,51 L-histidiin x HCl x H2O20,96 L-hüdroksüproliin19,67 L-isoleutsiin39,36 L-leutsiin39,36 L-lüsiin x HCl36,54 L-metioniin14,92 L-fenüülalaniin16,52 L-proliin17,27 L-seriin26,28 L-treoniin17,87 L-trüptofaan3,06 L-türosiini dinaatriumsool26,10 L-valiin17,57 Vitamiinidp-aminobensoehape1,0 Askorbiinhape0,56 D(+)-biotiin0,20 D-kaltsiumpantotenaat0,2 Koliinkloriid5 Foolhape10 Müo-inositool36 Nikotinaamid0 Nikotiinhape0,5 Püridoksaal HCl0,5 Püridoksiin HCl0,5 Riboflaviin0,2 Tiamiin HCl0,2 Vitamiin B122,0

Toote ülevaade
Maht: 100 ml Säilitamine: ≤-15°C Steriilsus: Steriilselt filtreeritud
Antibiootikum/antimükootiline lahus (100x) on steriilne, kasutusvalmis kontsentraat, mis on mõeldud mikroobse saastumise riski vähendamiseks rakukultuurides ja nendega seotud laboratoorsetes rakendustes. See 100x lahus sisaldab penitsilliini, streptomütsiini ja amfoteritsiin B hästi tõestatud kombinatsiooni, mis tagab laia spektriga antimikroobse toime grampositiivsete ja gramnegatiivsete bakterite, pärmseente ja filamentsete seente vastu. Preparaat sobib kasutamiseks eukarüootilistes rakukultuurides, bakteriaalsetes keskkondades ja muudes saastetundlikes süsteemides, toetades puhtaid ja järjepidevaid laboritoiminguid.
Kasutamine ja eelised Seda rutiinsete teadusprotokollide jaoks optimeeritud lahust kasutatakse laialdaselt aseptiliste tingimuste säilitamiseks rakukultuuride tööprotsessides. See pakub usaldusväärset toimimist saastetundlikes keskkondades, aidates teadlastel vähendada mikroobide ülekasvu ohtu, ilma et see kahjustaks rakkude tervist või katsete reprodutseeritavust. Steriilne filtreeritud koostis välistab vajaduse täiendavate solubiliseerimisetappide järele, toetades ühtlustatud söötme ettevalmistamist ja vähendades igapäevaste laboriprotseduuride varieeruvust.
Kasutamine ja ühilduvus Standardsete töökontsentratsioonide saavutamiseks lahjendage lahust 1:100 teie täielikule kultuurikeskkonnale. Toode ühildub paljude imetajate rakuliinide ja põhikeskkondadega. Tänu pidevale varude kättesaadavusele saavad teadlased kasu usaldusväärsest tarnekindlusest ja lihtsustatud logistika planeerimisest. Stabiilsuse säilitamiseks tuleb lahust hoida temperatuuril ≤ -15 °C ja kaitsta korduvate külmutamis
- ja sulatamistsüklite eest. Ainult teaduslikuks kasutamiseks. Mitte kasutamiseks diagnostilistes või terapeutilistes protseduurides. Mitte kasutamiseks inimestel või loomadel.

Accutase rakkude eralduslahus EDTA ja fenoolpunasega – 100 ml

Accutase on kasutusvalmis, steriilselt filtreeritud rakkude eralduslahus, mis on loodud kui õrn alternatiiv trüpsiinile/EDTA-le imetajate adhesiivsete rakkude eraldamiseks standardsetest kudekultuuri plastnõudest ja adhesiivkattega pindadelt. See ühendab proteolüütilise ja kollageenolüütilise ensüümi aktiivsuse tasakaalustatud soolalahuses, et tagada efektiivne, kuid kontrollitud eraldamine, säilitades rakupinna valgud ning toetades kõrget eluvõimet pärast passaaži ja kiiret uuesti kinnitumist.

Accutase koostis põhineb Dulbecco fosfaadipuhverdatud soolalahusel (DPBS), millele on lisatud EDTA ja fenoolpunane visuaalse pH indikaatorina. Ensüümid on mitte-imetajate ja mitte-bakteriaalset päritolu, mistõttu Accutase sobib eriti hästi tüvirakkude uurimiseks, vaktsiinide tootmiseks ja mis tahes rakendusteks, kus tuleb minimeerida loomsetest või mikroobidest pärinevaid saasteaineid. Lahus inhibeerib ennast automaatselt 37 °C juures, seega ei ole pärast eraldamist vaja neutraliseerivat reagenti ega seerumit sisaldavat keskkonda – rakud saab viia otse värskesse keskkonda.

Peamised omadused

Kasutusvalmis 1x steriilselt filtreeritud vedelik – lahjendamist ega taastamist ei ole vaja
Kombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline ensüümiaktiivsus õrnaks dissotsiatsiooniks
Iga partii on standardiseeritud kindlaksmääratud dissotsiatsioonitegevusele, et tagada partiidevaheline ühtlus
Enüümid ei pärine imetajatelt ega bakteritelt
Inhibeerib ennast 37 °C juures – neutraliseerivat lahust ei ole vaja
Valmistatud Dulbecco PBS-is koos EDTA-ga
Fenoolpunane on lisatud visuaalseks pH-indikaatoriks
pH 6,8–7,8


Tüüpilised rakendused
Accutase lahustab õrnalt mitmesuguseid adhesiivseid ja tundlikke rakutüüpe, sealhulgas inimese embrüonaalseid tüvirakke (hESCs), inimese indutseeritud pluripotentseid tüvirakke (iPSCs), närvi tüvirakke, primaarseid neuroneid ja tavapäraselt kultiveeritavaid adhesiivseid rakuliine, nagu HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ja A549. Tüüpilised kasutusjuhtumid hõlmavad:

Imetajate adhesiivsete rakkude rutiinne subkultiveerimine ja passaažimine
hESCs, iPSCs ja muude tundlike liinide õrn üherakuline dissotsiatsioon
Proovide ettevalmistamine voolutsütomeetria ja FACS-analüüsi jaoks
Rakupinna markerite analüüs, kus epitoobi terviklikkus on oluline
Rakkude rändamise, proliferatsiooni ja apoptoosi analüüsid
Puhkeoleku testid seerumi näljutamise ja onkogeeni transfektsiooni uuringute abil
Tuumorrakkude ja neuraalkreestrakkude rändetestid
Tootmise mastaabis laiendamine bioreaktori töövoogudes

Rutiinseks tööks kandke umbes 10 ml Accutase'i 75 cm2 kultuuripinnale ja inkubeerige 5–10 minutit toatemperatuuril. Optimaalne inkubatsiooniaeg tuleks määrata iga rakuliini jaoks eraldi ja see ei tohiks ületada ühte tundi. Enne lisamist loputage rakukihiga Ca2+/Mg2+-vaba soolalahusega, näiteks kaltsiumi ja magneesiumita DPBS-ga, et eemaldada jääkserum ja kahevalentsed katioonid.

Käsitsemine ja säilitamine
Hoidke avamata pudelit külmutatuna temperatuuril -15 °C või madalamal. Sulatage toatemperatuuril või öösel temperatuuril +2 °C kuni +8 °C. Ärge sulatage Accutase'i 37 °C veevannis, kuna kõrgem temperatuur vähendab ensüümi aktiivsust. Pärast sulatamist võib lahust hoida kuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C; ärge hoidke toatemperatuuril. Ärge soojendage reagenti enne kasutamist 37 °C-ni – lisage see otse pestud rakkudele toatemperatuuril. Pika säilivusaja tagamiseks soovitatakse kasutada ühekordseks kasutamiseks mõeldud alikvoote, et vältida korduvaid sulatamistsükleid. Töötage alati aseptilistes tingimustes.

Kvaliteet
Valmistatud rangete kvaliteedistandardite kohaselt. Iga Accutase'i partii on steriilselt filtreeritud ja testitud steriilsuse, pH, välimuse ja dissotsiatsioonitegevuse suhtes, et tagada partii-partii ühtlane ja korratav tulemus.

Toote spetsifikatsioonid



Spetsifikatsioon
Detail



TootetüüpRakkude eraldamise / dissotsiatsiooni reagent
VormSteriilselt filtreeritud vedelik, kasutusvalmis
Maht100 ml
Töökontsentratsioon1x (kasutusvalmis)
Enüümi aktiivsusKombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline
Enüümi päritoluMitte-imetaja ja mitte-bakteriaalne
PuhversüsteemDulbecco PBS koos EDTA-ga
pH indikaatorFenoolpunane
pH vahemik6,8 – 7,8
VälimusLäbipaistev, heleroosa kuni oranž lahus
Säilitustemperatuur-15 °C või madalam
Stabiilsus pärast sulatamistKuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C
Soovitatav kasutamiskogus~10 ml 75 cm2 kultuuripinna kohta
Tüüpiline inkubatsiooniaeg5–10 minutit toatemperatuuril
TransporditingimusedKülmutatud kuivjääs
KasutuseesmärkAinult teadusuuringuteks ja edasiseks tootmiseks



Koostis (koostis ühe liitri kohta)



Komponent
Kontsentratsioon (mg/l)




Anorgaanilised soolad

Naatriumkloriid (NaCl)8000,00
Dinatriumvesinikfosfaat (Na2HPO4)1150,00
Kaaliumkloriid (KCl)200,00
Kaaliumdivesinikfosfaat (KH2PO4)200,00

Muud koostisosad

EDTA · 4Na (tetranatrium-EDTA)220,00
Fenoolpunane3,00
Patenteeritud ensüümisegu (proteolüütiline ja kollageenolüütiline toime)1x



Accutase on Innovative Cell Technologies, Inc. registreeritud kaubamärk.

Accutase rakkude eralduslahus EDTA ja fenoolpunasega – 100 ml

Accutase on kasutusvalmis, steriilselt filtreeritud rakkude eralduslahus, mis on loodud kui õrn alternatiiv trüpsiinile/EDTA-le imetajate adhesiivsete rakkude eraldamiseks standardsetest kudekultuuri plastnõudest ja adhesiivkattega pindadelt. See ühendab proteolüütilise ja kollageenolüütilise ensüümi aktiivsuse tasakaalustatud soolalahuses, et tagada efektiivne, kuid kontrollitud eraldamine, säilitades rakupinna valgud ning toetades kõrget eluvõimet pärast passaaži ja kiiret uuesti kinnitumist.

Accutase koostis põhineb Dulbecco fosfaadipuhverdatud soolalahusel (DPBS), millele on lisatud EDTA ja fenoolpunane visuaalse pH indikaatorina. Ensüümid on mitte-imetajate ja mitte-bakteriaalset päritolu, mistõttu Accutase sobib eriti hästi tüvirakkude uurimiseks, vaktsiinide tootmiseks ja mis tahes rakendusteks, kus tuleb minimeerida loomsetest või mikroobidest pärinevaid saasteaineid. Lahus inhibeerib ennast automaatselt 37 °C juures, seega ei ole pärast eraldamist vaja neutraliseerivat reagenti ega seerumit sisaldavat keskkonda – rakud saab viia otse värskesse keskkonda.

Peamised omadused

Kasutusvalmis 1x steriilselt filtreeritud vedelik – lahjendamist ega taastamist ei ole vaja
Kombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline ensüümiaktiivsus õrnaks dissotsiatsiooniks
Iga partii on standardiseeritud kindlaksmääratud dissotsiatsioonitegevusele, et tagada partiidevaheline ühtlus
Enüümid ei pärine imetajatelt ega bakteritelt
Inhibeerib ennast 37 °C juures – neutraliseerivat lahust ei ole vaja
Valmistatud Dulbecco PBS-is koos EDTA-ga
Fenoolpunane on lisatud visuaalseks pH-indikaatoriks
pH 6,8–7,8


Tüüpilised rakendused
Accutase lahustab õrnalt mitmesuguseid adhesiivseid ja tundlikke rakutüüpe, sealhulgas inimese embrüonaalseid tüvirakke (hESCs), inimese indutseeritud pluripotentseid tüvirakke (iPSCs), närvi tüvirakke, primaarseid neuroneid ja tavapäraselt kultiveeritavaid adhesiivseid rakuliine, nagu HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ja A549. Tüüpilised kasutusjuhtumid hõlmavad:

Imetajate adhesiivsete rakkude rutiinne subkultiveerimine ja passaažimine
hESCs, iPSCs ja muude tundlike liinide õrn üherakuline dissotsiatsioon
Proovide ettevalmistamine voolutsütomeetria ja FACS-analüüsi jaoks
Rakupinna markerite analüüs, kus epitoobi terviklikkus on oluline
Rakkude rändamise, proliferatsiooni ja apoptoosi analüüsid
Puhkeoleku testid seerumi näljutamise ja onkogeeni transfektsiooni uuringute abil
Tuumorrakkude ja neuraalkreestrakkude rändetestid
Tootmise mastaabis laiendamine bioreaktori töövoogudes

Rutiinseks tööks kandke umbes 10 ml Accutase'i 75 cm2 kultuuripinnale ja inkubeerige 5–10 minutit toatemperatuuril. Optimaalne inkubatsiooniaeg tuleks määrata iga rakuliini jaoks eraldi ja see ei tohiks ületada ühte tundi. Enne lisamist loputage rakukihiga Ca2+/Mg2+-vaba soolalahusega, näiteks kaltsiumi ja magneesiumita DPBS-ga, et eemaldada jääkserum ja kahevalentsed katioonid.

Käsitsemine ja säilitamine
Hoidke avamata pudelit külmutatuna temperatuuril -15 °C või madalamal. Sulatage toatemperatuuril või öösel temperatuuril +2 °C kuni +8 °C. Ärge sulatage Accutase'i 37 °C veevannis, kuna kõrgem temperatuur vähendab ensüümi aktiivsust. Pärast sulatamist võib lahust hoida kuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C; ärge hoidke toatemperatuuril. Ärge soojendage reagenti enne kasutamist 37 °C-ni – lisage see otse pestud rakkudele toatemperatuuril. Pika säilivusaja tagamiseks soovitatakse kasutada ühekordseks kasutamiseks mõeldud alikvoote, et vältida korduvaid sulatamistsükleid. Töötage alati aseptilistes tingimustes.

Kvaliteet
Valmistatud rangete kvaliteedistandardite kohaselt. Iga Accutase'i partii on steriilselt filtreeritud ja testitud steriilsuse, pH, välimuse ja dissotsiatsioonitegevuse suhtes, et tagada partii-partii ühtlane ja korratav tulemus.

Toote spetsifikatsioonid



Spetsifikatsioon
Detail



TootetüüpRakkude eraldamise / dissotsiatsiooni reagent
VormSteriilselt filtreeritud vedelik, kasutusvalmis
Maht100 ml
Töökontsentratsioon1x (kasutusvalmis)
Enüümi aktiivsusKombineeritud proteolüütiline ja kollageenolüütiline
Enüümi päritoluMitte-imetaja ja mitte-bakteriaalne
PuhversüsteemDulbecco PBS koos EDTA-ga
pH indikaatorFenoolpunane
pH vahemik6,8 – 7,8
VälimusLäbipaistev, heleroosa kuni oranž lahus
Säilitustemperatuur-15 °C või madalam
Stabiilsus pärast sulatamistKuni 2 kuud temperatuuril +2 °C kuni +8 °C
Soovitatav kasutamiskogus~10 ml 75 cm2 kultuuripinna kohta
Tüüpiline inkubatsiooniaeg5–10 minutit toatemperatuuril
TransporditingimusedKülmutatud kuivjääs
KasutuseesmärkAinult teadusuuringuteks ja edasiseks tootmiseks



Koostis (koostis ühe liitri kohta)



Komponent
Kontsentratsioon (mg/l)




Anorgaanilised soolad

Naatriumkloriid (NaCl)8000,00
Dinatriumvesinikfosfaat (Na2HPO4)1150,00
Kaaliumkloriid (KCl)200,00
Kaaliumdivesinikfosfaat (KH2PO4)200,00

Muud koostisosad

EDTA · 4Na (tetranatrium-EDTA)220,00
Fenoolpunane3,00
Patenteeritud ensüümisegu (proteolüütiline ja kollageenolüütiline toime)1x



Accutase on Innovative Cell Technologies, Inc. registreeritud kaubamärk.